摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 综述 | 第13-30页 |
1. 蛋白质降解 | 第13-16页 |
1.1 蛋白酶体 | 第13-15页 |
1.2 泛素依赖的蛋白酶体降解 | 第15-16页 |
1.3 非泛素化依赖的蛋白质降解 | 第16页 |
1.4 蛋白酶体降解的意义 | 第16页 |
2. REGγ | 第16-21页 |
2.1 REG及REG γ | 第16-18页 |
2.2 REG γ生物学功能 | 第18-21页 |
3. 精神分裂症 | 第21-25页 |
3.1 精神分裂症简介 | 第21页 |
3.2 分子机制 | 第21-25页 |
4. 氧化代谢与AMPK | 第25-30页 |
4.1 线粒体生物功能与肌肉功能 | 第25-26页 |
4.2 AMPK与线粒体功能 | 第26-30页 |
第二章 实验材料和方法 | 第30-44页 |
1. 实验材料 | 第30-32页 |
1.1 小鼠 | 第30页 |
1.2 细胞系 | 第30页 |
1.3 感受态 | 第30页 |
1.4 实验试剂和器材 | 第30-31页 |
1.5 抗体 | 第31页 |
1.6 引物 | 第31-32页 |
2. 实验方法 | 第32-44页 |
2.1 小鼠基因型鉴定 | 第32-33页 |
2.2 小鼠跑台训练实验 | 第33-34页 |
2.3 细胞培养,冻存,复苏 | 第34页 |
2.4 细胞转染 | 第34页 |
2.5 质粒构建与质粒提取 | 第34-36页 |
2.6 蛋白质免疫印迹实验 | 第36-37页 |
2.7 蛋白质免疫共沉淀实验 | 第37-38页 |
2.8 定量PCR | 第38-40页 |
2.9 冰冻切片(用于SDH染色) | 第40页 |
2.10 SDH染色 | 第40页 |
2.11 免疫荧光 | 第40-41页 |
2.12 核质分离 | 第41页 |
2.13 嘌呤霉素筛选稳转细胞系(shRNA稳定转染) | 第41-44页 |
第三章 实验结果和分析 | 第44-69页 |
第一部分 REGγ对精神分裂症重要蛋白GSK3β的调控 | 第44-54页 |
第一节 REGγ对精神分裂症重要蛋白GSK3β蛋白表达的影响 | 第44-48页 |
1.1 REGγ对细胞内GSK3β基因的影响 | 第44-45页 |
1.2 REGγ对细胞内GSK3β蛋白水平的影响 | 第45-46页 |
1.3 REGγ对细胞内GSK3β活性影响 | 第46-47页 |
1.4 实验小结 | 第47-48页 |
第二节 REGγ对GSK3β及其底物蛋白降解的影响 | 第48-50页 |
2.1 REGγ对GSK3β蛋白降解的影响 | 第48页 |
2.2 REG Y对GSK3 p底物蛋白降解的影响 | 第48-49页 |
2.3 实验小结 | 第49-50页 |
第三节 REGγ对GSK3β作用区域的初步探究 | 第50-52页 |
3.1 核质分离探究REGγ与GSK3β相互作用的亚细胞定位 | 第50-51页 |
3.2 细胞免疫荧光探究REGγ与GSK3β的亚细胞定位 | 第51-52页 |
3.3 Co-IP实验探究REGγ与GSK3β的关系 | 第52页 |
3.4 实验小结 | 第52页 |
第四节 实验总结 | 第52-53页 |
第五节 展望 | 第53-54页 |
第二部分 REGγ对肌肉功能及线粒体活性影响的初步探究 | 第54-69页 |
第一节 REGγ对小鼠肌肉功能的影响 | 第54-58页 |
1.1 REGγ对小鼠动物跑台实验和游泳实验表型的影响 | 第54-55页 |
1.2 REGγ对小鼠肌肉线粒体功能相关基因表达的调控 | 第55-56页 |
1.3 REGγ对运动小鼠肌肉中AMPK活性的调控 | 第56-57页 |
1.4 实验小结 | 第57-58页 |
第二节 REGγ对饥饿小鼠肌肉能量代谢的影响 | 第58-59页 |
2.1 REGv对小鼠饥饿后线粒体功能的影响 | 第58页 |
2.2 REGy对小鼠饥饿后AMPK功能的影响 | 第58-59页 |
2.3 实验小结 | 第59页 |
第三节 REGγ对细胞中能量代谢的影响 | 第59-65页 |
3.1 REGγ对神经细胞中能量代谢的影响 | 第59-61页 |
3.2 REGγ对肝细胞中能量代谢的影响 | 第61-63页 |
3.3 REGγ对小鼠胚胎成纤维细胞中能量代谢的影响 | 第63-65页 |
3.4 实验小结 | 第65页 |
第四节 REGγ调控AMPK介导能量代谢机制的初步探究 | 第65-67页 |
4.1 蛋白免疫共沉淀实验检测REGγ与AMPK的互作关系 | 第65-66页 |
4.2 诱导REGγ高表达研究REGγ与AMPK的关系 | 第66-67页 |
4.3 实验小结 | 第67页 |
第五节 实验总结 | 第67页 |
第六节 展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
致谢 | 第76页 |