摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第11-19页 |
1.1 研究目的和意义 | 第11-12页 |
1.2 植物miRNA的生物合成和作用机制 | 第12-13页 |
1.2.1 植物小RNA分类 | 第12页 |
1.2.2 植物miRNA的生物合成 | 第12页 |
1.2.3 植物miRNA的作用机制 | 第12-13页 |
1.3 植物miRNA的功能研究 | 第13-14页 |
1.3.1 miRNA参与植物生长发育 | 第13页 |
1.3.2 植物miRNA响应逆境胁迫 | 第13-14页 |
1.4 植物对低磷胁迫的研究进展 | 第14-16页 |
1.4.1 磷的吸收和转运相关的功能基因 | 第14-15页 |
1.4.2 转录因子参与低磷胁迫响应 | 第15页 |
1.4.3 miRNA响应低磷胁迫 | 第15-16页 |
1.5 玉米低磷胁迫研究进展 | 第16-18页 |
1.5.1 玉米低磷胁迫相关功能基因的研究 | 第16页 |
1.5.2 组学发掘玉米磷相关基因 | 第16-17页 |
1.5.3 磷胁迫相关QTL研究 | 第17-18页 |
1.5.4 玉米中ZmmiR399的研究进展 | 第18页 |
1.6 拟解决问题和技术路线 | 第18-19页 |
1.6.1 拟解决决问题 | 第18页 |
1.6.2 技术路线 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-29页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 载体和菌株 | 第19页 |
2.1.3 实验仪器及耗材 | 第19-20页 |
2.1.4 实验试剂及药品 | 第20页 |
2.1.5 相关试剂配制 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-29页 |
2.2.1 玉米水培实验 | 第21-22页 |
2.2.2 载体构建 | 第22-26页 |
2.2.3 玉米原生质体 | 第26页 |
2.2.4 转基因玉米构建 | 第26-27页 |
2.2.5 烟草瞬时表达 | 第27页 |
2.2.6 5′-RACE实验 | 第27-28页 |
2.2.7 H_2SO_4-H_2O_2消化-钒钼黄比色法测定磷浓度 | 第28页 |
2.2.8 其它实验方法 | 第28-29页 |
第三章 实验结果与分析 | 第29-50页 |
3.1 ZmmiR399及其候选靶基因ZmPHTs对低磷胁迫的响应 | 第29-37页 |
3.1.1 低磷对B73表型的影响 | 第29-31页 |
3.1.2 低磷胁迫诱导ZmmiR399s上调表达 | 第31-32页 |
3.1.3 候选靶基因ZmPHTs对低磷胁迫的响应 | 第32-34页 |
3.1.4 ZmPHT1;3 和ZmPHT1;8 是ZmmiR399的靶基因 | 第34-37页 |
3.2 Ubi::ZmMIR399b转基因玉米老叶出现磷中毒表型 | 第37-39页 |
3.3 ZmPHO2是ZmmiR399的靶基因 | 第39-42页 |
3.4 ZmPHO2与ZmPHT1;3、ZmPHT1;8 互作 | 第42-44页 |
3.5 ZmPHO2可能介导ZmPHT1;3 和ZmPHT1;8 降解 | 第44-46页 |
3.6 ZmmiR399、ZmPHO2在低磷敏感材料和低磷耐性材料中差异表达 | 第46-47页 |
3.7 全文讨论 | 第47-50页 |
第四章 全文结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
附录:荧光定量引物、载体构建引物及RACE接头引物列表 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |