前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
中英文缩略词对照表 | 第15-16页 |
第1章 绪论 | 第16-22页 |
1.1 三阴乳腺癌的治疗现状 | 第16-17页 |
1.2 乳腺癌的免疫治疗 | 第17页 |
1.3 ABO血型抗原与乳腺癌 | 第17-19页 |
1.3.1 血型抗原在乳腺癌细胞中的异常表达 | 第17-18页 |
1.3.2 血型抗原的表达特点 | 第18页 |
1.3.3 血型抗原对肿瘤生物学特性的影响 | 第18-19页 |
1.4 以血型抗原为靶点的免疫治疗 | 第19页 |
1.5 立题依据 | 第19-22页 |
第2章 材料与方法 | 第22-46页 |
2.1 主要试剂与器材 | 第22-25页 |
2.1.1 主要试剂 | 第22-24页 |
2.1.2 主要器材 | 第24-25页 |
2.2 研究对象 | 第25-26页 |
2.2.1 实验相关细胞株及载体 | 第25页 |
2.2.2 实验分组 | 第25-26页 |
2.3 技术路线 | 第26页 |
2.4 主要实验方法 | 第26-46页 |
2.4.1 细胞培养 | 第26-27页 |
2.4.2 PCR反应体系及反应条件 | 第27页 |
2.4.3 限制性内切酶酶切体系 | 第27页 |
2.4.4 琼脂糖凝胶的浓度选择及配置 | 第27页 |
2.4.5 琼脂糖凝胶电泳及结果分析 | 第27-28页 |
2.4.6 PCR产物凝胶回收-冻融法 | 第28页 |
2.4.7 PCR产物凝胶回收-试剂盒法 | 第28页 |
2.4.8 酶切产物盐析法回收 | 第28-29页 |
2.4.9 目的片段与质粒的连接 | 第29页 |
2.4.10 液体、固体培养基的配置及铺板 | 第29页 |
2.4.11 重组质粒的转化 | 第29页 |
2.4.12 PCR法筛选目的菌落及培养扩增 | 第29-30页 |
2.4.13 质粒小提 | 第30-31页 |
2.4.14 本实验涉及到的相关引物序列 | 第31页 |
2.4.15 慢病毒包装及浓缩 | 第31-32页 |
2.4.16 慢病毒感染MDA-MB-231 与单克隆细胞的筛选 | 第32页 |
2.4.17 流式细胞术检测 | 第32-35页 |
2.4.18 WST-1 细胞增殖检测 | 第35页 |
2.4.19 划痕致伤实验 | 第35-36页 |
2.4.20 克隆形成实验 | 第36页 |
2.4.21 免疫原性细胞死亡相关检测 | 第36-39页 |
2.4.22 Western blot检测 | 第39-43页 |
2.4.23 NK细胞的分离和扩增 | 第43-44页 |
2.4.24 统计学方法 | 第44-46页 |
第3章 实验结果 | 第46-66页 |
3.1 重组质粒的构建 | 第46-47页 |
3.2 血型抗原A糖基转移酶表达重组质粒的鉴定 | 第47-49页 |
3.2.1 酶切电泳鉴定结果 | 第47页 |
3.2.2 测序鉴定结果 | 第47-49页 |
3.3 血型抗原A糖基转移酶转染MDA-MB-231 细胞系 | 第49-51页 |
3.3.1 MDA-MB-231 细胞H抗原表达鉴定 | 第49页 |
3.3.2 血型抗原A糖基转移酶转染MDA-MB-231 细胞的鉴定 | 第49-51页 |
3.4 血型抗原A糖基转移酶对MDA-MB-231 细胞生物学行为的影响 | 第51-53页 |
3.4.1 对细胞增殖的影响 | 第51页 |
3.4.2 对细胞侵袭转移能力的影响 | 第51-52页 |
3.4.3 对细胞克隆形成能力的影响 | 第52-53页 |
3.5 B型血浆对BGA转染的MDA-MB-231 细胞的抗肿瘤效应研究 | 第53-59页 |
3.5.1 补体依赖的细胞毒作用(CDC) | 第53-58页 |
3.5.2 抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC) | 第58-59页 |
3.5.3 对细胞侵袭迁移能力的影响 | 第59页 |
3.6 血型抗原A糖基转移酶抗肿瘤效应的机制研究 | 第59-63页 |
3.6.1 整合素下游FAK相关通路蛋白检测 | 第59-60页 |
3.6.2 细胞周期检测 | 第60-62页 |
3.6.3 凋亡相关蛋白检测 | 第62-63页 |
3.7 5-FU的协同抗肿瘤效应 | 第63-64页 |
3.8 血型抗原A糖基转移酶诱导细胞发生免疫原性死亡(ICD) | 第64-66页 |
第4章 讨论 | 第66-72页 |
第5章 结论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |