| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 引言 | 第10-20页 |
| 第一节 6-姜酚简介 | 第10-11页 |
| 1.1.1 6-姜酚研究现状 | 第10-11页 |
| 第二节 肿瘤发生发展过程 | 第11-18页 |
| 1.2.1 肿瘤发生的相关研究 | 第11-14页 |
| 1.2.2 肿瘤恶性演进之路-转移 | 第14-15页 |
| 1.2.3 肿瘤与血管生成 | 第15-16页 |
| 1.2.4 抗肿瘤血管生成机制及耐药体系 | 第16-17页 |
| 1.2.5 肿瘤微环境 | 第17-18页 |
| 第三节 本课题设计背景 | 第18页 |
| 第四节 实验设计方案 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第18页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第20-40页 |
| 第一节 实验仪器与试剂汇总 | 第20-23页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验试剂登记表一 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验试剂登记表二 | 第22-23页 |
| 第二节 6-姜酚在动物水平对血管渗透性的影响 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.2.1.1 实验对象 | 第23页 |
| 2.2.1.2 溶剂配置 | 第23页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第23-24页 |
| 2.2.2.1 6-姜酚于BALB/c鼠上的药效学研究 | 第23-24页 |
| 2.2.2.2 6-姜酚于Tg斑马鱼上的药效学研究 | 第24页 |
| 第三节 6-姜酚在细胞水平的药效学影响 | 第24-28页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.3.1.1 实验对象 | 第24页 |
| 2.3.1.2 溶液配置 | 第24-25页 |
| 2.3.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.3.2.1 细胞复苏、培养及冻存 | 第25-26页 |
| 2.3.2.2 6-姜酚的IC50实验 | 第26页 |
| 2.3.2.3 6-姜酚对HUVEC细胞的管道形成能力影响的实验 | 第26-27页 |
| 2.3.2.4 6-姜酚对单层HUVEC细胞渗透性影响的实验 | 第27-28页 |
| 第四节 6-姜酚作用机制探索 | 第28-30页 |
| 2.4.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.4.1.1 实验对象 | 第28页 |
| 2.4.1.2 VEGFR2蛋白提取 | 第28页 |
| 2.4.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 2.4.2.1 蛋白组学评估 6-姜酚作用引起的组间蛋白差异的分析 | 第28-29页 |
| 2.4.2.2 微量热泳动测定 6-姜酚与VEGFR2的相互作用 | 第29页 |
| 2.4.2.3 Pull-Down实验测定 6-姜酚与VEGFR2的相互作用 | 第29页 |
| 2.4.2.4 Biacore测定 6-姜酚与VEGFR2的相互作用 | 第29-30页 |
| 第五节 6-姜酚作用机制验证 | 第30-34页 |
| 2.5.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.5.1.1 实验对象 | 第30页 |
| 2.5.1.2 溶液配置 | 第30-31页 |
| 2.5.2 实验方法 | 第31-34页 |
| 2.5.2.1 分子对接模拟 6-姜酚与VEGFR2的相互作用 | 第31-32页 |
| 2.5.2.2 荧光染料评估 6-姜酚对细胞骨架的影响 | 第32页 |
| 2.5.2.3 扫描电镜下 6-姜酚对细胞形态及渗透性影响 | 第32-33页 |
| 2.5.2.4 Western blot | 第33-34页 |
| 第六节 6-姜酚作用病理学实验检测 | 第34-40页 |
| 2.6.1 实验材料 | 第35页 |
| 2.6.1.1 实验对象 | 第35页 |
| 2.6.1.2 溶液配置 | 第35页 |
| 2.6.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.6.2.1 组织处理 | 第36-37页 |
| 2.6.2.2 HE染色方法 | 第37-38页 |
| 2.6.2.3 PH探针检测肿瘤微环境方法 | 第38页 |
| 2.6.2.4 免疫组织化学染色方法 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第40-60页 |
| 第一节 6-姜酚通过增加微血管渗透性促进血管正常化 | 第40-44页 |
| 3.1.1 鼠耳、鼠足及腹膜血管渗透性受不同浓度 6-姜酚影响 | 第40-41页 |
| 3.1.2 不同浓度 6-姜酚促进单层内皮细胞渗透性 | 第41-42页 |
| 3.1.3 不同浓度 6-姜酚促进低氧诱导的斑马鱼血管正常化 | 第42-43页 |
| 3.1.4 不同浓度 6-姜酚促进内皮细胞管腔形成正常化 | 第43-44页 |
| 第二节 6-姜酚可增强VEGFA与VEGFR2的激动作用 | 第44-50页 |
| 3.2.1 蛋白质组学分析 | 第44-46页 |
| 3.2.2 微量热泳动和Biacore实验 | 第46-47页 |
| 3.2.3 Pull-down试验 | 第47-48页 |
| 3.2.4 分子对接模拟 6-姜酚对VEGFa / VEGFR2作用 | 第48页 |
| 3.2.5 Western Blot信号验证 | 第48-49页 |
| 3.2.6 通过骨架形态及扫描电镜进行细胞形态评估 | 第49-50页 |
| 第三节 6-姜酚调节VEGFR1/R2平衡改善肿瘤微环境抑制肿瘤演进 | 第50-56页 |
| 3.3.1 6-姜酚能够有效抑制肿瘤 | 第50-51页 |
| 3.3.2 病理切片的血管正常化评估 | 第51-53页 |
| 3.3.3 坏死区域评价 | 第53页 |
| 3.3.4 肿瘤组织微环境PH检测 | 第53-54页 |
| 3.3.5 免疫组化染色评估 6-姜酚对相关蛋白的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.6 6-姜酚激动内皮细胞改善肿瘤微环境 | 第55-56页 |
| 第四节 肿瘤微环境的改善有助于顺铂的化疗作用 | 第56-57页 |
| 第五节 讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 结论与展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第66页 |
