| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第13-26页 |
| 1 芜菁花叶病毒（TuMV）概述 | 第13-15页 |
| 1.1 芜菁花叶病毒的生物学特性 | 第13页 |
| 1.2 芜菁花叶病毒的分子生物学特性 | 第13-15页 |
| 2 芜菁花叶病毒 p3 基因及其编码蛋白研究进展 | 第15-19页 |
| 2.1 p3 基因的分子变异 | 第15-16页 |
| 2.2 P3 蛋白功能研究 | 第16-18页 |
| 2.3 P3N-PIPO 蛋白功能研究 | 第18页 |
| 2.4 P3 蛋白与寄主互作的研究 | 第18-19页 |
| 3 SWEET 蛋白研究概况 | 第19-21页 |
| 3.1 SWEET 蛋白概述 | 第19-20页 |
| 3.2 SWEET 蛋白的功能 | 第20-21页 |
| 4 植物病毒与寄主互作研究方法 | 第21-25页 |
| 4.1 蛋白间相互作用研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 4.2 蛋白间相互作用的研究方法 | 第22-25页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 芜菁花叶病毒 p3 基因的分子变异 | 第26-39页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| 1.1 病毒样品的采集 | 第26页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第26页 |
| 1.3 生化及分子生物学试剂 | 第26页 |
| 1.4 主要试剂及配置 | 第26-27页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-32页 |
| 2.1 p3 基因的克隆 | 第27-30页 |
| 2.2 p3 基因序列分析 | 第30-32页 |
| 2.3 P3 蛋白跨膜结构分析 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-37页 |
| 3.1 p3 基因的克隆结果 | 第32-34页 |
| 3.2 p3 基因序列分析 | 第34-37页 |
| 3.3 P3 蛋白跨膜结构分析结果 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 p3 基因的原核表达与 P3 蛋白抗血清的制备 | 第39-53页 |
| 1 材料 | 第39-42页 |
| 1.1 病毒样品的采集 | 第39页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第39页 |
| 1.3 生化及分子生物学试剂 | 第39页 |
| 1.4 主要试剂及配置 | 第39-41页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第41-42页 |
| 2 方法 | 第42-48页 |
| 2.1 原核表达载体 pET28a-JCR06 的构建 | 第42-45页 |
| 2.2 融合蛋白原核表达 | 第45-46页 |
| 2.3 融合蛋白纯化 | 第46页 |
| 2.4 P3 抗血清制备与检测 | 第46-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-51页 |
| 3.1 原核表达载体 pET28a-JCR06 的构建 | 第48-49页 |
| 3.2 融合蛋白原核表达 | 第49页 |
| 3.3 融合蛋白纯化 | 第49-50页 |
| 3.4 P3 抗血清的制备与检测 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 拟南芥酵母双杂交文库中与 TuMV P3 蛋白互作的寄主蛋白的筛选 | 第53-66页 |
| 1 材料 | 第53-55页 |
| 1.1 病毒样品的采集 | 第53页 |
| 1.2 菌株、载体和文库 | 第53页 |
| 1.3 生化及分子生物学试剂 | 第53页 |
| 1.4 主要试剂及配置 | 第53-55页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-60页 |
| 2.1 cDNA 文库的扩繁及滴度鉴定 | 第55-56页 |
| 2.2 酵母双杂交诱饵载体 pGBKT7-P3 的构建及转化酵母菌株 | 第56-57页 |
| 2.3 诱饵载体毒性及自激活的检测 | 第57页 |
| 2.4 诱饵载体 pGBKT7-P3 筛选拟南芥 cDNA 文库 | 第57-60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-64页 |
| 3.1 扩繁文库的滴度鉴定 | 第60页 |
| 3.2 重组质粒的 PCR 及双酶切验证 | 第60页 |
| 3.3 诱饵载体毒性及自激活的检测结果 | 第60-61页 |
| 3.4 诱饵载体 pGBKT7-P3 筛选拟南芥 cDNA 文库 | 第61-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 P3 蛋白与 AtSWEET1 蛋白之间相互作用的验证 | 第66-74页 |
| 1 材料 | 第66-67页 |
| 1.1 样品来源 | 第66页 |
| 1.2 菌株和载体 | 第66页 |
| 1.3 生化及分子生物学试剂 | 第66-67页 |
| 1.4 主要试剂及配置 | 第67页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-71页 |
| 2.1 植物表达载体和 BiFC 重组载体的构建 | 第67-69页 |
| 2.2 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第69页 |
| 2.3 农杆菌浸润接种及亚细胞定位观察 | 第69-70页 |
| 2.4 农杆菌侵染及双分子荧光互补观察 | 第70-71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-73页 |
| 3.1 重组质粒的 PCR 及酶切验证 | 第71页 |
| 3.2 AtSWEET1 亚细胞定位观察 | 第71-72页 |
| 3.3 BiFC 验证 P3 与 AtSWEET1 的相互作用 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-74页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 讨论 | 第75-76页 |
| 本研究存在的问题和展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
