| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-19页 |
| ·黄萎病 | 第12-13页 |
| ·黄萎病菌 | 第12-13页 |
| ·黄萎病发病特征 | 第13页 |
| ·大丽轮枝菌致病机理研究进展 | 第13-15页 |
| ·大丽轮枝菌致病机理假说 | 第13-14页 |
| ·大丽轮枝菌致病分子机理 | 第14-15页 |
| ·农杆菌介导的真菌遗传转化 | 第15-18页 |
| ·传统真菌遗传转化技术 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导的真菌遗传转化机理 | 第16-18页 |
| ·利用插入突变标记、克隆相关基因 | 第18页 |
| ·本研究的实验目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 大丽轮枝菌遗传转化双元载体的构建 | 第19-27页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌株和质粒 | 第19-20页 |
| ·实验仪器 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·实验所用抗生素及其浓度 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·质粒提取（碱裂解法） | 第20-21页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| ·琼脂糖凝胶回收 | 第21-22页 |
| ·酶切反应 | 第22页 |
| ·目的片段PCR 扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第23页 |
| ·DNA 片段连接 | 第23页 |
| ·大肠杆菌转化（热激转化法） | 第23-24页 |
| ·用于CaCl_2 转化法的农杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·农杆菌转化（热激转化法） | 第24页 |
| ·实验结果 | 第24-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 大丽轮枝菌T-DNA 突变体库的构建 | 第27-35页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验菌株 | 第27页 |
| ·实验试剂 | 第27页 |
| ·实验仪器 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-29页 |
| ·大丽轮枝菌对潮霉素的抗性检测 | 第27页 |
| ·大丽轮枝菌的遗传转化 | 第27-28页 |
| ·用于PCR 检测的真菌DNA 快速提取方法 | 第28-29页 |
| ·大丽轮枝菌突变体PCR 分子验证 | 第29页 |
| ·突变体潮霉素抗性表达的稳定性实验 | 第29页 |
| ·实验结果 | 第29-33页 |
| ·大丽轮枝菌对潮霉素的抗性检测 | 第29-30页 |
| ·转化条件的优化 | 第30-32页 |
| ·大丽轮枝菌的遗传转化 | 第32页 |
| ·突变体PCR 分子验证结果 | 第32-33页 |
| ·突变体潮霉素抗性表达的稳定性实验 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第四章 部分突变体表型鉴定与分析 | 第35-54页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·实验菌株 | 第35页 |
| ·实验试剂 | 第35页 |
| ·实验仪器 | 第35页 |
| ·培养基及培养条件 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·突变体产孢量的检测 | 第35页 |
| ·突变体在培养基上生长直径的检测 | 第35-36页 |
| ·大丽轮枝菌随机插入突变体致病性鉴定 | 第36-38页 |
| ·实验结果 | 第38-53页 |
| ·突变体在不同培养基中菌落形态的检测结果 | 第38页 |
| ·突变体在不同碳源固体培养基上的生长能力 | 第38-43页 |
| ·突变体在查比克培养基中产孢量的检测结果 | 第43-47页 |
| ·大丽轮枝菌突变体致病性鉴定结果 | 第47-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 突变体插入定位初步探索 | 第54-61页 |
| ·引言 | 第54-55页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| ·实验结果 | 第57-60页 |
| ·TAIL-PCR 扩增结果 | 第57页 |
| ·突变体T-DNA 侧翼序列的分析 | 第57-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 第六章 全文结论 | 第61-62页 |
| ·结论 | 第61页 |
| ·后续工作 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录1 常用培养基及抗生素的配制 | 第68-71页 |
| 附录2 突变体侧翼序列 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |