| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 主要符号对照表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 隐形眼镜、隐形眼镜护理液及角膜 | 第12-14页 |
| 1.1.1 隐形眼镜 | 第12页 |
| 1.1.2 隐形眼镜护理液 | 第12-13页 |
| 1.1.3 隐形眼镜的正确使用 | 第13页 |
| 1.1.4 角膜 | 第13-14页 |
| 1.2 隐形眼镜护理液对眼睛的损伤 | 第14-16页 |
| 1.2.1 隐形眼镜护理液质量事故 | 第14-15页 |
| 1.2.2 隐形眼镜护理液对细胞的毒性 | 第15-16页 |
| 1.3 组织激肽释放酶结合蛋白 | 第16-19页 |
| 1.3.1 Kal的结构与分布 | 第16-17页 |
| 1.3.2 Kal的生物学功能 | 第17-19页 |
| 1.4 Kal与隐形眼镜护理液损伤的联系 | 第19页 |
| 1.5 研究方法 | 第19-22页 |
| 第2章 rhKal高表达菌株的筛选及rhKal制备 | 第22-38页 |
| 2.1 实验材料、仪器及其常用溶液配制 | 第22-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 常用溶液配制 | 第23-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 rhKal高表达菌株的筛选及保存 | 第26-28页 |
| 2.2.2 rhKal蛋白的发酵 | 第28-29页 |
| 2.2.3 rhKal蛋白的纯化 | 第29-30页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE电泳检测发酵及纯化过程中蛋白含量的变化 | 第30-31页 |
| 2.2.5 Western blot鉴定发酵及纯化过程中蛋白含量的变化 | 第31页 |
| 2.2.6 发酵总蛋白浓度的测定 | 第31页 |
| 2.2.7 rhKal蛋白浓度的测定 | 第31页 |
| 2.2.8 统计分析 | 第31页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.3.1 菌种的筛选与鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.2 rhKal蛋白的发酵及鉴定 | 第32-34页 |
| 2.3.3 rhKal的纯化及其鉴定 | 第34-37页 |
| 2.3.4 纯化过程中各组分产率回收情况 | 第37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 隐形眼镜护理液对人角膜上皮细胞的损伤作用 | 第38-54页 |
| 3.1 实验材料、仪器及常用溶液配制 | 第38-42页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第39-40页 |
| 3.1.3 常用溶液的配制 | 第40-41页 |
| 3.1.4 实验护理液主要成分及其实验编号 | 第41-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.2.1 HCE细胞的培养 | 第42-43页 |
| 3.2.2 隐形眼镜护理液对HCE细胞活力的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.3 隐形眼镜护理液对HCE细胞形态的影响 | 第44页 |
| 3.2.4 隐形眼镜护理液对HCE细胞超氧化物的影响 | 第44页 |
| 3.2.5 隐形眼镜护理液对HCE细胞凋亡的影响 | 第44-46页 |
| 3.2.6 数据统计 | 第46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-51页 |
| 3.3.1 隐形眼镜护理液对HCE细胞活力的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.2 隐形眼镜护理液对HCE细胞形态的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.3 隐形眼镜护理液对HCE细胞内超氧化物的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.4 隐形眼镜护理液对HCE细胞凋亡的影响 | 第49-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-54页 |
| 第4章 rhKal对隐形眼镜护理液引起HCE损伤的修复作用 | 第54-72页 |
| 4.1 实验材料、仪器及常用溶液配制 | 第54-55页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第55页 |
| 4.1.3 常用溶液配制 | 第55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-59页 |
| 4.2.1 HConEpiC培养方法 | 第55-56页 |
| 4.2.2 rhKal对HCE细胞活力的影响 | 第56页 |
| 4.2.3 rhKal对HConEpiC细胞活力的影响 | 第56页 |
| 4.2.4 rhKal对隐形眼镜护理液损伤HCE细胞活力的影响 | 第56-57页 |
| 4.2.5 rhKal对隐形眼镜护理液致伤HCE细胞形态的影响 | 第57页 |
| 4.2.6 rhKal对隐形眼镜护理液损伤HCE细胞超氧化物的影响 | 第57-58页 |
| 4.2.7 rhKal对隐形眼镜护理液损伤HCE细胞凋亡的影响 | 第58页 |
| 4.2.8 数据统计 | 第58-59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-70页 |
| 4.3.1 rhKal对HCE细胞活力的影响 | 第59页 |
| 4.3.2 rhKal对HConEpiC细胞活力的影响 | 第59-60页 |
| 4.3.3 rhKal对隐形眼镜护理液损伤的HCE细胞活力的影响 | 第60-62页 |
| 4.3.4 rhKal对隐形眼镜护理液致伤HCE细胞形态的修复作用 | 第62-64页 |
| 4.3.5 rhKal对隐形眼镜护理液损伤的HCE细胞超氧化物的影响 | 第64-66页 |
| 4.3.6 rhKal对隐形眼镜护理液损伤HCE细胞凋亡的影响 | 第66-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-72页 |
| 第5章 rhKal对过氧化氢引起人角膜、结膜上皮细胞损伤的修复作用 | 第72-84页 |
| 5.1 实验材料、仪器及常用溶液配制 | 第72-73页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第72页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第72-73页 |
| 5.1.3 常用溶液配制 | 第73页 |
| 5.2 实验方法 | 第73-75页 |
| 5.2.1 诱导HCE、HConEpiC损伤的过氧化氢浓度范围筛选 | 第73页 |
| 5.2.2 过氧化氢诱导HCE损伤模型的构建 | 第73页 |
| 5.2.3 过氧化氢诱导HConEpiC损伤模型的构建 | 第73-74页 |
| 5.2.4 rhKal对过氧化氢损伤HCE、HConEpiC细胞活力的影响 | 第74页 |
| 5.2.5 过氧化氢诱导HCE损伤的持续性 | 第74页 |
| 5.2.6 Hoechst 33258 检测rhKal对过氧化氢损伤的HCE、HConEpi C细胞凋亡的影响 | 第74-75页 |
| 5.2.7 数据统计 | 第75页 |
| 5.3 实验结果 | 第75-82页 |
| 5.3.1 诱导HCE、HConEpiC损伤的过氧化氢浓度范围筛选 | 第75-76页 |
| 5.3.2 过氧化氢诱导HCE损伤模型的构建 | 第76-77页 |
| 5.3.3 过氧化氢诱导HConEpiC损伤模型的构建 | 第77-78页 |
| 5.3.4 rhKal对过氧化氢损伤的HCE、HConEpiC细胞活力的影响 | 第78-81页 |
| 5.3.5 Hoechst 33258 检测rhKal对过氧化氢损伤的HCE细胞凋亡的影响 | 第81页 |
| 5.3.6 Hoechst 33258 检测rhKal对过氧化氢损伤的HConEpiC细胞凋亡的影响 | 第81-82页 |
| 5.4 讨论 | 第82-84页 |
| 第6章 总结与展望 | 第84-86页 |
| 6.1 总结 | 第84页 |
| 6.2 创新点 | 第84页 |
| 6.3 展望 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第94页 |
