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小黑杨(Populus simonii×P.nigra)休眠顶芽的磷酸化和乙酰化蛋白质组学研究

摘要第1-5页
Abstract第5-14页
1 绪论第14-26页
   ·杨树概述第14页
   ·植物芽休眠调控机理的研究进展第14-18页
     ·芽休眠概述第14-15页
     ·内休眠分子调控的研究进展第15-16页
     ·类休眠分子调控的研究进展第16-17页
     ·生态休眠分子调控的研究进展第17-18页
   ·磷酸化蛋白质组学研究进展第18-22页
     ·蛋白质磷酸化与磷酸化蛋白质组第18-19页
     ·磷酸化蛋白质组分析中常用的分离富集技术第19-20页
     ·生物质谱法进行磷酸化蛋白质组研究第20-22页
   ·植物磷酸化蛋白质组研究进展第22-23页
     ·植物对非生物、生物环境因子响应过程的磷酸化蛋白质组第22页
     ·亚细胞磷酸化蛋白质组的鉴定第22-23页
   ·N~α-乙酰化蛋白质组研究进展第23-25页
   ·本研究目的和意义第25-26页
2 磷酸化蛋白质组鉴定和分析杨树休眠顶芽蛋白第26-55页
   ·研究背景第26-27页
   ·实验材料第27页
     ·植物材料第27页
     ·实验试剂第27页
   ·实验方法第27-29页
     ·提取杨树休眠顶芽总蛋白第27页
     ·溶液酶解总蛋白第27页
     ·富集磷酸化肽段第27-28页
     ·NanoUPLC-ESI-MS/MS串联质谱鉴定第28页
     ·数据分析及Mascot数据库搜索第28页
     ·生物信息学分析第28-29页
   ·结果第29-50页
     ·杨树休眠顶芽磷酸化蛋白质组的鉴定第29-43页
     ·杨树与拟南芥磷酸化蛋白和磷酸化位点相对保守第43-46页
     ·杨树蛋白特有的磷酸化位点第46-47页
     ·杨树休眠顶芽磷酸化蛋白的分类第47-48页
     ·杨树休眠期间可能参与磷酸化信号转导的蛋白激酶第48-50页
   ·讨论第50-54页
     ·与休眠相关涉及信号转导的磷酸化蛋白第50-51页
     ·与休眠相关涉及生长素响应和生长发育的磷酸化蛋白第51页
     ·与休眠相关涉及冷胁迫响应的磷酸化蛋白第51-52页
     ·与休眠相关涉及黄酮类化合物生物合成的磷酸化蛋白第52页
     ·与休眠相关涉及转运功能的磷酸化蛋白第52页
     ·与休眠相关涉及蛋白质合成的磷酸化蛋白第52-53页
     ·与休眠相关涉及电子转移及能量途径的磷酸化蛋白第53-54页
   ·本章小结第54-55页
3 磷酸化蛋白质组鉴定和分析杨树休眠顶芽核糖体P-蛋白第55-70页
   ·研究背景第55-56页
   ·实验材料第56页
     ·植物材料第56页
     ·实验试剂第56页
   ·实验方法第56-58页
     ·分离提取核糖体P-蛋白第56页
     ·溶液酶解核糖体P-蛋白第56-57页
     ·富集磷酸化肽段第57页
     ·NanoUPLC-ESI-MS/MS串联质谱鉴定第57页
     ·Mascot数据库搜索第57页
     ·柔性对接和分子动力学模拟第57-58页
     ·进化分析核糖体P-蛋白第58页
   ·结果第58-67页
     ·杨树P-蛋白磷酸化的鉴定第58-60页
     ·杨树CK2负责P-蛋白C-端域的磷酸化第60-63页
     ·杨树P3蛋白的鉴定和命名第63-65页
     ·杨树P-蛋白C-末端序列特征第65-67页
     ·核糖体P-蛋白的同源和进化分析第67页
   ·讨论第67-69页
     ·杨树休眠顶芽是研究核糖体P-蛋白磷酸化的好材料第67页
     ·磷酸化全部发生在P-蛋白高度保守的C-末端且由CK2催化引起第67-69页
     ·杨树的P2蛋白具分歧第69页
   ·本章小结第69-70页
4 乙酰化蛋白质组鉴定和分析杨树休眠顶芽蛋白第70-89页
   ·研究背景第70-71页
   ·实验材料第71页
     ·植物材料第71页
     ·实验试剂第71页
   ·实验方法第71-73页
     ·提取杨树休眠顶芽总蛋白第71页
     ·溶液酶解总蛋白第71页
     ·富集乙酰化肽段第71页
     ·NanoUPLC-ESI-MS/MS串联质谱鉴定第71-72页
     ·数据分析及Mascot数据库搜索第72页
     ·生物信息学分析第72-73页
   ·结果第73-85页
     ·杨树乙酰化蛋白的鉴定及特征描述第73-77页
     ·鉴定目标杨树蛋白NME过程涉及的酶类第77-81页
     ·鉴定目标杨树蛋白N~α-乙酰化涉及的Nats第81-82页
     ·全基因组鉴定杨树和拟南芥的Nats第82-85页
   ·讨论第85-88页
     ·杨树蛋白去除N-末端Met遵循普遍的NME规则第85-86页
     ·杨树基因组编码一个扩展的Nat催化亚基系统第86页
     ·拟南芥、杨树的细胞质和叶绿体型NatA-B异构体第86-87页
     ·休眠期间杨树蛋白N~α-乙酰化的生物学意义第87-88页
   ·本章小结第88-89页
结论第89-90页
参考文献第90-106页
附录1 缩略语一览表第106-107页
附录2 与拟南芥具有同源蛋白的保守的磷酸化位点第107-112页
附录3 与拟南芥具有同源蛋白的非保守的磷酸化位点第112-113页
附录4 KOG分类杨树磷酸化蛋白及所有蛋白信息第113-114页
附录5 KOG分析杨树休眠顶芽磷酸化蛋白及所有杨树蛋白第114-115页
附录6 讨论部分中所提到的磷酸化蛋白详细信息第115-117页
附录7 多序列比对每个杨树P-蛋白家族第117-120页
附录8 研究所涉及到的P-蛋白信息第120-122页
附录9 鉴定的杨树乙酰化肽段和位点信息第122-126页
附录10 多序列比对真核生物各自Nat类型催化亚基第126-128页
攻读学位期间发表的学术论文第128-129页
致谢第129-130页

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