| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 糖转运蛋白的研究进展 | 第10-16页 |
| 1.1.1 糖转运蛋白的分类和功能 | 第10-12页 |
| 1.1.2 酿酒酵母糖转运蛋白 | 第12-13页 |
| 1.1.3 糖转运蛋白在底物信号感应及传导中的作用 | 第13-14页 |
| 1.1.4 糖转运蛋白在工业微生物中的利用 | 第14页 |
| 1.1.5 研究糖转运蛋白的方法 | 第14-16页 |
| 1.2 丝状真菌糖转运蛋白在纤维素降解方面的应用 | 第16-20页 |
| 1.2.1 粗糙脉孢菌简介 | 第16-18页 |
| 1.2.2 粗糙脉孢菌在研究纤维素降解方面的进展 | 第18页 |
| 1.2.3 以粗糙脉孢菌为代表的丝状真菌的糖转运蛋白 | 第18-19页 |
| 1.2.4 糖转运蛋白在纤维素酶表达分泌中的作用 | 第19-20页 |
| 1.3 课题研究的目的意义与技术路线 | 第20-23页 |
| 1.3.1 研究的目的与意义 | 第20-22页 |
| 1.3.2 课题研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-31页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.3 实验用的菌株、质粒及引物 | 第26-31页 |
| 2.2 常用培养基及储存液的配置 | 第31-33页 |
| 2.2.1 常用缓冲液的配制 | 第31-32页 |
| 2.2.2 常用培养基的配制 | 第32-33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-41页 |
| 2.3.1 RNA提取与纯化 | 第33-34页 |
| 2.3.2 RNA反转录合成cDNA | 第34页 |
| 2.3.3 DNA片段克隆、重组与转化 | 第34-35页 |
| 2.3.4 大肠杆菌质粒提取（质粒小提试剂盒） | 第35-36页 |
| 2.3.5 酵母热击转化 | 第36页 |
| 2.3.6 酵母平板生长实验 | 第36页 |
| 2.3.7 酵母绿色荧光蛋白（GFP）亚细胞定位及荧光共振能量转移（FRET）荧光拍照 | 第36页 |
| 2.3.8 荧光共振能量转移（FRET）测试 | 第36-37页 |
| 2.3.9 重组酿酒酵母发酵 | 第37页 |
| 2.3.10 遗传进化树的构建 | 第37-38页 |
| 2.3.11 粗糙脉孢菌有性杂交试验 | 第38-39页 |
| 2.3.12 蛋白浓度测定 | 第39页 |
| 2.3.13 纤维素酶活测定 | 第39-40页 |
| 2.3.14 实时定量PCR | 第40-41页 |
| 第3章 结果与分析 | 第41-60页 |
| 3.1 粗糙脉孢菌糖转运蛋白的功能分析 | 第41-53页 |
| 3.1.1 粗糙脉孢菌糖转运蛋白表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.1.2 用于荧光共振能量转移检测的质粒的构建 | 第42-43页 |
| 3.1.3 用于荧光共振能量转移的质粒的荧光检测 | 第43-44页 |
| 3.1.4 酿酒酵母EBY.VW4000重组菌株的表型分析 | 第44-47页 |
| 3.1.5 利用荧光共振能量转移技术评价NcHXT-1/-2 的葡萄糖转运功能 | 第47-48页 |
| 3.1.6 过表达NcHXT-1/-2 酵母的发酵测试 | 第48-52页 |
| 3.1.7 NcHXT-1/-2 的遗传进化树分析 | 第52-53页 |
| 3.2 粗糙脉孢菌糖转运蛋白在纤维素酶表达分泌过程中的功能解析 | 第53-60页 |
| 3.2.1 粗糙脉孢菌NcHXT-1/-2 单基因突变体的验证及表型分析 | 第53-55页 |
| 3.2.2 粗糙脉孢菌糖转运蛋白与高亲和力葡萄糖转运蛋白多突变体的构建及表型分析 | 第55-58页 |
| 3.2.3 单/多基因突变体对纤维素酶调控的影响 | 第58-60页 |
| 第4章 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 附录 1 | 第72-74页 |
| 附录 2 | 第74-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第106页 |
