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玉米蚜和麦二叉蚜内共生菌groEL基因的克隆与原核表达

中文摘要第3-4页
英文摘要第4页
第一章 文献综述第9-24页
    §1.1 蚜虫传毒方式的分类第9-11页
    §1.2 蚜虫非循回型(non-circulative)传毒的分子机制第11-17页
        §1.2.1 黄瓜花叶病毒属(Cucumvirus)第11-12页
        §1.2.2 马铃薯Y病毒属(Potyvirus)第12-16页
            §1.2.2.1 外壳蛋白(CP)第12-13页
            §1.2.2.2 蚜传辅助成分(HC-Pro)第13-14页
            §1.2.2.3 CP与HC-Pro的相互作用以及与蚜虫口针病毒附着位点(VAS)的相互作用第14-16页
        §1.2.3 花椰菜花叶病毒属第16-17页
            §1.2.3.1 蚜传辅助因子(ATF)第16页
            §1.2.3.2 ORF3产物—P15第16-17页
    §1.3 蚜虫循回型(circulative)传毒的分子机制第17-21页
        §1.3.1 蚜虫循回非增殖型传毒的一般模型第17-19页
        §1.3.2 CP及CP通读蛋白(RTP)在循回传毒中的作用第19-20页
        §1.3.3 蚜虫内共生菌(Buchnera spp.)GroEL蛋白在循回传毒中的作用第20-21页
    §1.4 本研究的目的、意义第21-24页
第二章 材料与方法第24-35页
    §2.1 材料第24页
        §2.1.1 供试蚜虫第24页
        §2.1.2 菌种、质粒与试剂第24页
    §2.2 方法第24-35页
        §2.2.1 模板DNA的提取第24-25页
        §2.2.2 引物设计与合成第25页
        §2.2.3 Buchnera groEL基因的扩增第25页
        §2.2.4 核酸的琼脂糖凝胶电泳第25-26页
        §2.2.5 PCR产物的纯化第26页
        §2.2.6 目的片段与克隆载体的连接第26-27页
        §2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第27-28页
        §2.2.8 质粒DNA的小量提取第28-29页
        §2.2.9 重组质粒的鉴定第29页
        §2.2.10 菌种保存第29-30页
        §2.2.11 全序列测定与分析第30页
        §2.2.12 Buchnera groEL基因的原核表达第30-31页
        §2.2.13 SDS-PAGE检测原核蛋白的表达第31页
        §2.2.14 融合蛋白的纯化第31-32页
        §2.2.15 抗血清的制备第32页
        §2.2.16 Western blot检测第32-35页
第三章 结果与分析第35-48页
    §3.1 模板DNA的提取第35页
    §3.2 PCR扩增目的片段第35页
    §3.3 groEL基因的克隆与鉴定第35-36页
    §3.4 序列测定与分析第36-39页
    §3.5 基因序列分析与比较第39-41页
    §3.6 蛋白质的氨基酸序列推导第41页
    §3.7 氨基酸序列分析与比较第41-42页
    §3.8 原核表达载体的构建第42-45页
    §3.9 Buchnera groEL基因的原核表达第45-47页
    §3.10 抗血清的琼脂双扩散检测第47页
    §3.11 Western blot检测第47-48页
第四章 讨论第48-51页
    §4.1 GroEL蛋白结合位点的预测第48页
    §4.2 GroEL蛋白结构的预测第48-49页
    §4.3 Buchnera groEL基因的原核表达第49-50页
    §4.4 蚜虫Buchnera GroEL蛋白抗血清的Western blot检测第50-51页
结论第51-52页
参考文献第52-62页
附图第62-70页
作者简介第70-71页
致谢第71页

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