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水稻叶绿素合成缺陷突变体cbd1的鉴定及其功能基因的图位克隆与分析

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第一章 文献综述第12-30页
    1.1 叶绿体的来源及叶绿素的作用第12-13页
    1.2 叶色突变体的研究概况第13-16页
        1.2.1 叶色突变体的来源第13页
        1.2.2 叶色突变体的分类第13-14页
        1.2.3 水稻叶色突变体的遗传方式第14页
        1.2.4 水稻已报道的叶色位点第14-16页
    1.3 叶色基因所参与的生理生化途径第16-23页
        1.3.1 叶绿体发育途径第16-18页
        1.3.2 叶绿素降解途径第18-19页
        1.3.3 血红素合成途径第19-20页
        1.3.4 叶绿素生物合成途径第20-23页
    1.4 谷氨酰-tRNA还原酶研究概况第23-27页
        1.4.1 谷氨酰-tRNA还原酶的发现历史第23页
        1.4.2 谷氨酰-tRNA还原酶参与的生化过程第23-24页
        1.4.3 谷氨酰-tRNA还原酶在其他物种中报道情况第24-25页
        1.4.4 与谷氨酰-tRNA还原酶的互作机制第25-27页
    1.5 本研究的目的意义第27-30页
第二章 突变体cbd1的表型鉴定第30-36页
    2.1 引言第30页
    2.2 材料与方法第30-31页
        2.2.1 实验材料第30页
        2.2.2 叶绿素及类胡萝卜素含量测定第30页
        2.2.3 叶绿体超微结构的透射电镜观察第30-31页
        2.2.4 温度处理方法第31页
        2.2.5 田间表型观察方法第31页
    2.3 结果与分析第31-36页
        2.3.1 田间表型与色素含量的测定第31-32页
        2.3.2 透射电镜观察叶绿体结构第32-33页
        2.3.3 温度处理第33-34页
        2.3.4 农艺性状第34-35页
        2.3.5 讨论第35-36页
第三章 基因定位及功能验证第36-48页
    3.1 引言第36页
    3.2 材料与方法第36-41页
        3.2.1 遗传分析第36页
        3.2.2 定位群体构建第36页
        3.2.3 CTAB法提取叶片总DNA第36-37页
        3.2.4 目的片段的扩增第37页
        3.2.5 非变性SDS-PAGE凝胶检测PCR产物第37-38页
        3.2.6 分子标记的开发及鉴定第38页
        3.2.7 图位克隆的过程第38-39页
        3.2.8 水稻叶片总RNA提取第39页
        3.2.9 实时荧光定量PCR第39-40页
        3.2.10 定位区段内ORF预测及测序第40页
        3.2.11 功能互补载体构建第40-41页
        3.2.12 转基因阳性植株鉴定第41页
        3.2.13 谷氨酰-tRNA还原酶含量测定第41页
    3.3 结果与分析第41-48页
        3.3.1 cbd1遗传分析第41页
        3.3.2 cbd1的精细定位第41-42页
        3.3.3 候选基因的序列分析第42-44页
        3.3.4 OsHemA基因启动子区变异的验证第44-45页
        3.3.5 插入序列分析第45-46页
        3.3.6 OsHemA转基因互补实验第46页
        3.3.7 谷氨酰tRNA还原酶含量测定第46-47页
        3.3.8 讨论第47-48页
第四章 OsHHemA结构及其进化分析第48-52页
    4.1 引言第48页
    4.2 材料与方法第48页
    4.3 结果与分析第48-52页
        4.3.1 OsHemA编码谷氨酰-tRNA还原酶且在水稻中为单拷贝第48-49页
        4.3.2 OsHemA进化树分析第49-51页
        4.3.3 讨论第51-52页
第五章 OsHemA的表达分析第52-58页
    5.1 引言第52页
    5.2 材料与方法第52页
        5.2.1 水稻叶片总RNA提取第52页
        5.2.2 实时荧光定量PCR第52页
        5.2.3 亚细胞定位载体构建第52页
    5.3 结果与分析第52-58页
        5.3.1 OsHemA基因表达模式分析第52-53页
        5.3.2 OsHemA蛋白的亚细胞定位第53-54页
        5.3.3 叶绿素合成相关基因的表达量分析第54-55页
        5.3.4 讨论第55-58页
第六章 全文结论及创新第58-60页
    6.1 全文结论第58页
    6.2 创新之处第58-60页
参考文献第60-70页
附录第70-74页
在读期间发表及待发表论文第74-76页
致谢第76页

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