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HMGB1在PRRSV感染中的作用及Glycyrrhizin抗PRRSV活性研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略语表(Abbreviation)第12-15页
1 文献综述第15-33页
    1.1 HMGB1的研究进展第15-29页
        1.1.1 高迁移率族蛋白家族第15-16页
        1.1.2 HMGB1的释放第16-17页
        1.1.3 HMGB1的受体及信号转导第17-19页
        1.1.4 HMGB1与炎症反应第19-24页
        1.1.5 HMGB1在病毒性传染病中的潜在作用第24-26页
        1.1.6 HMGB1作为炎症和自身免疫疾病的生物标志第26-27页
        1.1.7 HMGB1作为疾病治疗的靶标第27-29页
    1.2 猪繁殖与呼吸综合征研究进展第29-31页
        1.2.1 PRRSV与炎症反应第29页
        1.2.2 PRRSV的疫苗第29-30页
        1.2.3 PRRSV的复制周期第30-31页
    1.3 甘草酸与抗病毒第31-33页
2 研究目的与意义第33-34页
3 材料与方法第34-50页
    3.1 试验材料第34-40页
        3.1.1 实验动物第34页
        3.1.2 细胞、毒株与菌株第34页
        3.1.3 载体与质粒第34-35页
        3.1.4 工具酶、siRNA及主要试剂第35-36页
        3.1.5 Western blot所需材料第36-37页
        3.1.6 培养基与抗生素及其配制第37-38页
        3.1.7 主要缓冲液与相关试剂及其配制第38-40页
        3.1.8 主要实验仪器及设备第40页
        3.1.9 分子生物学分析软件第40页
    3.2 试验方法第40-50页
        3.2.1 原代PAM细胞的分离第40-41页
        3.2.2 PRRSV的增殖第41页
        3.2.3 病毒滴度的测定第41-42页
        3.2.4 siRNA及质粒转染(脂质体介导的瞬时转染法)第42页
        3.2.5 Western blot样品制备第42页
        3.2.6 RNA的提取及mRNA水平检测第42-44页
        3.2.7 绝对荧光定量检测PRRSV负链RNA第44-45页
        3.2.8 MTS法检测细胞活性第45-46页
        3.2.9 乳酸脱氢酶释放试验第46页
        3.2.10 ELISA检测细胞因子表达量第46页
        3.2.11 双荧光素酶报告实验第46页
        3.2.12 间接免疫荧光实验第46-47页
        3.2.13 酵母双杂交筛选互作蛋白第47-48页
        3.2.14 动物试验第48-49页
        3.2.15 统计学方法第49-50页
4 结果与分析第50-85页
    4.1 PRRSV感染仔猪后HMGB1的表达升高第50-57页
        4.1.1 PRRSV感染仔猪后的临床症状及病理变化第50-53页
        4.1.2 PRRSV感染仔猪后血清中病毒含量的变化第53-54页
        4.1.3 PRRSV感染仔猪后血清中HMGB1的水平升高第54-55页
        4.1.4 血清中HMGB1的表达与其他炎症因子具有相关性第55-56页
        4.1.5 PRRSV感染仔猪后脑、肺和BALF中HMGB1的表达水平升高第56-57页
    4.2 体外试验发现PRRSV感染诱导HMGB1释放能增强炎症因子的产生第57-73页
        4.2.1 PRRSV感染对HMGB1的影响第57-62页
        4.2.2 HMGB1对PRRSV的增殖无明显影响第62-67页
        4.2.3 HMGB1增强PRRSV诱导的NF-κB的激活和炎症因子的产生第67-71页
        4.2.4 RAGE/TLR2/TLR4参与PRRSV诱导的炎症反应第71-73页
    4.3 Glycyrrhizin对PRRSV增殖的抑制效果第73-85页
        4.3.1 Glycyrrhizin对MARC-145细胞和PAM细胞的毒性检测第73-74页
        4.3.2 Glycyrrhizin抑制PRRSV在MARC-145细胞中增殖第74-75页
        4.3.3 Glycyrrhizin抑制PRRSV在PAM细胞中增殖第75-76页
        4.3.4 Glycyrrhizin抑制PRRSV增殖的机制第76-80页
        4.3.5 Glycyrrhizin对PRRSV诱导的炎症反应的影响第80-82页
        4.3.6 Glycyrrhizin对PRRSV体内感染的影响第82-85页
5 讨论与结论第85-93页
    5.1 讨论第85-92页
        5.1.1 PRRSV感染仔猪对HMGB1表达的影响第85-86页
        5.1.2 PRRSV体外感染对HMGB1的影响第86-88页
        5.1.3 HMGB1对PRRSV增殖的影响第88页
        5.1.4 HMGB1对PRRSV诱导炎症反应的影响第88-90页
        5.1.5 Glycyrrhizin对PRRSV增殖的影响第90-92页
    5.2 结论第92-93页
参考文献第93-108页
致谢第108-109页
附录第109-110页

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