| 中文摘要 | 第7页 |
| 微孢子虫的研究进展（文献综述） | 第10-44页 |
| 一、 微孢子虫的分类 | 第10-11页 |
| 二、 微孢子虫的生物学研究 | 第11-18页 |
| 1． 微孢子虫的生活史 | 第12-13页 |
| 2． 微孢子虫的超微结构 | 第13-14页 |
| 3． 微孢子虫的二型性 | 第14-16页 |
| 4． 微孢子虫与宿主的相互关系 | 第16-17页 |
| 5． 微孢子虫孢子的发芽与极丝功能 | 第17-18页 |
| 三、 微孢子虫的分子生物学研究 | 第18-28页 |
| （一） 关于微孢子虫蛋白质的研究 | 第18-20页 |
| 1． 微孢子虫蛋白组分的研究 | 第18-19页 |
| 2． 微孢子虫孢子极丝蛋白的研究 | 第19-20页 |
| （二） 微孢子虫的核酸研究 | 第20-28页 |
| 1． 微孢子虫染色体DNA的研究 | 第21页 |
| 2． 微孢子虫RNA的研究 | 第21-27页 |
| 3． 微孢子虫基因组DNA克隆的研究 | 第27-28页 |
| 四、 微孢子虫的检测与鉴别 | 第28-30页 |
| 1． 免疫学检测 | 第28页 |
| 2． PCR检测 | 第28-29页 |
| 3． 核酸分子杂交鉴别微孢子虫 | 第29-30页 |
| 五、 微孢子虫的治疗 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-44页 |
| 前言 | 第44-45页 |
| 第一部分 家蚕病原性微孢子虫极丝蛋白的研究 | 第45-57页 |
| 1． 实验材料 | 第45页 |
| 2． 实验方法 | 第45-52页 |
| 2．1 微孢子虫的制备与纯化 | 第45-46页 |
| 2．2 微孢子虫孢子极丝蛋白的抽提及分析 | 第46页 |
| 2．3 微孢子虫孢子主要极丝蛋白的纯化与鉴定 | 第46-47页 |
| 2．4 纯化主要极丝蛋白的浓缩及定量 | 第47-48页 |
| 2．5 抗PTP多克隆抗体的制备 | 第48-50页 |
| 2．6 Western Blot检测抗体特异性 | 第50-51页 |
| 2．7 主要极丝蛋白的免疫胶体金电镜定位观察 | 第51-52页 |
| 2．8 主要极丝蛋白（PTP33）的N—端序列测定 | 第52页 |
| 3． 实验结果 | 第52-55页 |
| 3．1 微孢子虫孢子极丝蛋白的SDS-PAGE分析 | 第52-53页 |
| 3．2 家蚕微孢子虫孢子（N．b）中主要极丝蛋白的分离纯化与鉴定 | 第53-54页 |
| 3．5 Western Blot检测抗体特异性 | 第54页 |
| 3．6 主要极丝蛋白（PTP33）的免疫胶体金电镜定位 | 第54-55页 |
| 3．7 主要极丝蛋白（PTP33）的N—端序列测定 | 第55页 |
| 4． 讨论 | 第55-57页 |
| 第二部分 家蚕微孢子虫（Nosema bombycis）主要极丝蛋白基因（PTP-Nb33）的研究 | 第57-76页 |
| 1． 实验材料 | 第57-58页 |
| 2． 实验方法 | 第58-68页 |
| 2．1 实验用品的处理 | 第58页 |
| 2．2 微孢子虫总RNA的抽提 | 第58-60页 |
| 2．3 cDNA的合成 | 第60页 |
| 2．4 简并性引物的设计 | 第60-61页 |
| 2．5 聚合酶链式反应（PCR） | 第61页 |
| 2．6 目的片段的回收 | 第61-62页 |
| 2．7 回收PCR产物的克隆 | 第62-67页 |
| 2．8 PCR产物（cDNA）的测序分析 | 第67页 |
| 2．9 cDNA核酸序列比较与分析 | 第67-68页 |
| 3． 实验结果 | 第68-73页 |
| 3．1 RNA浓度和纯度的测定 | 第68页 |
| 3．2 RNA的甲醛变性凝胶电泳分析 | 第68页 |
| 3．3 Nosema属微孢子虫基因密码子的偏好性分析及引物的设计 | 第68-70页 |
| 3．4 家蚕微孢子虫N．bombycis主要极丝蛋白PTP33基因的扩增 | 第70-71页 |
| 3．5 RT-PCR产物的克隆 | 第71页 |
| 3．6 PCR产物的序列测定 | 第71-72页 |
| 3．7 cDNA核酸序列比较与分析 | 第72-73页 |
| 4． 讨论 | 第73-76页 |
| 第三部分 家蚕微孢子虫（Nosema bobycis）RAD37基因（RAD51 homolog）的克隆、表达与体外翻译 | 第76-97页 |
| 1． 实验材料 | 第76页 |
| 2． 实验方法 | 第76-88页 |
| 2．1 RAD37基因的5’—RACE | 第77-80页 |
| 2．2 RACE产物的克隆 | 第80页 |
| 2．3 RAD37基因的Northern Blot检测 | 第80-83页 |
| 2．4 RAD基因全长cDNA序列的获得及鉴定 | 第83-84页 |
| 2．5 RAD蛋白全长cDNA序列比较和分析 | 第84-85页 |
| 2．6 RAD蛋白的二级结构预测 | 第85页 |
| 2．7 重组质粒的原核表达及 | 第85-88页 |
| 3． 实验结果与分析 | 第88-95页 |
| 3．1 RNA的甲醛变性凝胶电泳 | 第88页 |
| 3．2 RAD37基因的5’—RACE | 第88页 |
| 3．3 RACE产物的克隆与酶切鉴定分析 | 第88-89页 |
| 3．4 RACE产物的测序分析 | 第89页 |
| 3．5 RAD37蛋白全长cDNA序列 | 第89-90页 |
| 3．6 RAD37基因的Northern Blot检测 | 第90-91页 |
| 3．7 RT-PCR扩增RAD37蛋白全长cDNA | 第91页 |
| 3．8 RT-PCR产物的克隆及酶切鉴定 | 第91页 |
| 3．9 RT-PCR产物的测序分析 | 第91页 |
| 3．10 RAD37蛋白全长cDNA的序列比较与分析 | 第91-93页 |
| 3．11 RAD37蛋白的二级结构预测 | 第93-94页 |
| 3．12 不同诱导时间对重组蛋白表达的影响 | 第94页 |
| 3．13 重组蛋白的纯化 | 第94-95页 |
| 3．14 RAD37蛋白的体外翻译 | 第95页 |
| 4． 讨论 | 第95-97页 |
| 第四部分 家蚕微孢子虫（NOsema bombycis）反转录酶（RTase）基因的研究 | 第97-109页 |
| 1． 实验材料 | 第97页 |
| 2． 实验方法 | 第97-99页 |
| 2．1 总RNA的提取 | 第97页 |
| 2．2 cDNA第一链的合成 | 第97页 |
| 2．3 聚合酶链式反应（PCR） | 第97-98页 |
| 2．4 PCR产物的克隆与分析 | 第98页 |
| 2．5 PCR产物的5’-端RACE | 第98页 |
| 2．6 5’-RACE产物的克隆与分析 | 第98页 |
| 2．7 PCR产物的3’-端RACE | 第98-99页 |
| 2．8 3’-RACE产物的克隆与分析 | 第99页 |
| 2．9 拼接后得到的反转录酶cDNA序列及其限制性酶切图谱和开放阅读框架分析 | 第99页 |
| 2．10 得到的反转录酶cDNA序列的比较分析 | 第99页 |
| 3． 实验结果与分析 | 第99-107页 |
| 3．1 PCR扩增 | 第99-100页 |
| 3．2 PCR产物的克隆与酶切鉴定 | 第100页 |
| 3．3 5’-RACE | 第100-102页 |
| 3．4 3’-RACE | 第102页 |
| 3．5 得到的反转录酶cDNA序列及其限制性酶切图谱和开放阅读框架 | 第102-107页 |
| 3．6 得到的反转录酶cDNA序列的同源性比较分析 | 第107页 |
| 4． 讨论 | 第107-109页 |
| 结论 | 第109-111页 |
| ABSTRACT | 第111-114页 |
| 参考文献 | 第114-120页 |
| 附录1 PTP33的N-端氨基酸测序图谱 | 第120-122页 |
| 附录2 核酸测序图谱 | 第122-123页 |
| 附录3 部分cDNA序列BLASTn结果 | 第123-125页 |
| 附录4 部分cDNA序列BLASTp结果 | 第125-130页 |
| 附录5 RAD cDNA（full-length）的限制性酶切图谱 | 第130-132页 |
| 附录6 RAD全长cDNA BLAST结果 | 第132-139页 |
| 附录7 RTase cDNA的限制性酶切图谱 | 第139-146页 |
| 附录8 反转录酶cDNA序列BLASTn结果 | 第146-148页 |
| 附录9 反转录酶cDNA序列BLASTp结果 | 第148-153页 |
| 附录10 质粒图谱 | 第153-155页 |
| 本文缩写及英汉对照 | 第155-157页 |
| 致谢 | 第157-158页 |
