摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第12-15页 |
1 文献综述 | 第15-33页 |
1.1 HMGB1的研究进展 | 第15-29页 |
1.1.1 高迁移率族蛋白家族 | 第15-16页 |
1.1.2 HMGB1的释放 | 第16-17页 |
1.1.3 HMGB1的受体及信号转导 | 第17-19页 |
1.1.4 HMGB1与炎症反应 | 第19-24页 |
1.1.5 HMGB1在病毒性传染病中的潜在作用 | 第24-26页 |
1.1.6 HMGB1作为炎症和自身免疫疾病的生物标志 | 第26-27页 |
1.1.7 HMGB1作为疾病治疗的靶标 | 第27-29页 |
1.2 猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第29-31页 |
1.2.1 PRRSV与炎症反应 | 第29页 |
1.2.2 PRRSV的疫苗 | 第29-30页 |
1.2.3 PRRSV的复制周期 | 第30-31页 |
1.3 甘草酸与抗病毒 | 第31-33页 |
2 研究目的与意义 | 第33-34页 |
3 材料与方法 | 第34-50页 |
3.1 试验材料 | 第34-40页 |
3.1.1 实验动物 | 第34页 |
3.1.2 细胞、毒株与菌株 | 第34页 |
3.1.3 载体与质粒 | 第34-35页 |
3.1.4 工具酶、siRNA及主要试剂 | 第35-36页 |
3.1.5 Western blot所需材料 | 第36-37页 |
3.1.6 培养基与抗生素及其配制 | 第37-38页 |
3.1.7 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第38-40页 |
3.1.8 主要实验仪器及设备 | 第40页 |
3.1.9 分子生物学分析软件 | 第40页 |
3.2 试验方法 | 第40-50页 |
3.2.1 原代PAM细胞的分离 | 第40-41页 |
3.2.2 PRRSV的增殖 | 第41页 |
3.2.3 病毒滴度的测定 | 第41-42页 |
3.2.4 siRNA及质粒转染(脂质体介导的瞬时转染法) | 第42页 |
3.2.5 Western blot样品制备 | 第42页 |
3.2.6 RNA的提取及mRNA水平检测 | 第42-44页 |
3.2.7 绝对荧光定量检测PRRSV负链RNA | 第44-45页 |
3.2.8 MTS法检测细胞活性 | 第45-46页 |
3.2.9 乳酸脱氢酶释放试验 | 第46页 |
3.2.10 ELISA检测细胞因子表达量 | 第46页 |
3.2.11 双荧光素酶报告实验 | 第46页 |
3.2.12 间接免疫荧光实验 | 第46-47页 |
3.2.13 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第47-48页 |
3.2.14 动物试验 | 第48-49页 |
3.2.15 统计学方法 | 第49-50页 |
4 结果与分析 | 第50-85页 |
4.1 PRRSV感染仔猪后HMGB1的表达升高 | 第50-57页 |
4.1.1 PRRSV感染仔猪后的临床症状及病理变化 | 第50-53页 |
4.1.2 PRRSV感染仔猪后血清中病毒含量的变化 | 第53-54页 |
4.1.3 PRRSV感染仔猪后血清中HMGB1的水平升高 | 第54-55页 |
4.1.4 血清中HMGB1的表达与其他炎症因子具有相关性 | 第55-56页 |
4.1.5 PRRSV感染仔猪后脑、肺和BALF中HMGB1的表达水平升高 | 第56-57页 |
4.2 体外试验发现PRRSV感染诱导HMGB1释放能增强炎症因子的产生 | 第57-73页 |
4.2.1 PRRSV感染对HMGB1的影响 | 第57-62页 |
4.2.2 HMGB1对PRRSV的增殖无明显影响 | 第62-67页 |
4.2.3 HMGB1增强PRRSV诱导的NF-κB的激活和炎症因子的产生 | 第67-71页 |
4.2.4 RAGE/TLR2/TLR4参与PRRSV诱导的炎症反应 | 第71-73页 |
4.3 Glycyrrhizin对PRRSV增殖的抑制效果 | 第73-85页 |
4.3.1 Glycyrrhizin对MARC-145细胞和PAM细胞的毒性检测 | 第73-74页 |
4.3.2 Glycyrrhizin抑制PRRSV在MARC-145细胞中增殖 | 第74-75页 |
4.3.3 Glycyrrhizin抑制PRRSV在PAM细胞中增殖 | 第75-76页 |
4.3.4 Glycyrrhizin抑制PRRSV增殖的机制 | 第76-80页 |
4.3.5 Glycyrrhizin对PRRSV诱导的炎症反应的影响 | 第80-82页 |
4.3.6 Glycyrrhizin对PRRSV体内感染的影响 | 第82-85页 |
5 讨论与结论 | 第85-93页 |
5.1 讨论 | 第85-92页 |
5.1.1 PRRSV感染仔猪对HMGB1表达的影响 | 第85-86页 |
5.1.2 PRRSV体外感染对HMGB1的影响 | 第86-88页 |
5.1.3 HMGB1对PRRSV增殖的影响 | 第88页 |
5.1.4 HMGB1对PRRSV诱导炎症反应的影响 | 第88-90页 |
5.1.5 Glycyrrhizin对PRRSV增殖的影响 | 第90-92页 |
5.2 结论 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
附录 | 第109-110页 |