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人血型抗原A糖基转移酶表达重组质粒体外转染人乳腺癌细胞MDA-MB-231的抗肿瘤效应研究

前言第4-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-11页
中英文缩略词对照表第15-16页
第1章 绪论第16-22页
    1.1 三阴乳腺癌的治疗现状第16-17页
    1.2 乳腺癌的免疫治疗第17页
    1.3 ABO血型抗原与乳腺癌第17-19页
        1.3.1 血型抗原在乳腺癌细胞中的异常表达第17-18页
        1.3.2 血型抗原的表达特点第18页
        1.3.3 血型抗原对肿瘤生物学特性的影响第18-19页
    1.4 以血型抗原为靶点的免疫治疗第19页
    1.5 立题依据第19-22页
第2章 材料与方法第22-46页
    2.1 主要试剂与器材第22-25页
        2.1.1 主要试剂第22-24页
        2.1.2 主要器材第24-25页
    2.2 研究对象第25-26页
        2.2.1 实验相关细胞株及载体第25页
        2.2.2 实验分组第25-26页
    2.3 技术路线第26页
    2.4 主要实验方法第26-46页
        2.4.1 细胞培养第26-27页
        2.4.2 PCR反应体系及反应条件第27页
        2.4.3 限制性内切酶酶切体系第27页
        2.4.4 琼脂糖凝胶的浓度选择及配置第27页
        2.4.5 琼脂糖凝胶电泳及结果分析第27-28页
        2.4.6 PCR产物凝胶回收-冻融法第28页
        2.4.7 PCR产物凝胶回收-试剂盒法第28页
        2.4.8 酶切产物盐析法回收第28-29页
        2.4.9 目的片段与质粒的连接第29页
        2.4.10 液体、固体培养基的配置及铺板第29页
        2.4.11 重组质粒的转化第29页
        2.4.12 PCR法筛选目的菌落及培养扩增第29-30页
        2.4.13 质粒小提第30-31页
        2.4.14 本实验涉及到的相关引物序列第31页
        2.4.15 慢病毒包装及浓缩第31-32页
        2.4.16 慢病毒感染MDA-MB-231 与单克隆细胞的筛选第32页
        2.4.17 流式细胞术检测第32-35页
        2.4.18 WST-1 细胞增殖检测第35页
        2.4.19 划痕致伤实验第35-36页
        2.4.20 克隆形成实验第36页
        2.4.21 免疫原性细胞死亡相关检测第36-39页
        2.4.22 Western blot检测第39-43页
        2.4.23 NK细胞的分离和扩增第43-44页
        2.4.24 统计学方法第44-46页
第3章 实验结果第46-66页
    3.1 重组质粒的构建第46-47页
    3.2 血型抗原A糖基转移酶表达重组质粒的鉴定第47-49页
        3.2.1 酶切电泳鉴定结果第47页
        3.2.2 测序鉴定结果第47-49页
    3.3 血型抗原A糖基转移酶转染MDA-MB-231 细胞系第49-51页
        3.3.1 MDA-MB-231 细胞H抗原表达鉴定第49页
        3.3.2 血型抗原A糖基转移酶转染MDA-MB-231 细胞的鉴定第49-51页
    3.4 血型抗原A糖基转移酶对MDA-MB-231 细胞生物学行为的影响第51-53页
        3.4.1 对细胞增殖的影响第51页
        3.4.2 对细胞侵袭转移能力的影响第51-52页
        3.4.3 对细胞克隆形成能力的影响第52-53页
    3.5 B型血浆对BGA转染的MDA-MB-231 细胞的抗肿瘤效应研究第53-59页
        3.5.1 补体依赖的细胞毒作用(CDC)第53-58页
        3.5.2 抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)第58-59页
        3.5.3 对细胞侵袭迁移能力的影响第59页
    3.6 血型抗原A糖基转移酶抗肿瘤效应的机制研究第59-63页
        3.6.1 整合素下游FAK相关通路蛋白检测第59-60页
        3.6.2 细胞周期检测第60-62页
        3.6.3 凋亡相关蛋白检测第62-63页
    3.7 5-FU的协同抗肿瘤效应第63-64页
    3.8 血型抗原A糖基转移酶诱导细胞发生免疫原性死亡(ICD)第64-66页
第4章 讨论第66-72页
第5章 结论第72-74页
参考文献第74-80页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第80-81页
致谢第81页

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