| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 第一章 综述 | 第14-26页 |
| 1.1 腓骨肌萎缩症 | 第14-17页 |
| 1.2 轴突周围蛋白(periaxin) | 第17-20页 |
| 1.2.1 periaxin的定位、分布 | 第17-18页 |
| 1.2.2 L-periaxin的结构与功能 | 第18-19页 |
| 1.2.3 S-periaxin的结构与功能 | 第19-20页 |
| 1.3 蛋白-蛋白相互作用元件-PDZ domain | 第20-21页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第21页 |
| 参考文献 | 第21-26页 |
| 第二章 S-periaxin蛋白的表达纯化 | 第26-34页 |
| 2.1 前言 | 第26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第26页 |
| 2.2.2 分子生物学试剂 | 第26页 |
| 2.2.3 菌株和质粒 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.3.1 S-periaxin蛋白表达载体构建 | 第26-28页 |
| 2.3.2 S-periaxin及其突变体重组蛋白的表达与纯化 | 第28-29页 |
| 2.4 实验结果 | 第29-31页 |
| 2.4.1 PCR扩增S-periaxin基因 | 第29页 |
| 2.4.2 His-S-periaxin及其突变体蛋白的表达与纯化 | 第29-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 第三章 体外S-periaxin蛋白二聚化的分析 | 第34-43页 |
| 3.1 前言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.2.1 细胞系 | 第34页 |
| 3.2.2 菌种和质粒 | 第34页 |
| 3.2.3 主要的生化试剂 | 第34-35页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.3.1 戊二醛交联 | 第35页 |
| 3.3.2 非还原性SDS-PAGE | 第35页 |
| 3.3.3 免疫共沉淀研究S-periaxin蛋白之间的相互作用 | 第35-36页 |
| 3.3.4 H_2O_2处理His-S-periaxin(WT和Mutants)蛋白 | 第36-37页 |
| 3.3.5 DTT处理His-S-periaxin(WT)蛋白 | 第37页 |
| 3.4 实验结果 | 第37-40页 |
| 3.4.1 戊二醛交联 | 第37页 |
| 3.4.2 S-periaxin形成系列聚合物 | 第37-38页 |
| 3.4.3. S-periaxin蛋白形成同源二聚体 | 第38-39页 |
| 3.4.4 半胱氨酸残基Cys参与S-periaxin蛋白分子间二硫键的形成 | 第39-40页 |
| 3.5 讨论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 第四章 双分子荧光互补研究S-periaxin蛋白间的相互作用 | 第43-55页 |
| 4.1 前言 | 第43页 |
| 4.2 实验材料 | 第43-44页 |
| 4.2.1 菌种和质粒 | 第43-44页 |
| 4.2.2 主要的化学试剂 | 第44页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第44页 |
| 4.3 实验方法 | 第44-48页 |
| 4.3.1 双分子荧光互补系统的构建 | 第44-45页 |
| 4.3.2 双分子荧光互补实验载体的构建 | 第45-46页 |
| 4.3.3 原核双分子荧光互补系统的验证 | 第46页 |
| 4.3.4 原核双分子荧光互补BiFC实验 | 第46-47页 |
| 4.3.5 Western blotting | 第47页 |
| 4.3.6 真核双分子荧光互补BiFC实验 | 第47-48页 |
| 4.4 实验结果 | 第48-53页 |
| 4 4.1 mCherry双分子荧光互补系统 | 第48-49页 |
| 4.4.2 GFP蛋白间互作介导断裂mCherry两个多肽片段重新组合发出荧光 | 第49-50页 |
| 4.4.3 原核BiFC证实S-periaxin蛋白同源互作 | 第50-51页 |
| 4.4.4 原核BiFC系统中重组蛋白均可溶性表达 | 第51-52页 |
| 4.4.5 真核BiFC证实S-periaxin蛋白同源互作 | 第52-53页 |
| 4.5 讨论 | 第53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 个人简况以及联系方式 | 第57-58页 |
| 承诺书 | 第58-59页 |
