| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 前言 | 第10-18页 |
| 1 牛布氏杆菌病的概述 | 第10-11页 |
| 1.1 病原学 | 第10页 |
| 1.2 牛布氏杆菌培养的生化特性 | 第10页 |
| 1.3 布氏杆菌的检测和鉴定 | 第10-11页 |
| 1.4 布氏杆菌病防治和检疫 | 第11页 |
| 2 PBMC研究进展 | 第11-13页 |
| 2.1 牛单核细胞研究进展 | 第11-12页 |
| 2.2 T淋巴细胞的分布、来源与体态特征 | 第12页 |
| 2.3 T细胞的发育和分化 | 第12-13页 |
| 3 cDNA文库的构建及酵母双杂交cDNA文库 | 第13-14页 |
| 3.1 cDNA文库的发展概述 | 第13页 |
| 3.2 基因文库 | 第13页 |
| 3.3 构建cDNA文库的技术要领 | 第13-14页 |
| 3.4 cDNA文库的应用 | 第14页 |
| 4 蛋白质相互作用及酵母双杂交系统 | 第14-16页 |
| 4.1 蛋白质相互作用 | 第14-15页 |
| 4.2 酵母双杂交技术研究进展 | 第15-16页 |
| 5 文库的鉴定及菌落PCR | 第16-17页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 材料与方法 | 第18-25页 |
| 1 材料 | 第18-19页 |
| 1.1 主要试剂 | 第18-19页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第19页 |
| 2 试验方法 | 第19-25页 |
| 2.1 引物的设计与合成 | 第19页 |
| 2.2 牛外周血单个核细胞的制备 | 第19页 |
| 2.3 牛外周血单个核细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.4 cDNA第一链的合成 | 第20-21页 |
| 2.5 LD-cDNA的双链合成 | 第21页 |
| 2.6 目的基因纯化回收 | 第21-22页 |
| 2.7 Y187感受态细胞的制备 | 第22页 |
| 2.8 目的基因与pGADT7-Rector的转化 | 第22-23页 |
| 2.9 文库的构建与收获 | 第23页 |
| 2.10 文库的鉴定 | 第23-25页 |
| 结果 | 第25-28页 |
| 1 牛外周血单个核细胞总RNA的提取及鉴定 | 第25页 |
| 2 cDNA合成鉴定 | 第25页 |
| 3 LD-PCR扩增及纯化鉴定 | 第25-26页 |
| 4 文库容量鉴定 | 第26-27页 |
| 5 菌落PCR鉴定结果 | 第27-28页 |
| 讨论 | 第28-30页 |
| 结论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 作者简介 | 第36-37页 |
| 硕士期间发表并参与的论文 | 第37页 |