| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 灯盏花简介 | 第11页 |
| 1.2 类黄酮化合物的研究 | 第11-12页 |
| 1.2.1 类黄酮的概念 | 第11页 |
| 1.2.2 类黄酮的功能 | 第11-12页 |
| 1.3 灯盏花中类黄酮合成的可能途径 | 第12-13页 |
| 1.4 类黄酮合成路径中的关键基因 | 第13-17页 |
| 1.4.1 查尔酮异构酶（CHI）基因 | 第14页 |
| 1.4.2 MYB类转录调控基因 | 第14-17页 |
| 1.4.2.1 转录调控的概念 | 第14-15页 |
| 1.4.2.2 MYB转录因子的结构及其调控机制 | 第15页 |
| 1.4.2.3 转录因子R2R3-MYB | 第15-17页 |
| 1.5 植物遗传转化的研究 | 第17-19页 |
| 1.5.1 农杆菌介导的植物遗传转化法 | 第17页 |
| 1.5.2 影响遗传转化的因素 | 第17-19页 |
| 1.6 研究意义及内容 | 第19-20页 |
| 第2章 灯盏花CHI和MYB基因的转录组学研究 | 第20-24页 |
| 2.1 实验方法 | 第20-21页 |
| 2.1.1 CHI unigene的筛选 | 第20-21页 |
| 2.1.2 MYB unigene的筛选 | 第21页 |
| 2.2 结果 | 第21-22页 |
| 2.2.1 CHI unigene的确定 | 第21页 |
| 2.2.2 MYB unigene的确定 | 第21-22页 |
| 2.3 小结 | 第22-23页 |
| 附图 | 第23-24页 |
| 第3章 灯盏花CHI和MYB基因的克隆 | 第24-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 3.1.2 质粒和菌株 | 第24页 |
| 3.1.3 试剂和仪器 | 第24-25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-35页 |
| 3.2.1 灯盏花叶片总RNA提取 | 第25-27页 |
| 3.2.2 CHI和MYB基因的克隆 | 第27-33页 |
| 3.2.2.1 CHI和MYB unigene的验证 | 第27页 |
| 3.2.2.2 CHI和MYB基因 5'末端克隆 | 第27-30页 |
| 3.2.2.3 CHI和MYB基因 3'末端克隆 | 第30-31页 |
| 3.2.2.4 CHI和MYB基因的全长拼接 | 第31-32页 |
| 3.2.2.5 pMD18-T载体构建及转化 | 第32-33页 |
| 3.2.2.6 重组质粒的筛选与鉴定 | 第33页 |
| 3.2.3 生物信息学分析 | 第33-35页 |
| 3.3 结果 | 第35-51页 |
| 3.3.1 灯盏花总RNA提取 | 第35页 |
| 3.3.2 CHI及MYB unigene的验证 | 第35页 |
| 3.3.3 CHI及MYB的克隆及载体构建 | 第35-36页 |
| 3.3.4 灯盏花CHI及MYB的核酸序列信息分析 | 第36-41页 |
| 3.3.5 灯盏花CHI蛋白序列信息分析 | 第41-45页 |
| 3.3.6 灯盏花MYB蛋白序列信息分析 | 第45-51页 |
| 3.3.6.1 灯盏花MYB与拟南芥At MYB比对分析 | 第45页 |
| 3.3.6.2 灯盏花MYB蛋白的结构特征 | 第45页 |
| 3.3.6.3 灯盏花MYB蛋白的功能预测 | 第45-51页 |
| 3.4 小结 | 第51-53页 |
| 第4章 植物表达载体的构建及灯盏花的遗传转化 | 第53-72页 |
| 4.1 实验材料 | 第53-55页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第53页 |
| 4.1.2 质粒和菌株 | 第53页 |
| 4.1.3 实验所用主要试剂 | 第53-55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-64页 |
| 4.2.1 重组载体的构建 | 第55-61页 |
| 4.2.1.1 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第58-59页 |
| 4.2.1.2 目的片段的扩增 | 第59-60页 |
| 4.2.1.3 酶切反应及连接转化 | 第60-61页 |
| 4.2.2 重组载体转化农杆菌GV3101 | 第61-62页 |
| 4.2.2.1 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第61页 |
| 4.2.2.2 重组载体的电击转化 | 第61-62页 |
| 4.2.2.3 重组载体的鉴定 | 第62页 |
| 4.2.3 根癌农杆菌介导的灯盏花遗传转化 | 第62-64页 |
| 4.2.3.1 灯盏花无菌苗的获得 | 第62页 |
| 4.2.3.2 灯盏花对Kan的敏感性 | 第62-63页 |
| 4.2.3.3 灯盏花对Cef的敏感性 | 第63页 |
| 4.2.3.4 农杆菌GV3101的培养 | 第63-64页 |
| 4.2.3.5 灯盏花叶盘浸染及共培养 | 第64页 |
| 4.2.3.6 筛选培养 | 第64页 |
| 4.3 结果及分析 | 第64-71页 |
| 4.3.1 重组载体的构建及电击转化 | 第64-67页 |
| 4.3.2 灯盏花的遗传转化 | 第67-71页 |
| 4.3.2.1 灯盏花对Kan的敏感性 | 第67页 |
| 4.3.2.2 灯盏花对Cef的敏感性 | 第67-70页 |
| 4.3.2.3 筛选培养 | 第70-71页 |
| 4.4 小结 | 第71-72页 |
| 第5章 讨论 | 第72-75页 |
| 5.1 通过转录组数据获取目的基因的方法讨论 | 第72-73页 |
| 5.2 关于灯盏花MYB转录因子的功能讨论 | 第73-74页 |
| 5.3 灯盏花遗传转化体系建立过程中遇到的问题 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文和研究成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
