| 符号说明 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-16页 |
| 1. 化疗的副作用及肿瘤耐药 | 第11页 |
| 2. 纳米类药物在肿瘤化疗中的应用 | 第11-13页 |
| 3. 高密度脂蛋白在肿瘤化疗中的应用 | 第13-14页 |
| 4. 细胞自噬与肿瘤耐药 | 第14-15页 |
| 5. 课题思路 | 第15-16页 |
| 第一章 rHDL/Dox复合物治疗肝肿瘤的研究 | 第16-37页 |
| 摘要 | 第16-17页 |
| 第一节 前言 | 第17-18页 |
| 第二节 实验部分 | 第18-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 细胞培养基 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 抗体 | 第18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.5 实验动物 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 rHDL/Dox的制备 | 第19页 |
| 2.2.2 rHDL/Dox的稳定性表征 | 第19页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第19页 |
| 2.2.4 细胞增殖实验 | 第19-20页 |
| 2.2.5 激光共聚焦分析 | 第20页 |
| 2.2.6 流式细胞仪分析 | 第20页 |
| 2.2.7 乳酸脱氢酶测定 | 第20-21页 |
| 2.2.8 Western blot实验 | 第21-23页 |
| 2.2.9 活体成像实验 | 第23-24页 |
| 第三节 实验结果 | 第24-35页 |
| 3.1 rHDL/Dox的稳定性研究 | 第24-26页 |
| 3.1.1 rHDUDox的粒轻稳定性研究 | 第24-25页 |
| 3.1.2 rHDUDox的药物缓释研究 | 第25-26页 |
| 3.2 rHDL/Dox对肝癌细胞增殖抑制研究 | 第26-30页 |
| 3.3 肝癌细胞对rHDL/Dox的摄取 | 第30页 |
| 3.4 阿霉素在肝癌细胞内的积聚 | 第30-31页 |
| 3.5 rHDL/Dox对肝癌细胞的细胞毒性实验 | 第31-32页 |
| 3.6 rHDL/Dox诱导肝癌细胞调亡实验 | 第32-34页 |
| 3.7 rHDL/Dox体内肝靶向性初探 | 第34-35页 |
| 第四节 讨论 | 第35-36页 |
| 第五节 小结 | 第36-37页 |
| 第二章 重组高密度脂蛋白-阿霉素复合物克服药物外排作用研究 | 第37-55页 |
| 摘要 | 第37-38页 |
| 第一节 前言 | 第38-39页 |
| 第二节 实验部分 | 第39-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第39页 |
| 2.1.1 细胞培养基 | 第39页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 2.1.3 抗体 | 第39页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-43页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第39-40页 |
| 2.2.2 mRNA表达检测 | 第40-41页 |
| 2.2.3 P-gp活性测定 | 第41页 |
| 2.2.4 Western blot实验 | 第41页 |
| 2.2.5 激光共聚焦分析 | 第41页 |
| 2.2.6 胞内药物测定实验 | 第41-42页 |
| 2.2.7 细胞增殖实验 | 第42页 |
| 2.2.8 细胞毒性与细胞凋亡实验 | 第42页 |
| 2.2.9 Tunel染色分析 | 第42-43页 |
| 第三节 实验结果 | 第43-54页 |
| 3.1 KBV细胞的耐药性研究 | 第43-44页 |
| 3.1.1 KBV细胞P-gpmRNA的表达水平分析 | 第43页 |
| 3.1.2 KBV细胞P-gp活性测定 | 第43-44页 |
| 3.1.3 KB细胞与KBV细胞IC50的比较 | 第44页 |
| 3.2 KB细胞与KBV细施SR-B1表法水平分析 | 第44-45页 |
| 3.3 KB细胞与KBV细胞对rHDL/Dox的摄取观察 | 第45-47页 |
| 3.4 KB细胞与KBV细胞内阿霉素含量的测定 | 第47-50页 |
| 3.5 KBV细胞增殖抑制实验 | 第50页 |
| 3.6 KBV细胞调t相关蛋白的检测 | 第50-51页 |
| 3.7 KBV细胞的细胞毒性与细胞调亡实验 | 第51-53页 |
| 3.8 KBV细胞的化nel染色分析 | 第53-54页 |
| 第四节 讨论 | 第54页 |
| 第五节 小结 | 第54-55页 |
| 第三章 抑制细胞自噬削弱肿瘤耐药性的研究 | 第55-74页 |
| 摘要 | 第55-56页 |
| 第一节 前言 | 第56-57页 |
| 第二节 实验部分 | 第57-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第57页 |
| 2.1.1 细胞培养基 | 第57页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第57页 |
| 2.1.3 抗体 | 第57页 |
| 2.1.4 siRNA | 第57页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第57页 |
| 2.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第57-58页 |
| 2.2.2 细胞增殖实验 | 第58页 |
| 2.2.3 Western blot分析 | 第58页 |
| 2.2.4 Cyto-ID染色分析 | 第58页 |
| 2.2.5 电子显微镜观察 | 第58-59页 |
| 2.2.6 EGFP-LC 3转染 | 第59页 |
| 2.2.7 siRNA转染 | 第59页 |
| 第三节 实验结果 | 第59-72页 |
| 3.1 Western blot检测LC 3的表达 | 第59-60页 |
| 3.2 Cyto-ID染色观察自噬 | 第60-61页 |
| 3.3 电子显微镜观察自噬体 | 第61-62页 |
| 3.4 EGFP-LC 3转染观察 | 第62-63页 |
| 3.5 细胞自噬抑制剂对KBV细胞生长的影响 | 第63-65页 |
| 3.6 抑制细胞自噬对KBV细胞存活的影响 | 第65-66页 |
| 3.7 敲除自噬相关基因对KBV细胞存活的影响 | 第66-68页 |
| 3.8 KBV细胞自噬调控通路的检测 | 第68-72页 |
| 第四节 讨论 | 第72-73页 |
| 第五节 小结 | 第73-74页 |
| 全文总结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 发表论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
