| 摘要 | 第7-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 符号说明 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-48页 |
| 1 苔藓植物 | 第16-17页 |
| 2 苔类植物组织培养的应用 | 第17-18页 |
| 3 联苄类化合物次级代谢途径研究 | 第18-20页 |
| 3.1 联苄及双联苄类化合物(Bibenzyls and Bisbibenzyls) | 第18-19页 |
| 3.2 联苄类化合物生物合成途径研究 | 第19-20页 |
| 4 苔类植物次级代谢途径关键酶 | 第20-37页 |
| 4.1 苯丙氨酸裂解酶 | 第20-22页 |
| 4.2 肉桂酸-4-羟化酶 | 第22-23页 |
| 4.3 4-香豆酸：辅酶A连接酶 | 第23页 |
| 4.4 Ⅲ型聚酮合酶家族 | 第23-33页 |
| 4.5 NADPH-依赖的聚酮还原酶 | 第33-35页 |
| 4.6 植物细胞色素P450 | 第35-37页 |
| 5 本论文立题依据和研究内容 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-48页 |
| 第二章 钝鳞紫背苔苯丙氨酸氨裂解酶(PaPAL)的克隆和功能鉴定及在非生物胁迫应答中的表达特征 | 第48-78页 |
| 1 引言 | 第48-50页 |
| 2 实验材料与试剂 | 第50-53页 |
| 2.1 植物材料 | 第50页 |
| 2.2 菌株与质粒 | 第50页 |
| 2.3 酶和试剂 | 第50-51页 |
| 2.4 主要溶液和培养基 | 第51-52页 |
| 2.5 实验仪器和设备 | 第52页 |
| 2.6 PCR引物序列 | 第52-53页 |
| 3 实验方法 | 第53-58页 |
| 3.1 钝鳞紫背苔中苯丙氨酸裂解酶PaPAL的克隆 | 第53-54页 |
| 3.2 PaPAL的原核表达 | 第54-56页 |
| 3.3 PaPAL体外酶活鉴定 | 第56-57页 |
| 3.4 PaPAL在非生物胁迫应答中的反应 | 第57-58页 |
| 3.5 在非生物胁迫应答中植物叶状体成分的变化 | 第58页 |
| 4 实验结果 | 第58-73页 |
| 4.1 钝鳞紫背苔中PaPAL的克隆及序列分析 | 第58-66页 |
| 4.2 原核表达载体构建及蛋白表达纯化 | 第66-68页 |
| 4.3 体外活性检测结果 | 第68-70页 |
| 4.4 非生物胁迫条件下PaPAL的表达变化及对成分的影响 | 第70-73页 |
| 5 本章小结 | 第73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 第三章 苔类植物STCSs蛋白功能研究 | 第78-97页 |
| 1 引言 | 第78-79页 |
| 2 实验材料与方法 | 第79-82页 |
| 2.1 植物材料及菌株与质粒 | 第79页 |
| 2.2 PCR引物序列 | 第79-80页 |
| 2.3 粗裂地钱转录组测序分析 | 第80页 |
| 2.4 目的基因cDNA及基因组DNA全长扩增 | 第80页 |
| 2.5 原核表达载体构建及蛋白表达 | 第80页 |
| 2.6 体外酶活鉴定 | 第80-82页 |
| 3 实验结果与讨论 | 第82-94页 |
| 3.1 STCSs的克隆和序列分析 | 第82-86页 |
| 3.2 STCSs进化树分析 | 第86-88页 |
| 3.3 STCSs基因组分析 | 第88-89页 |
| 3.4 原核表达 | 第89-90页 |
| 3.5 体外酶活结果与分析 | 第90-94页 |
| 4 本章小结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 第四章 STCS1蛋白功能及初步晶体学研究 | 第97-127页 |
| 1 引言 | 第97-98页 |
| 2 实验材料与方法 | 第98-105页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第98-99页 |
| 2.2 试剂和仪器 | 第99页 |
| 2.3 培养基和溶液配制 | 第99-100页 |
| 2.4 蛋白表达载体构建 | 第100页 |
| 2.5 蛋白表达检测及大量制备 | 第100-102页 |
| 2.6 STCS1晶体的获得 | 第102-104页 |
| 2.7 晶体结构的解析 | 第104-105页 |
| 3 实验结果与讨论 | 第105-124页 |
| 3.1 STCS1蛋白表达与小量制备 | 第105-109页 |
| 3.2 STCS1蛋白大量制备 | 第109-111页 |
| 3.3 STCS1蛋白晶体的获得与数据收集 | 第111-115页 |
| 3.4 晶体结构与模型修正 | 第115-117页 |
| 3.5 STCS1整体结构描述 | 第117-120页 |
| 3.6 STCS1与同源序列比对 | 第120-121页 |
| 3.7 STCS1与底物及产物分子对接 | 第121-123页 |
| 3.8 STCS1活性位点与催化机制探讨 | 第123-124页 |
| 4 本章小结 | 第124页 |
| 参考文献 | 第124-127页 |
| 第五章 联苄合成途径相关P450克隆及功能研究 | 第127-148页 |
| 1 引言 | 第127页 |
| 2 实验材料与方法 | 第127-132页 |
| 2.1 植物材料及菌株与质粒 | 第127-128页 |
| 2.2 试剂溶液、酶等 | 第128页 |
| 2.3 PCR引物序列 | 第128-129页 |
| 2.4 苔类植物不同类型的组织P450表达差异 | 第129页 |
| 2.5 基因克隆及序列分析 | 第129-130页 |
| 2.6 酵母表达、微粒体制备 | 第130-132页 |
| 2.7 体外酶活检测 | 第132页 |
| 2.8 两个P450基因在激素处理后的表达特征 | 第132页 |
| 3 实验结果 | 第132-144页 |
| 3.1 苔类植物中P450在不同组织差异表达分析 | 第132-133页 |
| 3.2 苔类植物中两个P450的克隆及序列分析 | 第133-140页 |
| 3.3 PaF3'H1与PaF3'H2进化分析 | 第140-141页 |
| 3.4 P450酵母表达载体构建及转化 | 第141页 |
| 3.5 微粒体制备及体外酶活检测 | 第141-143页 |
| 3.6 激素刺激因子引起P450表达的变化 | 第143-144页 |
| 4 小结 | 第144-145页 |
| 5 下一步工作计划 | 第145页 |
| 参考文献 | 第145-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第149-150页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第150页 |
