| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第13-19页 |
| 第2章 实验材料 | 第19-25页 |
| 2.1 质粒和细菌菌株 | 第19页 |
| 2.2 细胞系和病毒 | 第19页 |
| 2.3 主要药物 | 第19-20页 |
| 2.4 主要生化试剂 | 第20-21页 |
| 2.5 抗体 | 第21页 |
| 2.6 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.7 常用溶液 | 第22-25页 |
| 第3章 实验方法 | 第25-37页 |
| 3.1 HCV蛋白酶抑制剂的筛选及黄芩苷抑制蛋白酶活性的实验方法 | 第25-28页 |
| 3.1.1 HCV-NS3/4A蛋白酶提取方法 | 第25页 |
| 3.1.2 HCV-NS3/4A蛋白定量 | 第25-26页 |
| 3.1.3 HCV-NS3/4A蛋白酶Km值测定 | 第26页 |
| 3.1.4 阳性化合物验证HCV-NS3/4A蛋白酶活性 | 第26-27页 |
| 3.1.5 HCV-NS3/4A蛋白酶抑制剂的高通量筛选 | 第27页 |
| 3.1.6 黄芩苷抑制HCV-NS3/4A蛋白酶Ki值得测定 | 第27-28页 |
| 3.2 HCV解旋酶抑制剂筛选模型的建立及黄芩苷活性测定的实验方法 | 第28-29页 |
| 3.2.1 酶活性的初测 | 第28页 |
| 3.2.2 解旋酶反应条件优化 | 第28页 |
| 3.2.3 阳性化合物验证反应体系 | 第28页 |
| 3.2.4 黄芩苷抑制解旋酶活性的测定 | 第28-29页 |
| 3.3 黄芩苷在细胞培养内抑制HCV复制作用的实验方法 | 第29-37页 |
| 3.3.1 常用分子生物学实验方法 | 第29-32页 |
| 3.3.2 HCV感染液的制备 | 第32-33页 |
| 3.3.3 病毒感染能力验证 | 第33-34页 |
| 3.3.4 HCV耐药突变株验证 | 第34页 |
| 3.3.5 药物溶液浓度设计及配制 | 第34-35页 |
| 3.3.6 药物对细胞的毒性试验 | 第35页 |
| 3.3.7 药物在细胞培养内抗HCV急性感染活性的检测 | 第35页 |
| 3.3.8 药物在细胞培养内对HCV耐药突变株抑制活性的检测 | 第35-36页 |
| 3.3.9 黄芩苷与已知抗HCV药物联用抗HCV作用初探 | 第36页 |
| 3.3.10 数据处理及分析 | 第36-37页 |
| 第4章 实验结果 | 第37-55页 |
| 4.1 HCV蛋白酶抑制剂的筛选及黄芩苷抑制HCV蛋白酶的活性 | 第37-41页 |
| 4.1.1 HCVNS3/4A蛋白酶提取 | 第37页 |
| 4.1.2 HCVNS3/4A蛋白定量 | 第37-38页 |
| 4.1.3 HCVNS3/4A蛋白酶Km值 | 第38-39页 |
| 4.1.4 阳性化合物验证HCVNS3/4A蛋白酶活性 | 第39页 |
| 4.1.5 HCVNS3/4A蛋白酶抑制剂的高通量筛选 | 第39-40页 |
| 4.1.6 黄芩苷抑制HCVNS3/4A蛋白酶的Ki值 | 第40-41页 |
| 4.2 HCV解旋酶抑制剂筛选模型的建立及黄芩苷抑制解旋酶的活性 | 第41-46页 |
| 4.2.1 HCV解旋酶酶活性的初测 | 第41-42页 |
| 4.2.2 解旋酶反应条件优化 | 第42-45页 |
| 4.2.3 盐酸多柔比星验证HCVNS3/4A解旋酶反应体系 | 第45页 |
| 4.2.4 黄芩苷对HCV解旋酶无抑制活性 | 第45-46页 |
| 4.3 黄芩苷在细胞培养内抑制HCV复制作用 | 第46-55页 |
| 4.3.1 黄芩苷在细胞培养内抗HCV急性感染活性 | 第46-47页 |
| 4.3.2 黄芩苷在细胞培养内抗HCV耐药突变病毒感染的活性 | 第47-53页 |
| 4.3.3 黄芩苷与已知抗HCV药物联用抗HCV作用初探 | 第53-55页 |
| 第5章 讨论 | 第55-57页 |
| 结论与展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
