| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一部分 研究论文 | 第12-63页 |
| 第一章 口蹄疫病毒单克隆抗体制备条件的探索 | 第14-31页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 1、材料 | 第15-16页 |
| 1.1 主要试剂 | 第15页 |
| 1.2 主要器材 | 第15-16页 |
| 1.3 实验动物和细胞系 | 第16页 |
| 2、方法 | 第16-24页 |
| 2.1 SP2/O细胞在DMEM完全培养基中的生长曲线 | 第16-17页 |
| 2.2 SP2/O细胞的染色体分析 | 第17-18页 |
| 2.3 SP2/O细胞、脾细胞、饲养细胞在HAT完全培养基中的生长曲线 | 第18-20页 |
| 2.3.1 SP2/O细胞在HAT完全培养基中的生长曲线 | 第18页 |
| 2.3.2 脾细胞在HAT完全培养基中的生长曲线 | 第18-19页 |
| 2.3.3 饲养细胞在HAT完全培养基中的生长曲线 | 第19-20页 |
| 2.4 PEG诱导SP2/O细胞与脾细胞融合 | 第20-22页 |
| 2.4.1 SP2/O细胞的准备 | 第20页 |
| 2.4.2 脾细胞的制备 | 第20页 |
| 2.4.3 SP2/O细胞与脾细胞的融合 | 第20-21页 |
| 2.4.4 融合效率最高的PEG种类和浓度 | 第21-22页 |
| 2.5 疫苗最适注射量 | 第22-24页 |
| 3、结果 | 第24-29页 |
| 3.1 SP2/O细胞在DMEM完伞培养基中的生长曲线 | 第24页 |
| 3.2 SP2/O细胞的染色体分析 | 第24-25页 |
| 3.3 SP2/O细胞、脾细胞、饲养细胞在HAT完全培养基中的生长曲线 | 第25-27页 |
| 3.4 融合效率最高的PEG种类和浓度 | 第27页 |
| 3.5 疫苗最适注射量 | 第27-29页 |
| 4、讨论 | 第29-30页 |
| 5、结论 | 第30-31页 |
| 第二章 抗A型口蹄疫病毒的单克隆细胞株的制备,筛选以及克隆化 | 第31-46页 |
| 前言 | 第31-32页 |
| 1、材料 | 第32-33页 |
| 1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 1.2 主要器材 | 第32-33页 |
| 1.3 实验动物和细胞系 | 第33页 |
| 2、方法 | 第33-38页 |
| 2.1 BALB/c小鼠免疫 | 第33页 |
| 2.2 间接ELISA法检测 | 第33-34页 |
| 2.3 SP2/O细胞的预处理 | 第34页 |
| 2.4 免疫脾细胞的准备 | 第34-35页 |
| 2.5 SP2/O细胞与免疫脾细胞融合 | 第35页 |
| 2.6 融合细胞培养孔阳性筛选 | 第35页 |
| 2.7 阳性杂交瘤细胞的单克隆化 | 第35-38页 |
| 2.7.1 制备饲养细胞 | 第35-36页 |
| 2.7.2 阳性单克隆细胞制备 | 第36-38页 |
| 3、结果 | 第38-44页 |
| 3.1 BALB/c小鼠的免疫 | 第38页 |
| 3.2 间接ELISA法的检测过程 | 第38-39页 |
| 3.3 SP2/O细胞的预处理 | 第39页 |
| 3.4 免疫脾细胞的准备 | 第39-40页 |
| 3.5 SP2/O细胞与免疫脾细胞的融合 | 第40-41页 |
| 3.6 阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第41页 |
| 3.7 阳性杂交瘤细胞的单克隆化 | 第41-44页 |
| 3.7.1 制备饲养细胞 | 第41页 |
| 3.7.2 阳性单克隆细胞制备 | 第41-44页 |
| 4、讨论 | 第44-45页 |
| 5、结论 | 第45-46页 |
| 第三章 抗A型口蹄疫单克隆细胞株特性检测 | 第46-63页 |
| 前言 | 第46-48页 |
| 1、材料 | 第48-49页 |
| 1.1 主要试剂 | 第48页 |
| 1.2 主要器材 | 第48-49页 |
| 1.3 实验动物和细胞系 | 第49页 |
| 2、方法 | 第49-56页 |
| 2.1 抗A型口蹄疫单克隆细胞株稳定性测定 | 第49-51页 |
| 2.1.1 抗A型口蹄疫单克隆细胞株的连续培养方式 | 第49页 |
| 2.1.2 抗A型口蹄疫单克隆细胞株传代方法 | 第49-50页 |
| 2.1.3 抗A型口蹄疫单克隆细胞株冻存 | 第50页 |
| 2.1.4 抗A型口蹄疫单克隆细胞株效价检测 | 第50-51页 |
| 2.2 抗A型口蹄疫单克隆细胞株在DMEM完全培养基中的生长曲线 | 第51页 |
| 2.3 抗A型口蹄疫单克隆细胞株的染色体分析 | 第51页 |
| 2.4 抗A型口蹄疫单克隆抗体腹水的制备 | 第51-52页 |
| 2.5 抗A型口蹄疫单克隆抗体的纯化及检测 | 第52-56页 |
| 2.5.1 抗A型口蹄疫单克隆抗体腹水的纯化 | 第52-53页 |
| 2.5.2 鉴定纯化后单克隆抗体的纯度 | 第53-54页 |
| 2.5.3 单克隆抗体亚型鉴定 | 第54-56页 |
| 3、结果 | 第56-60页 |
| 3.1 抗A型口蹄疫单克隆细胞株稳定性测定 | 第56页 |
| 3.2 抗A型口蹄疫单克隆细胞株在DMEM培养基中的生长曲线 | 第56页 |
| 3.3 抗A型口蹄疫单克隆细胞株的染色体分析 | 第56-57页 |
| 3.4 抗A型口蹄疫单克隆抗体腹水的制备 | 第57-58页 |
| 3.5 抗A型口蹄疫单克隆抗体的纯化及检测 | 第58-60页 |
| 3.5.1 抗A型口蹄疫单克隆抗体腹水的纯化 | 第58页 |
| 3.5.2 鉴定纯化后单克隆抗体的纯度 | 第58页 |
| 3.5.3 单克隆抗体亚型鉴定 | 第58-60页 |
| 4、讨论 | 第60-62页 |
| 5、结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-71页 |
| 附录一 英文缩写词对照表(Abbreviations) | 第65-66页 |
| 附录二 实验相关试剂配方 | 第66-68页 |
| 附录三 主要仪器设备 | 第68-69页 |
| 附录四 主要实验耗材 | 第69-70页 |
| 附录五 主要实验试剂 | 第70-71页 |
| 第二部分 文献综述 | 第71-82页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
