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新型内切-β-葡聚糖酶基因在里氏木霉中的重组与表达

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1 绪论第13-29页
    1.1 引言第13页
    1.2 纤维素酶概述第13-20页
        1.2.1 纤维素酶酶系组成第13-14页
        1.2.2 纤维素酶的结构第14-15页
        1.2.3 纤维素酶的作用机理第15-17页
        1.2.4 纤维素酶的主要来源第17页
        1.2.5 里氏木霉产纤维素酶概述第17-20页
        1.2.6 青霉产纤维素酶概述第20页
    1.3 纤维素酶活力测定第20-21页
    1.4 纤维素酶的应用第21-24页
        1.4.1 在废纸脱墨中的应用第21-22页
        1.4.2 在纺织印染工业中的应用第22-23页
        1.4.3 在生物质酒精工业中的应用第23-24页
    1.5 丝状真菌表达体系第24-27页
        1.5.1 转化方法第24-25页
        1.5.2 丝状真菌遗传转化的选择标记第25-26页
        1.5.3 丝状真菌表达体系研究现状第26-27页
    1.6 本课题的研究思路和主要内容第27-29页
2 重组内切-β-葡聚糖酶基因Egl1n在里氏木霉中的表达第29-50页
    2.1 引言第29页
    2.2 材料与方法第29-40页
        2.2.1 材料与试剂第29-31页
        2.2.2 培养基第31-32页
        2.2.3 实验仪器第32页
        2.2.4 实验方法第32-40页
    2.3 结果与讨论第40-48页
        2.3.1 重组内切-β-葡聚糖酶基因Egl1n的获得第40-41页
        2.3.2 重组载体的构建第41-42页
        2.3.3 重组载体的验证分析第42-44页
        2.3.4 Egl1n基因的序列分析第44-45页
        2.3.5 根瘤农杆菌介导转化第45页
        2.3.6 重组里氏木霉转化子的筛选第45-46页
        2.3.7 重组里氏木霉PCR验证第46-47页
        2.3.8 重组里氏木霉发酵液的蛋白质电泳检测第47-48页
    2.4 小结第48-50页
3 重组里氏木霉产酶实验第50-58页
    3.1 引言第50页
    3.2 材料与方法第50-53页
        3.2.1 材料与试剂第50-51页
        3.2.2 培养基第51-52页
        3.2.3 实验仪器第52页
        3.2.4 实验方法第52-53页
    3.3 结果与讨论第53-56页
        3.3.1 重组里氏木霉摇瓶产酶结果第53-54页
        3.3.2 重组里氏木霉摇瓶发酵的产酶进程第54-55页
        3.3.3 发酵罐分批发酵试验第55-56页
    3.4 小结第56-58页
4 重组内切-β-葡聚糖酶的酶学性质研究第58-69页
    4.1 引言第58页
    4.2 材料与方法第58-63页
        4.2.1 材料和试剂第58-60页
        4.2.2 培养基第60-61页
        4.2.3 实验仪器第61页
        4.2.4 实验方法第61-63页
    4.3 结果与讨论第63-67页
        4.3.1 温度对重组内切-β-葡聚糖酶活性的影响第63页
        4.3.2 温度对重组内切-β-葡聚糖酶稳定性的影响第63-64页
        4.3.3 pH对重组内切-β-葡聚糖酶活性的影响第64-65页
        4.3.4 pH对重组内切-β-葡聚糖酶稳定性的影响第65-66页
        4.3.5 金属离子对重组内切-β-葡聚糖酶的影响第66-67页
        4.3.6 重组内切-β-葡聚糖酶稳定性试验性第67页
    4.4 小结第67-69页
5 结论与展望第69-72页
    5.1 结论第69-70页
        5.1.1 目的基因Egl1n的获取与重组载体的构建第69页
        5.1.2 根瘤农杆菌介导转化与重组转化子的筛选验证第69-70页
        5.1.3 重组里氏木霉的发酵实验第70页
        5.1.4 重组内切-β-葡聚糖的酶学性质研究第70页
    5.2 展望第70-72页
参考文献第72-81页
附录:论文发表情况第81页

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