| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 前言 | 第8-18页 |
| 1.1 动脉粥样硬化发病机理 | 第8-10页 |
| 1.1.1 ox-LDL介导的动脉粥样硬化的发生机理 | 第8-10页 |
| 1.2 PPAR-γ 信号通路 | 第10-18页 |
| 1.2.1 PPAR概述 | 第10-12页 |
| 1.2.2 PPAR-α 的分布、结构与功能 | 第12-13页 |
| 1.2.3 PPAR-δ/β 的分布、结构与功能 | 第13-14页 |
| 1.2.4 PPAR-γ 的分布、结构 | 第14-15页 |
| 1.2.6 PPARγ 的配体 | 第15页 |
| 1.2.7 PPARγ 对下游靶基因的调控 | 第15-16页 |
| 1.2.8 结语 | 第16-18页 |
| 第二章 实验试剂与仪器 | 第18-21页 |
| 2.1 试剂 | 第18-20页 |
| 2.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 第三章 实验方法 | 第21-35页 |
| 3.1 细胞培养 | 第21-22页 |
| 3.2 293T细胞的培养 | 第22-23页 |
| 3.3 PPARγ 的基因调取 | 第23-26页 |
| 3.4 过表达载体的构建 | 第26-30页 |
| 3.4.1 目的基因T载体的构建 | 第26-28页 |
| 3.4.2 将目的基因与慢病毒过表达载体连接 | 第28-30页 |
| 3.5 PPARγ 过表达慢病毒的包装 | 第30-31页 |
| 3.5.1 慢病毒包装 | 第30页 |
| 3.5.2 PPARγ 过表达慢病毒的浓缩纯化 | 第30-31页 |
| 3.5.3 PPARγ 过表达慢病毒的滴度测定 | 第31页 |
| 3.6 PPARγ 过表达细胞株的建立 | 第31-32页 |
| 3.6.1 测定puro抗性对 293T细胞的有效致死浓度 | 第31-32页 |
| 3.6.2 PPARγ 过表达慢病毒对 293T细胞的侵染及稳转细胞株的筛选 | 第32页 |
| 3.7 PPARγ 过表达效果的鉴定 | 第32-35页 |
| 3.7.1 Western-blot检测过表达效果 | 第32-33页 |
| 3.7.2 报告基因检测PPARγ 过表达情况 | 第33-35页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第35-41页 |
| 4.1 总RNA纯度分析 | 第35页 |
| 4.2 PPRAγ 基因片段的获得 | 第35-36页 |
| 4.3 PCR及双酶切方法鉴定目的基因与T载体连接情况 | 第36-37页 |
| 4.4 重组T载体测序鉴定 | 第37页 |
| 4.5 PCR及双酶切方法鉴定目的基因与过表达载体连接情况 | 第37-38页 |
| 4.6 PPARγ 过表达慢病毒的包装及滴度测定 | 第38页 |
| 4.7 PPARγ 过表达 293T细胞株的构建 | 第38-39页 |
| 4.8 报告基因检测PPARγ 过表达细胞株的活性 | 第39-40页 |
| 4.9 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
