| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 插图或附表清单 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 1 绪论 | 第14-21页 |
| ·AlphaLISA概述 | 第14-16页 |
| ·AlphaLISA方法的原理 | 第14-15页 |
| ·AlphaLISA方法的研究进展 | 第15-16页 |
| ·肠道病毒71型(EV71)概述 | 第16-19页 |
| ·EV71的起源和引起的疾病 | 第16页 |
| ·EV71的生物学特性 | 第16页 |
| ·病毒颗粒结构 | 第16-17页 |
| ·基因组结构 | 第17-18页 |
| ·EV71流行病学特征 | 第18-19页 |
| ·EV71 IgM抗体检测方法的研究现状 | 第19页 |
| ·本研究的主要内容和技术路线图 | 第19-21页 |
| ·研究的主要内容 | 第19-20页 |
| ·研究的技术路线图 | 第20-21页 |
| 2 AlphaLISA检测EV71 IgM方法的建立 | 第21-37页 |
| ·前言 | 第21页 |
| ·材料和方法 | 第21-37页 |
| ·研究材料 | 第21-25页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·主要试剂、耗材 | 第22-23页 |
| ·溶液配制 | 第23-24页 |
| ·研究所用质粒 | 第24页 |
| ·分析软件 | 第24-25页 |
| ·研究方法 | 第25-37页 |
| ·EV71VP1重组蛋白原核表达质粒的构建和鉴定 | 第25-28页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·VP1全长1-297基因的获得 | 第25-26页 |
| ·VP1全长1-297基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·目的基因T克隆载体的质粒提取及酶切 | 第27-28页 |
| ·VP1全长1-297的表达载体的构建 | 第28页 |
| ·EV71VP1全长及N-端重组蛋白的表达、纯化与鉴定 | 第28-33页 |
| ·EV71VP1全长及N-端重组蛋白的小量表达鉴定 | 第28-29页 |
| ·EV71VP1全长及N-端重组蛋白的纯化 | 第29-32页 |
| ·EV71VP1全长及N-端重组蛋白的WB鉴定 | 第32-33页 |
| ·EV71VP1全长及N-端重组蛋白的生物素化 | 第33页 |
| ·ELISA法摸索抗原抗体反应的最适浓度 | 第33-34页 |
| ·AlphaLISAEV71 IgM反应条件的摸索 | 第34-35页 |
| ·用ELISA法检测病人血清样品中的EV71 IgM | 第35页 |
| ·用AlphaLISA方法检测病人血清样品中的EV71 IgM | 第35-37页 |
| 3 实验结果 | 第37-42页 |
| ·EV71 VP1 1-297全长及N-端重组蛋白表达纯化与鉴定 | 第37-39页 |
| ·EV71 VP1全长及N-端酶切结果 | 第37页 |
| ·EV71 VP1全长及N-端1-177蛋白SDS-PAGE结果 | 第37-38页 |
| ·EV71 VP1全长及N-端1-177蛋白WB结果 | 第38-39页 |
| ·EV71 VP1蛋白的生物素化 | 第39页 |
| ·Bio-EV71 VP1的最适浓度确定 | 第39-40页 |
| ·AlphaLISA检测EV71-IgM反应体系的建立 | 第40-41页 |
| ·EV71 IgM ELISA法检测病人血清 | 第41页 |
| ·AlphaLISA检测EV71-Ig M方法的初步建立 | 第41-42页 |
| 4 实验结果讨论 | 第42-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录A | 第49-56页 |
| 后记或致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 | 第57页 |
