| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 文中主要缩略词简表 | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 蛋白质降解系统 | 第13-16页 |
| 1.2 泛素碳末端水解酶L1—UCH-L1 | 第16-17页 |
| 1.3 组蛋白去乙酰化酶6结构及其生物学功能 | 第17-20页 |
| 1.4 微管相关蛋白tau及其生物学功能 | 第20-22页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-31页 |
| 2.1 主要试剂和抗体 | 第23页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.2 抗体 | 第23页 |
| 2.2 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.3 细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.4 细胞实验处理 | 第25-26页 |
| 2.4.1 UCH-L1 siRNA转染实验 | 第25-26页 |
| 2.4.2 加药处理 | 第26页 |
| 2.5 免疫印迹(Western blotting,WB) | 第26-28页 |
| 2.5.1 收集蛋白样品(冰上操作) | 第26-27页 |
| 2.5.2 BCA法测蛋白浓度(冰上操作) | 第27页 |
| 2.5.3 免疫印迹 | 第27-28页 |
| 2.6 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)(低温工作室中操作) | 第28-29页 |
| 2.7 免疫荧光(Immunofluorescence,IF) | 第29-30页 |
| 2.8 统计学分析 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-38页 |
| 3.1 不同浓度的UCH-L1 siRNA转染处理对UCH-L1表达水平的影响 | 第31-32页 |
| 3.2 蛋白酶体活性抑制时,抑制UCH-L1表达HDAC6含量下降 | 第32页 |
| 3.3 蛋白酶体活性抑制时,抑制UCH-L1表达总tau含量增加 | 第32-33页 |
| 3.4 蛋白酶体活性抑制时,抑制UCH-L1表达HDAC6与泛素结合力下降 | 第33-34页 |
| 3.5 蛋白酶体活性抑制时,抑制UCH-L1表达泛素化tau蛋白增加 | 第34-35页 |
| 3.6 蛋白酶体活性抑制时,抑制UCH-L1表达HDAC6与tau蛋白的结合下降 | 第35-36页 |
| 3.7 蛋白酶体活性抑制时,UCH-L1对tau蛋白聚集体形成的影响 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-43页 |
| 4.1 UCH-L1表达下调对HDAC6含量的影响 | 第39-40页 |
| 4.2 UCH-L1表达下调对胞内tau蛋白含量的影响 | 第40页 |
| 4.3 UCH-L1表达下调影响tau、HDAC6和泛素三者之间的结合 | 第40-41页 |
| 4.4 UCH-L1表达下调影响tau蛋白聚集体的形成 | 第41-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
