| 内容提要 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第16-28页 |
| 1.1 IGF-Ⅱ与肝癌发生发展的关系 | 第16-18页 |
| 1.2 脱氧核酶靶向切割癌症相关基因的研究进展 | 第18-24页 |
| 1.3 参考文献 | 第24-28页 |
| 第2章 IGF-ⅡP3靶向特异脱氧核酶设计、合成及活性筛选 | 第28-44页 |
| 2.1 材料 | 第29-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-34页 |
| 2.2.1 靶向特异脱氧核酶靶点的选择、设计与合成 | 第31页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第31-32页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第32页 |
| 2.2.4 靶向特异DRz转染率的检测 | 第32页 |
| 2.2.5 靶向特异DRz酶浓度对抑制效果的影响(MTT法) | 第32页 |
| 2.2.6 靶向特异DRz作用时间对抑制效果的影响(MTT法) | 第32-33页 |
| 2.2.7 靶向特异DRz抑制效果的比较(MTT法) | 第33页 |
| 2.2.8 统计学处理 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-39页 |
| 2.3.1 靶向特异DRz的设计、合成 | 第34-36页 |
| 2.3.2 靶向特异DRz转染率的观察 | 第36-37页 |
| 2.3.3 靶向特异DRz抑制效果的浓度依赖关系 | 第37-38页 |
| 2.3.4 靶向特异DRz抑制效果的时效关系 | 第38页 |
| 2.3.5 靶向特异DRz对SMMC-7721细胞生长抑制率的比较 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-41页 |
| 2.5 小结 | 第41-42页 |
| 2.6 参考文献 | 第42-44页 |
| 第3章 IGF-ⅡP3靶向特异脱氧核酶对靶基因表达影响的研究 | 第44-60页 |
| 3.1 材料 | 第44-46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-50页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第46页 |
| 3.2.2 细胞转染 | 第46-47页 |
| 3.2.3 靶向特异DRz对IGF-ⅡP3mRNA表达的影响(Realtime-PCR检测) | 第47-48页 |
| 3.2.4 靶向特异DRz对IGF-ⅡP3蛋白表达的影响(免疫印迹) | 第48-49页 |
| 3.2.5 靶向特异DRz对IGF-ⅡP3蛋白表达的影响(免疫细胞组化法) | 第49页 |
| 3.2.6 统计学处理 | 第49-50页 |
| 3.3 结果 | 第50-55页 |
| 3.3.1 靶向特异DRz抑制IGF-ⅡP3 mRNA的表达 | 第50-53页 |
| 3.3.2 靶向特异DRz抑制靶IGF-ⅡP3蛋白的表达 | 第53-54页 |
| 3.3.3 靶向特异DRz抑制胞内IGF-ⅡP3蛋白的表达 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-57页 |
| 3.6 参考文献 | 第57-60页 |
| 第4章 IGF-ⅡP3靶向特异脱氧核酶对肝癌细胞生长影响的研究 | 第60-84页 |
| 4.1 IGF-ⅡP3靶向特异脱氧核酶抑制SMMC-7721细胞生长的研究 | 第60-70页 |
| 4.1.1 材料 | 第60-63页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第63-65页 |
| 4.1.3 结果 | 第65-70页 |
| 4.2 IGF-ⅡP3靶向特异脱氧核酶抑制肝癌细胞生长特异性的研究 | 第70-79页 |
| 4.2.1 材料 | 第70-72页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第72-75页 |
| 4.2.3 结果 | 第75-79页 |
| 4.3 讨论 | 第79-81页 |
| 4.4 小结 | 第81-82页 |
| 4.5 参考文献 | 第82-84页 |
| 第5章 IGF-ⅡP3靶向特异脱氧核酶对肝癌SMMC-7721细胞转移影响的研究 | 第84-101页 |
| 5.1 材料 | 第84-87页 |
| 5.2 实验方法 | 第87-91页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第87页 |
| 5.2.2 细胞转染 | 第87页 |
| 5.2.3 脱氧核酶最小致死浓度的筛选(流式细胞仪检测) | 第87页 |
| 5.2.4 DRz抗SMMC-7721细胞迁移实验(细胞划痕法) | 第87-88页 |
| 5.2.5 DRz抗SMMC-7721细胞侵袭实验 | 第88页 |
| 5.2.6 DRz抗SMMC-7721细胞与细胞外基质黏附实验 | 第88页 |
| 5.2.7 DRz抗SMMC-7721细胞与人fb黏附实验 | 第88页 |
| 5.2.8 VEGF、MMP2与MMP9蛋白检测(免疫印迹) | 第88-90页 |
| 5.2.9 统计学分析 | 第90页 |
| 5.2.10 统计学分析 | 第90-91页 |
| 5.3 结果 | 第91-96页 |
| 5.3.1 脱氧核酶最小致死浓度的筛选 | 第91页 |
| 5.3.2 DRz抑制SMMC-7721细胞迁移和侵袭活性 | 第91-93页 |
| 5.3.3 DRz抑制SMMC-7721细胞与细胞基质的粘附性 | 第93页 |
| 5.3.4 DRz抑制SMMC-7721细胞与Fb的粘附性 | 第93-94页 |
| 5.3.5 DRz抑制SMMC-7721细胞VEGF和MMP-9表达 | 第94-96页 |
| 5.4 讨论 | 第96-98页 |
| 5.5 小结 | 第98-99页 |
| 5.6 参考文献 | 第99-101页 |
| 结论 | 第101-102页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第102-104页 |
| 攻读学位期间参与的课题 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
