| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第14-25页 |
| 1.1 PCV2概况 | 第14-15页 |
| 1.1.1 PCV2分类学 | 第14页 |
| 1.1.2 PCV2形态学和理化特性 | 第14-15页 |
| 1.1.3 PCV2基因组结构与功能 | 第15页 |
| 1.2 PCV2疫苗的研究概况 | 第15-20页 |
| 1.2.1 PCV2灭活疫苗 | 第15-16页 |
| 1.2.2 PCV2弱毒疫苗 | 第16页 |
| 1.2.3 基因工程疫苗 | 第16-19页 |
| 1.2.4 PCV2疫苗的免疫策略 | 第19-20页 |
| 1.2.5 展望 | 第20页 |
| 1.3 PRV概况 | 第20-23页 |
| 1.3.1 PRV分类学 | 第21页 |
| 1.3.2 PRV形态结构与理化特性 | 第21-22页 |
| 1.3.3 PRV基因组结构及其编码产物 | 第22页 |
| 1.3.4 PRV活载体疫苗的研究概况 | 第22-23页 |
| 1.3.5 重组病毒的构建策略 | 第23页 |
| 1.3.6 展望 | 第23页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 猪伪狂犬病病毒PRV-JF株遗传背景分析 | 第25-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-27页 |
| 2.1.1 毒株、细胞系、病料、抗体、试剂及试验动物 | 第25-26页 |
| 2.1.2 引物设计与PCR扩增 | 第26页 |
| 2.1.3 病毒分离 | 第26页 |
| 2.1.4 病毒粒子形态观察 | 第26页 |
| 2.1.5 病毒血清学鉴定 | 第26页 |
| 2.1.6 PRV gC基因序列分析 | 第26-27页 |
| 2.1.7 PRV动物感染试验 | 第27页 |
| 2.2 结果 | 第27-33页 |
| 2.2.1 病料检测 | 第27页 |
| 2.2.2 PRV毒株分离 | 第27-28页 |
| 2.2.3 病毒形态学观察 | 第28页 |
| 2.2.4 毒株血清学鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.5 PRV gC基因序列分析 | 第29-33页 |
| 2.2.6 小鼠感染试验 | 第33页 |
| 2.3 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 表达3个PCV2-Cap蛋白的TK~-/gE~-/gG~-重组伪狂犬病毒的构建 | 第35-50页 |
| 3.1 材料和方法 | 第36-43页 |
| 3.1.1 毒株、细胞系、菌株、质粒、抗体及主要试剂的配置 | 第36页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第36页 |
| 3.1.3 PRV的增殖与收获 | 第36-37页 |
| 3.1.4 PRV病毒基因组的提取 | 第37页 |
| 3.1.5 重组转移载体pMD-EGFP-LR(gG)和pMD-Cap-LR(gG)的构建与鉴定 | 第37-39页 |
| 3.1.6 转移载体pMD-EGFP-LR(gG)和pMD-Cap-LR(gG)的提取 | 第39页 |
| 3.1.7 转染细胞的准备 | 第39页 |
| 3.1.8 转移载体pMD-EGFP-LR(gG)与PRV基因组共转染PK-15 细胞 | 第39-40页 |
| 3.1.9 基因缺失病毒r PRV-JF-TK-/gE-/2Cap~+/gG-/EGFP~+的筛选、纯化与鉴定 | 第40-41页 |
| 3.1.10 rPRV-JF-TK-/gE-/2Cap~+/gG-/EGFP~+重组毒株基因组的提取 | 第41页 |
| 3.1.11 rPRV-JF-TK-/gE-/2Cap~+/gG-/EGFP~+与转移载体pMD-Cap-LR(gG)共转染PK-15 细胞 | 第41页 |
| 3.1.12 rPRV-JF-TK~-/gE~-/gG~-/3Cap~+重组病毒的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 3.1.13 rPRV-JF-TK~-/gE~-/gG~-/3Cap~+重组病毒的IPMA鉴定 | 第42页 |
| 3.1.14 rPRV-JF-TK~-/gE~-/gG~-/3Cap~+重组病毒的IFA鉴定 | 第42-43页 |
| 3.1.15 rPRV-JF-TK~-/gE~-/gG~-/3Cap~+重组病毒的一步生长曲线测定 | 第43页 |
| 3.2 结果 | 第43-49页 |
| 3.2.1 转移载体pMD-EGFP-LR(gG)、pMD-Cap-LR(gG)的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.2.2 基因缺失病毒r PRV-JF-TK-/gE-/2Cap~+/gG-/EGFP~+的获得与鉴定 | 第44-46页 |
| 3.2.3 基因缺失病毒r PRV-JF-TK~-/gE~-/gG~-/3Cap~+的获得与PCR鉴定 | 第46页 |
| 3.2.4 rPRV-JF-TK~-/gE~-/gG~-/3Cap~+重组病毒的IPMA鉴定结果 | 第46-47页 |
| 3.2.5 rPRV-JF-TK~-/gE~-/gG~-/3Cap~+重组病毒的IFA鉴定结果 | 第47-48页 |
| 3.2.6 重组病毒的生长特性结果 | 第48-49页 |
| 3.3 讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 表达3个PCV2-Cap蛋白的三基因缺失重组PRV的免疫原性试验 | 第50-56页 |
| 4.1 材料和方法 | 第50-51页 |
| 4.1.1 细胞、毒株、动物、器械 | 第50页 |
| 4.1.2 动物试验设计 | 第50-51页 |
| 4.1.3 临床症状及体温监测 | 第51页 |
| 4.1.4 PRV和PCV2抗体水平检测 | 第51页 |
| 4.2 结果 | 第51-54页 |
| 4.2.1 临床症状与免疫及攻毒后体温监测 | 第51-52页 |
| 4.2.2 免疫及攻毒后gB、gE抗体水平检测 | 第52-53页 |
| 4.2.3 免疫及攻毒后PCV2抗体水平检测 | 第53-54页 |
| 4.3 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
