摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-17页 |
·CO 基因研究现状 | 第12-13页 |
·CO 基因的克隆 | 第12页 |
·植物中CO 及其同源基因的结构 | 第12-13页 |
·FT 基因研究现状 | 第13-14页 |
·FT—开花的关键因子 | 第13页 |
·成花素—FT 蛋白? | 第13-14页 |
·FT 蛋白移动的细胞生物学 | 第14页 |
·FT 蛋白在分生组织中的作用 | 第14页 |
·生物钟 | 第14-15页 |
·CO/FT 与其他基因的互作 | 第15页 |
·拟南芥和水稻光周期响应的区别 | 第15-16页 |
·竹子成花机理研究现状 | 第16页 |
·存在的问题 | 第16-17页 |
第二章 雷竹花期观察 | 第17-20页 |
·雷竹作为研究材料的优点 | 第17页 |
·雷竹开花特点观察 | 第17-19页 |
·雷竹开花类型 | 第17-19页 |
·雷竹开花时间及持续时间 | 第19页 |
·讨论 | 第19-20页 |
第三章 雷竹PvCO 基因克隆 | 第20-30页 |
·材料与方法 | 第20-24页 |
·材料及试剂 | 第20-21页 |
·植物材料 | 第20页 |
·酶和生化试剂 | 第20页 |
·菌种 | 第20页 |
·引物合成及测序 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-24页 |
·DNA 提取 | 第21页 |
·总RNA 提取 | 第21-22页 |
·cDNA 的合成 | 第22页 |
·CO 同源基因引物设计 | 第22页 |
·CO 同源基因片段扩增 | 第22-23页 |
·电泳条带回收 | 第23页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第23-24页 |
·回收片段与克隆载体连接 | 第24页 |
·连接产物转化及阳性克隆筛选 | 第24页 |
·菌落检测及测序 | 第24页 |
·序列分析 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-28页 |
·雷竹基因组DNA 提取结果 | 第24-25页 |
·雷竹叶片 RNA 提取结果 | 第25页 |
·雷竹PvCO 基因克隆结果及分析 | 第25-28页 |
·PCR 扩增结果 | 第25-26页 |
·序列测定与分析 | 第26-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
第四章 雷竹PvFT-1 和PvFT-2 基因克隆 | 第30-45页 |
·材料与方法 | 第30-35页 |
·材料与试剂 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-35页 |
·基因组DNA 提取 | 第30页 |
·总RNA 提取 | 第30页 |
·cDNA 的合成 | 第30页 |
·FT 同源基因特异引物设计 | 第30-31页 |
·PvFT-1 基因中间片段PCR 扩增 | 第31-32页 |
·3’RACE | 第32-33页 |
·5’RACE | 第33-35页 |
·PvFT 同源基因全长扩增 | 第35页 |
·PvFT-2 ORF 扩增 | 第35页 |
·电泳条带回收及后续工作 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-43页 |
·雷竹基因组DNA 提取结果 | 第35-36页 |
·雷竹PvFT-1 基因克隆结果 | 第36-41页 |
·PvFT-1 中间片段PCR 扩增结果 | 第36页 |
·PvFT-1 中间片段序列分析 | 第36页 |
·PvFT-13’RACE 结果 | 第36-37页 |
·PvFT-1 3’片段测序及序列分析 | 第37页 |
·PvFT-1 5’RACE 结果 | 第37-38页 |
·PvFT-1 5’片段测序及序列分析 | 第38页 |
·PvFT-1 全长序列PCR 扩增结果 | 第38-39页 |
·全长测序及序列分析 | 第39-41页 |
·雷竹PvFT-2 同源基因克隆结果 | 第41-43页 |
·PvFT-2 同源基因PCR 扩增结果 | 第41页 |
·PvFT-2 同源基因序列分析 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·RACE 扩增cDNA 全长 | 第43-44页 |
·雷竹中的同源基因 | 第44-45页 |
第五章 PvFT-1 与PvFT-2 的表达谱分析 | 第45-53页 |
·材料与方法 | 第45-48页 |
·材料和试剂 | 第45-46页 |
·植物材料 | 第45页 |
·试剂 | 第45页 |
·引物设计与合成 | 第45-46页 |
·方法 | 第46-48页 |
·总RNA 的提取 | 第46-47页 |
·DNA 污染处理 | 第47页 |
·cDNA 合成 | 第47页 |
·RT-PCR | 第47-48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·RNA 提取 | 第48页 |
·开花前后PvFT-1 表达情况分析 | 第48-49页 |
·PvFT-1 昼夜表达情况分析 | 第49页 |
·PvFT-1 与PvFT-2 在17:30 叶片中表达比较 | 第49-50页 |
·PvFT-1 与PvFT-2 表达检测 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
·PvFT-1 在雷竹开花前后的表达情况分析 | 第51-52页 |
·PvFT-1 昼夜表达情况分析 | 第52页 |
·PvFT-1 与PvFT-2 表达差异分析 | 第52-53页 |
第六章 雷竹PvFT-1 基因启动子克隆 | 第53-60页 |
·材料与方法 | 第53-55页 |
·材料 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-55页 |
·基因组DNA 提取 | 第53页 |
·PvFT-1 启动子步移引物设计 | 第53-54页 |
·PvFT-1 启动子扩增 | 第54-55页 |
·电泳条带回收及后续步骤 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-59页 |
·第一次步移结果 | 第55-56页 |
·第二次步移结果 | 第56页 |
·启动子序列拼接 | 第56-57页 |
·启动子序列分析 | 第57-59页 |
·讨论 | 第59-60页 |
第七章 PvFT-1a 与PvFT-2a 表达载体构建及农杆菌转化 | 第60-67页 |
·材料与方法 | 第60-63页 |
·载体与菌株 | 第60页 |
·酶和试剂 | 第60页 |
·引物合成和序列测定 | 第60页 |
·实验方法 | 第60-63页 |
·限制性内切酶的选择 | 第60页 |
·引物设计 | 第60-61页 |
·质粒提取 | 第61页 |
·农杆菌感受态制备 | 第61-62页 |
·高保真片段扩增 | 第62页 |
·平末端加尾 | 第62页 |
·载体酶切 | 第62页 |
·连接 | 第62页 |
·农杆菌电转化和鉴定 | 第62-63页 |
·结果与分析 | 第63-66页 |
·高保真酶PCR 扩增结果 | 第63页 |
·PC1301 载体双酶切 | 第63-64页 |
·中间载体构建及检测 | 第64-65页 |
·表达载体构建及检测 | 第65-66页 |
·表达载体转化农杆菌 | 第66页 |
·讨论 | 第66-67页 |
第八章 结论与展望 | 第67-68页 |
·研究结论 | 第67页 |
·研究展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
致谢 | 第74页 |