致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 绪论 | 第13-29页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 纤维素酶概述 | 第13-20页 |
1.2.1 纤维素酶酶系组成 | 第13-14页 |
1.2.2 纤维素酶的结构 | 第14-15页 |
1.2.3 纤维素酶的作用机理 | 第15-17页 |
1.2.4 纤维素酶的主要来源 | 第17页 |
1.2.5 里氏木霉产纤维素酶概述 | 第17-20页 |
1.2.6 青霉产纤维素酶概述 | 第20页 |
1.3 纤维素酶活力测定 | 第20-21页 |
1.4 纤维素酶的应用 | 第21-24页 |
1.4.1 在废纸脱墨中的应用 | 第21-22页 |
1.4.2 在纺织印染工业中的应用 | 第22-23页 |
1.4.3 在生物质酒精工业中的应用 | 第23-24页 |
1.5 丝状真菌表达体系 | 第24-27页 |
1.5.1 转化方法 | 第24-25页 |
1.5.2 丝状真菌遗传转化的选择标记 | 第25-26页 |
1.5.3 丝状真菌表达体系研究现状 | 第26-27页 |
1.6 本课题的研究思路和主要内容 | 第27-29页 |
2 重组内切-β-葡聚糖酶基因Egl1n在里氏木霉中的表达 | 第29-50页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 材料与方法 | 第29-40页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第29-31页 |
2.2.2 培养基 | 第31-32页 |
2.2.3 实验仪器 | 第32页 |
2.2.4 实验方法 | 第32-40页 |
2.3 结果与讨论 | 第40-48页 |
2.3.1 重组内切-β-葡聚糖酶基因Egl1n的获得 | 第40-41页 |
2.3.2 重组载体的构建 | 第41-42页 |
2.3.3 重组载体的验证分析 | 第42-44页 |
2.3.4 Egl1n基因的序列分析 | 第44-45页 |
2.3.5 根瘤农杆菌介导转化 | 第45页 |
2.3.6 重组里氏木霉转化子的筛选 | 第45-46页 |
2.3.7 重组里氏木霉PCR验证 | 第46-47页 |
2.3.8 重组里氏木霉发酵液的蛋白质电泳检测 | 第47-48页 |
2.4 小结 | 第48-50页 |
3 重组里氏木霉产酶实验 | 第50-58页 |
3.1 引言 | 第50页 |
3.2 材料与方法 | 第50-53页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第50-51页 |
3.2.2 培养基 | 第51-52页 |
3.2.3 实验仪器 | 第52页 |
3.2.4 实验方法 | 第52-53页 |
3.3 结果与讨论 | 第53-56页 |
3.3.1 重组里氏木霉摇瓶产酶结果 | 第53-54页 |
3.3.2 重组里氏木霉摇瓶发酵的产酶进程 | 第54-55页 |
3.3.3 发酵罐分批发酵试验 | 第55-56页 |
3.4 小结 | 第56-58页 |
4 重组内切-β-葡聚糖酶的酶学性质研究 | 第58-69页 |
4.1 引言 | 第58页 |
4.2 材料与方法 | 第58-63页 |
4.2.1 材料和试剂 | 第58-60页 |
4.2.2 培养基 | 第60-61页 |
4.2.3 实验仪器 | 第61页 |
4.2.4 实验方法 | 第61-63页 |
4.3 结果与讨论 | 第63-67页 |
4.3.1 温度对重组内切-β-葡聚糖酶活性的影响 | 第63页 |
4.3.2 温度对重组内切-β-葡聚糖酶稳定性的影响 | 第63-64页 |
4.3.3 pH对重组内切-β-葡聚糖酶活性的影响 | 第64-65页 |
4.3.4 pH对重组内切-β-葡聚糖酶稳定性的影响 | 第65-66页 |
4.3.5 金属离子对重组内切-β-葡聚糖酶的影响 | 第66-67页 |
4.3.6 重组内切-β-葡聚糖酶稳定性试验性 | 第67页 |
4.4 小结 | 第67-69页 |
5 结论与展望 | 第69-72页 |
5.1 结论 | 第69-70页 |
5.1.1 目的基因Egl1n的获取与重组载体的构建 | 第69页 |
5.1.2 根瘤农杆菌介导转化与重组转化子的筛选验证 | 第69-70页 |
5.1.3 重组里氏木霉的发酵实验 | 第70页 |
5.1.4 重组内切-β-葡聚糖的酶学性质研究 | 第70页 |
5.2 展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-81页 |
附录:论文发表情况 | 第81页 |