| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1. 绪论 | 第9-13页 |
| 1.1 中国卤虫的研究概况 | 第9页 |
| 1.2 后期促进复合物APC/C | 第9-10页 |
| 1.3 CDC23和CDH1的结构与功能 | 第10-12页 |
| 1.3.1 CDC23和CDH1的结构 | 第10页 |
| 1.3.2 CDC23和CDH1在细胞周期中的作用 | 第10-12页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第12-13页 |
| 2. 材料与方法 | 第13-26页 |
| 2.1 材料 | 第13-17页 |
| 2.1.1 中国卤虫的孵化及培养 | 第13页 |
| 2.1.2 主要药品及试剂 | 第13-16页 |
| 2.1.3 主要设备仪器 | 第16-17页 |
| 2.2 方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 中国卤虫总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.2.2 反转cDNA模板 | 第18页 |
| 2.2.3 目的基因片段的扩增 | 第18页 |
| 2.2.4 cDNA末端快速扩增（RACE） | 第18-20页 |
| 2.2.5 PCR产物的回收纯化与克隆 | 第20-21页 |
| 2.2.6 As-cdc23的生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.2.7 实时荧光定量qPCR | 第21-22页 |
| 2.2.8 中国卤虫As-CDC23蛋白的原核表达 | 第22页 |
| 2.2.9 As-CDC23重组蛋白的大量诱导及纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.10 免疫印迹试验 | 第23-24页 |
| 2.2.11 石蜡切片的制备 | 第24页 |
| 2.2.12 免疫荧光 | 第24-25页 |
| 2.2.13 整体免疫组化 | 第25页 |
| 2.2.14 生物统计分析 | 第25-26页 |
| 3. 结果 | 第26-44页 |
| 3.1 基因全长的克隆 | 第26-29页 |
| 3.1.1 EST片段的获得 | 第26页 |
| 3.1.2 3’端片段的获得 | 第26-27页 |
| 3.1.3 5’端序列的获得 | 第27-28页 |
| 3.1.4 As-cdc23基因全长序列 | 第28-29页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第29-32页 |
| 3.3 As-CDC23基因序列的进化分析 | 第32-34页 |
| 3.4 As-CDC23重组蛋白的获得，表达与纯化 | 第34-36页 |
| 3.4.1 ORF的扩增 | 第34页 |
| 3.4.2 重组蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| 3.4.3 重组蛋白的可溶性检测与纯化 | 第35-36页 |
| 3.5 As-cdc23基因的表达水平分析 | 第36-38页 |
| 3.6 细胞周期相关蛋白的表达水平分析 | 第38-39页 |
| 3.7 As-CDC23和As-CDH1蛋白胁迫下的表达水平分析 | 第39-41页 |
| 3.8 As-CDH1蛋白的整体免疫定位 | 第41-42页 |
| 3.9 As-CDC23，As-CDH1和As-CDC20蛋白的表达部位检测 | 第42-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-46页 |
| 4.1 As-cdc23和cdh1基因的结构与功能 | 第44页 |
| 4.2 As-CDC23和As-CDH1在中国卤虫各发育阶段的表达部位 | 第44-45页 |
| 4.3 周期相关蛋白在中国卤虫早期胚胎发育时期的表达关系 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
