| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一篇 文献综述 | 第9-14页 |
| 1 流感病毒及流行现状 | 第9-11页 |
| 1.1 概论 | 第9页 |
| 1.2 流感病毒的异变 | 第9-10页 |
| 1.3 流感病毒的流行现状 | 第10-11页 |
| 2 流感疫苗的研究进展 | 第11-14页 |
| 2.1 灭活流感病毒疫苗的研究进展 | 第11-12页 |
| 2.2 流感病毒减毒活疫苗的研究进展 | 第12页 |
| 2.3 核酸疫苗 | 第12-13页 |
| 2.4 疫苗佐剂的研究进展 | 第13页 |
| 2.5 病毒样颗粒疫苗研究进展 | 第13页 |
| 2.6 亚单位疫苗 | 第13-14页 |
| 第二篇 实验内容 | 第14-59页 |
| 第一章 H5N1亚型流感病毒血凝素（HA）的表达、鉴定及纯化 | 第14-29页 |
| 1 材料 | 第14-16页 |
| 1.1 细胞与毒株 | 第14-15页 |
| 1.2 试剂 | 第15页 |
| 1.3 主要仪器 | 第15-16页 |
| 1.4 昆虫细胞培养基的配制 | 第16页 |
| 2 方法 | 第16-21页 |
| 2.1 重组杆状病毒质粒的构建及鉴定 | 第16-19页 |
| 2.2 重组杆状病的构建与鉴定 | 第19页 |
| 2.3 转染Sf9昆虫细胞与重组杆状病毒的鉴定 | 第19-20页 |
| 2.4 H5N1亚型流感病毒HA大量表达与纯化 | 第20页 |
| 2.5 间接免疫荧光法鉴定H5N1HA蛋白的表达 | 第20页 |
| 2.6 红细胞凝集实验测定H5N1HA血凝滴度 | 第20-21页 |
| 2.7 SDS-PAGE及Western blot分析 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-28页 |
| 3.1 H5N1HA基因的PCR扩增与双酶切鉴定 | 第21-22页 |
| 3.2 重组质粒的双酶切鉴定 | 第22-23页 |
| 3.3 重组杆状病毒H5N1-HA基因组鉴定结果 | 第23-24页 |
| 3.4 红细胞凝集实验测定纯化后H5N1HA蛋白血凝滴度 | 第24-25页 |
| 3.5 间接免疫荧光法鉴定H5N1HA蛋白 | 第25-26页 |
| 3.6 H5N1HA的SDS-PAGE和Western-blot鉴定 | 第26-28页 |
| 4 讨论 | 第28页 |
| 5 小结 | 第28-29页 |
| 第二章 H5N1HA小鼠的实验免疫研究 | 第29-39页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1 病毒和细胞 | 第29页 |
| 1.2 实验动物 | 第29页 |
| 1.3 常用试剂 | 第29-30页 |
| 1.4 常用仪器 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.1 免疫与攻毒 | 第30-31页 |
| 2.2 特异性Ig G抗体检测 | 第31页 |
| 2.3 血凝抑制抗体检测 | 第31页 |
| 2.4 血清微量中和实验 | 第31-32页 |
| 2.5 小鼠肺的EID50的滴定 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-37页 |
| 3.1 小鼠血清特异性Ig G抗体检测 | 第32-33页 |
| 3.2 小鼠血清血凝抑制抗体检测 | 第33-34页 |
| 3.3 微量中和抗体检测 | 第34-35页 |
| 3.4 小鼠攻毒实验结果 | 第35-37页 |
| 3.5 小鼠肺脏病毒滴度的检测 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 5 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 H7N9亚型流感病毒血凝素（HA）的表达、纯化及鉴定 | 第39-54页 |
| 1. 材料 | 第40页 |
| 1.1 细胞与毒株 | 第40页 |
| 1.2 试剂 | 第40页 |
| 1.3 主要仪器 | 第40页 |
| 1.4 昆虫细胞培养基的配制 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-46页 |
| 2.1 重组杆状病毒质粒的构建 | 第40-43页 |
| 2.2 重组质粒的鉴定 | 第43页 |
| 2.3 重组杆状病的的构建与鉴定 | 第43-44页 |
| 2.4 转染Sf9昆虫细胞与重组杆状病毒的鉴定 | 第44页 |
| 2.5 H7N9亚型流感病毒HA大量表达与纯化 | 第44页 |
| 2.6 间接免疫荧光法鉴定H7N9HA蛋白的表达 | 第44-45页 |
| 2.7 红细胞凝集实验测定H7N9HA血凝滴度 | 第45页 |
| 2.8 SDS-PAGE及Western blot分析 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-53页 |
| 3.1 H7N9HA基因的PCR扩增与双酶切鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2 重组质粒的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3 重组杆状病毒的构建与鉴定 | 第48页 |
| 3.4 重组杆状病毒基因组鉴定结果 | 第48-49页 |
| 3.5 红细胞凝集实验测定纯化后H7N9HA蛋白血凝滴度 | 第49-50页 |
| 3.6 间接免疫荧光法鉴定H7N9HA蛋白的表达 | 第50-51页 |
| 3.7 SDS-PAGE与Western-blot鉴定 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 第四章 H7N9HA小鼠的实验免疫研究 | 第54-59页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| 1.1 病毒和细胞 | 第54页 |
| 1.2 实验动物 | 第54页 |
| 1.3 常用试剂 | 第54页 |
| 1.4 常用仪器 | 第54-55页 |
| 2.方法 | 第55-56页 |
| 2.1 小鼠免疫实验 | 第55页 |
| 2.2 特异性Ig G抗体检测 | 第55页 |
| 2.3 血凝抑制抗体检测 | 第55-56页 |
| 3 结果 | 第56-57页 |
| 3.1 特异性Ig G抗体检测 | 第56页 |
| 3.2 血凝抑制抗体效价检测 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 5 小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 作者简介 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
