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栉孔扇贝(Chlamys farreri)BAC未端序列中SSR和SNP分子标记的开发及初步应用研究

致谢第1-6页
中文摘要第6-9页
ABSTRACT第9-13页
目录第13-18页
引言第18-21页
第一章 文献综述第21-45页
 第一节 BAC 末端测序及末端序列分析第21-28页
     ·BAC 末端序列概述第21-22页
       ·BAC 末端序列的产生第21-22页
       ·BAC 末端序列的预处理第22页
     ·BAC 末端序列分析第22-24页
       ·GC 含量分析第22页
       ·串联重复序列分析第22页
       ·重复单元结构分析第22-23页
       ·蛋白编码序列鉴定和功能注释第23页
       ·比较基因组学分析第23-24页
     ·BAC 末端序列的应用和意义第24-28页
       ·基因组调查(Genome Survey)第24页
       ·基因发现(gene discovery )第24-25页
       ·基因定位(gene mapping)第25页
       ·分子标记开发第25-26页
       ·图谱整合(map integration)第26页
       ·基因组共线性第26-27页
       ·辅助全基因组序列组装第27-28页
 第二节 微卫星 DNA 的开发与应用第28-35页
     ·微卫星 DNA 概述第28-29页
     ·微卫星标记的优点与不足第29-31页
     ·微卫星标记的开发方法第31-33页
       ·直接文库筛选法第31页
       ·富集法第31-32页
       ·种间转移扩增法第32页
       ·生物信息学方法第32-33页
     ·微卫星标记在水产动物群体遗传学研究中的应用第33-35页
       ·物种遗传多样性研究第33-34页
       ·群体遗传结构分析第34页
       ·亲缘关系鉴定和系谱分析第34-35页
 第三节 SNP 标记的开发、分型及应用第35-43页
     ·SNP 标记的概述第35-36页
     ·SNP 标记的优点与不足第36-37页
     ·SNP 标记的开发策略第37-40页
       ·直接测序开发 SNP 标记第37-38页
       ·基于 EST 数据库开发 SNP 标记第38-39页
       ·基于基因组数据库开发 SNP 标记第39-40页
     ·SNP 标记的分型策略第40-43页
       ·基于聚合酶链式反应(PCR)的 SNP 分型方法第40-41页
         ·等位基因特异性 PCR(allele-specific PCR. AS-PCR)第40-41页
         ·高分辨率熔解曲线(High Resolution Melting, HRM)第41页
       ·基于引物延伸的飞行时间质谱(MALDI-TOF)SNP 分型方法第41-42页
       ·基于杂交的 SNP 分型方法第42-43页
         ·TaqMan 探针技术第42页
         ·DNA 芯片(DNA Chips)技术第42-43页
       ·基于测序技术的 SNP 分型方法第43页
 第四节 本章小结第43-45页
第二章 栉孔扇贝 BAC 末端测序及末端序列分析第45-60页
 第一节 前言第45页
 第二节 材料与方法第45-50页
     ·实验材料与设备第45-47页
       ·栉孔扇贝 BAC 文库第45页
       ·栉孔扇贝 BAC 末端测序所采用的引物第45-46页
       ·主要实验试剂第46页
       ·主要实验仪器第46-47页
     ·实验方法第47-50页
       ·栉孔扇贝 BAC 克隆的挑取与培养第47页
       ·栉孔扇贝 BAC 质粒 DNA 的提取第47-48页
       ·栉孔扇贝细菌人工染色体 BAC 末端测序第48-49页
         ·测序 PCR第48页
         ·PCR 产物纯化第48-49页
       ·栉孔扇贝 BAC 末端测序数据分析第49页
       ·栉孔扇贝 BAC 末端序列初步分析第49-50页
 第三节 实验结果与分析第50-59页
     ·栉孔扇贝 BES 概述第50-52页
     ·栉孔扇贝 BESs 中串联重复序列(tandem repeats sequences)分析第52-54页
     ·栉孔扇贝 BESs 中散在重复序列和低复杂度 DNA 序列分析第54-55页
     ·栉孔扇贝 BESs 注释第55-57页
     ·栉孔扇贝 BESs 与其他基因组序列的比较分析第57-59页
 第四节 讨论第59-60页
第三章 栉孔扇贝 BAC 末端 SSR 的开发及遗传多样性研究第60-76页
 第一节 前言第60-61页
 第二节 实验材料与方法第61-68页
     ·实验材料与设备第61-63页
       ·序列来源第61页
       ·实验材料第61页
       ·实验主要试剂第61-62页
       ·实验主要仪器设备第62-63页
     ·实验方法第63-68页
       ·栉孔扇贝基因组 DNA 的提取第63-64页
       ·栉孔扇贝基因组 DNA 的扩增第64-65页
       ·栉孔扇贝 BES-SSR 引物的设计和筛选第65页
       ·PCR 扩增检测引物的有效性第65-66页
       ·栉孔扇贝 BES-SSR 的多态性检测第66-67页
       ·栉孔扇贝遗传多样性研究第67-68页
 第三节 实验结果与分析第68-73页
     ·栉孔扇贝 BES-SSR 引物的设计和筛选第68页
     ·引物的有效性检测第68页
     ·栉孔扇贝 BES-SSR 多态性检测第68-70页
     ·栉孔扇贝大连群体与青岛群体遗传多样性分析第70-72页
     ·栉孔扇贝大连群体和青岛群体遗传结构和遗传分化分析第72-73页
 第四节 讨论第73-76页
     ·栉孔扇贝 SSR 的开发第73-74页
     ·群体遗传多样性和遗传分化第74-76页
第四章 栉孔扇贝 BAC 末端 SNP 标记的开发与验证第76-90页
 第一节 前言第76-77页
 第二节 PCR 直接测序开发栉孔扇贝 BAC 末端 SNP 标记第77-81页
     ·实验材料第77页
     ·实验方法第77-79页
       ·栉孔扇贝 BAC 末端测序及数据处理第77页
       ·栉孔扇贝作图亲本 DNA 的扩增第77页
       ·栉孔扇贝批量引物设计第77-78页
       ·PCR 扩增第78页
       ·PCR 产物测序及候选 SNP 开发第78-79页
     ·实验结果第79-81页
 第三节 基因组测序开发栉孔扇贝 BAC 末端 SNP 标记第81-86页
     ·实验材料第81页
     ·实验方法第81-84页
       ·栉孔扇贝 BAC 测序及数据处理第81页
       ·栉孔扇贝作图亲本 DNA 的扩增第81页
       ·栉孔扇贝亲本 Jd 和 Cg 基因组测序第81-82页
       ·栉孔扇贝 BAC 末端候选 SNP 标记的筛查第82-84页
     ·实验结果第84-86页
       ·栉孔扇贝亲本 Jd 和 Cg 基因组测序结果第84页
       ·栉孔扇贝 BAC 末端候选 SNP 标记的筛查第84-86页
 第四节 讨论第86-90页
     ·PCR 直接测序法开发栉孔扇贝 BAC 末端 SNP 标记第87页
     ·基因组测序开发栉孔扇贝 BAC 末端 SNP 标记第87-89页
     ·基因组测序开发栉孔扇贝 BAC 末端 SNP 标记的应用前景第89-90页
第五章 栉孔扇贝物理图谱与遗传图谱的初步整合第90-104页
 第一节 前言第90-91页
 第二节 TP-M13 自动荧光技术检测栉孔扇贝 BAC 末端 SSR 基因型第91-93页
     ·实验材料第91页
     ·实验方法第91-92页
       ·SSR 引物合成第91页
       ·PCR 扩增第91-92页
       ·自动荧光检测第92页
     ·实验结果第92-93页
 第三节 栉孔扇贝 BAC 末端 SNP 基因分型第93-96页
     ·实验材料与仪器第93页
     ·实验方法第93-96页
       ·引物设计第93页
       ·合成引物并进行引物分子量的质检第93页
       ·DNA 样品浓度和纯度质检第93页
       ·引物稀释第93页
       ·PCR 反应第93-94页
       ·SAP 酶消化反应第94-95页
       ·单碱基延伸反应第95页
       ·树脂纯化第95页
       ·进行质谱检测,并收集数据第95-96页
     ·实验结果第96页
 第四节 栉孔扇贝物理图谱与遗传图谱的初步整合第96-102页
     ·实验材料第96页
     ·实验方法第96-97页
     ·实验结果第97-102页
 第五节 讨论第102-104页
     ·栉孔扇贝 BAC 末端 SSR 分型技术第102页
     ·栉孔扇贝 BAC 末端 SSR 分型技术第102页
     ·栉孔扇贝遗传图谱构建及与物理图谱的初步整合第102-104页
结论第104-107页
参考文献第107-123页
个人简历第123-124页
硕士期间已发表论文第124页

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