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雷竹中CO/FT同源基因的克隆及表达特性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 文献综述第11-17页
   ·CO 基因研究现状第12-13页
     ·CO 基因的克隆第12页
     ·植物中CO 及其同源基因的结构第12-13页
   ·FT 基因研究现状第13-14页
     ·FT—开花的关键因子第13页
     ·成花素—FT 蛋白?第13-14页
     ·FT 蛋白移动的细胞生物学第14页
     ·FT 蛋白在分生组织中的作用第14页
   ·生物钟第14-15页
   ·CO/FT 与其他基因的互作第15页
   ·拟南芥和水稻光周期响应的区别第15-16页
   ·竹子成花机理研究现状第16页
   ·存在的问题第16-17页
第二章 雷竹花期观察第17-20页
   ·雷竹作为研究材料的优点第17页
   ·雷竹开花特点观察第17-19页
     ·雷竹开花类型第17-19页
     ·雷竹开花时间及持续时间第19页
   ·讨论第19-20页
第三章 雷竹PvCO 基因克隆第20-30页
   ·材料与方法第20-24页
     ·材料及试剂第20-21页
       ·植物材料第20页
       ·酶和生化试剂第20页
       ·菌种第20页
       ·引物合成及测序第20-21页
     ·实验方法第21-24页
       ·DNA 提取第21页
       ·总RNA 提取第21-22页
       ·cDNA 的合成第22页
       ·CO 同源基因引物设计第22页
       ·CO 同源基因片段扩增第22-23页
       ·电泳条带回收第23页
       ·大肠杆菌感受态细胞制备第23-24页
       ·回收片段与克隆载体连接第24页
       ·连接产物转化及阳性克隆筛选第24页
       ·菌落检测及测序第24页
       ·序列分析第24页
   ·结果与分析第24-28页
     ·雷竹基因组DNA 提取结果第24-25页
     ·雷竹叶片 RNA 提取结果第25页
     ·雷竹PvCO 基因克隆结果及分析第25-28页
       ·PCR 扩增结果第25-26页
       ·序列测定与分析第26-28页
   ·讨论第28-30页
第四章 雷竹PvFT-1 和PvFT-2 基因克隆第30-45页
   ·材料与方法第30-35页
     ·材料与试剂第30页
     ·实验方法第30-35页
       ·基因组DNA 提取第30页
       ·总RNA 提取第30页
       ·cDNA 的合成第30页
       ·FT 同源基因特异引物设计第30-31页
       ·PvFT-1 基因中间片段PCR 扩增第31-32页
       ·3’RACE第32-33页
       ·5’RACE第33-35页
       ·PvFT 同源基因全长扩增第35页
       ·PvFT-2 ORF 扩增第35页
       ·电泳条带回收及后续工作第35页
   ·结果与分析第35-43页
     ·雷竹基因组DNA 提取结果第35-36页
     ·雷竹PvFT-1 基因克隆结果第36-41页
       ·PvFT-1 中间片段PCR 扩增结果第36页
       ·PvFT-1 中间片段序列分析第36页
       ·PvFT-13’RACE 结果第36-37页
       ·PvFT-1 3’片段测序及序列分析第37页
       ·PvFT-1 5’RACE 结果第37-38页
       ·PvFT-1 5’片段测序及序列分析第38页
       ·PvFT-1 全长序列PCR 扩增结果第38-39页
       ·全长测序及序列分析第39-41页
     ·雷竹PvFT-2 同源基因克隆结果第41-43页
       ·PvFT-2 同源基因PCR 扩增结果第41页
       ·PvFT-2 同源基因序列分析第41-43页
   ·讨论第43-45页
     ·RACE 扩增cDNA 全长第43-44页
     ·雷竹中的同源基因第44-45页
第五章 PvFT-1 与PvFT-2 的表达谱分析第45-53页
   ·材料与方法第45-48页
     ·材料和试剂第45-46页
       ·植物材料第45页
       ·试剂第45页
       ·引物设计与合成第45-46页
     ·方法第46-48页
       ·总RNA 的提取第46-47页
       ·DNA 污染处理第47页
       ·cDNA 合成第47页
       ·RT-PCR第47-48页
   ·结果与分析第48-51页
     ·RNA 提取第48页
     ·开花前后PvFT-1 表达情况分析第48-49页
     ·PvFT-1 昼夜表达情况分析第49页
     ·PvFT-1 与PvFT-2 在17:30 叶片中表达比较第49-50页
     ·PvFT-1 与PvFT-2 表达检测第50-51页
   ·讨论第51-53页
     ·PvFT-1 在雷竹开花前后的表达情况分析第51-52页
     ·PvFT-1 昼夜表达情况分析第52页
     ·PvFT-1 与PvFT-2 表达差异分析第52-53页
第六章 雷竹PvFT-1 基因启动子克隆第53-60页
   ·材料与方法第53-55页
     ·材料第53页
     ·实验方法第53-55页
       ·基因组DNA 提取第53页
       ·PvFT-1 启动子步移引物设计第53-54页
       ·PvFT-1 启动子扩增第54-55页
       ·电泳条带回收及后续步骤第55页
   ·结果与分析第55-59页
     ·第一次步移结果第55-56页
     ·第二次步移结果第56页
     ·启动子序列拼接第56-57页
     ·启动子序列分析第57-59页
   ·讨论第59-60页
第七章 PvFT-1a 与PvFT-2a 表达载体构建及农杆菌转化第60-67页
   ·材料与方法第60-63页
     ·载体与菌株第60页
       ·酶和试剂第60页
       ·引物合成和序列测定第60页
     ·实验方法第60-63页
       ·限制性内切酶的选择第60页
       ·引物设计第60-61页
       ·质粒提取第61页
       ·农杆菌感受态制备第61-62页
       ·高保真片段扩增第62页
       ·平末端加尾第62页
       ·载体酶切第62页
       ·连接第62页
       ·农杆菌电转化和鉴定第62-63页
   ·结果与分析第63-66页
     ·高保真酶PCR 扩增结果第63页
     ·PC1301 载体双酶切第63-64页
     ·中间载体构建及检测第64-65页
     ·表达载体构建及检测第65-66页
     ·表达载体转化农杆菌第66页
   ·讨论第66-67页
第八章 结论与展望第67-68页
   ·研究结论第67页
   ·研究展望第67-68页
参考文献第68-74页
致谢第74页

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