中英文缩写词对照 | 第8-11页 |
中文摘要 | 第11-15页 |
英文摘要 | 第15-18页 |
第一部分 老鹰茶总黄酮中主要黄酮苷类与其苷元在Caco-2/MDCK细胞上的吸收转运 | 第19-63页 |
1. 前言 | 第19-22页 |
2. 实验材料 | 第22-25页 |
2.1 药品与试剂 | 第22-24页 |
2.2 仪器和设备 | 第24-25页 |
3. 实验方法 | 第25-38页 |
3.1 细胞单层模型的建立 | 第25-26页 |
3.2 细胞单层模型的验证 | 第26-27页 |
3.3 培养液中待测物的测定方法 | 第27-28页 |
3.4 MTT法测定细胞毒性 | 第28-29页 |
3.5 TFLC中主要黄酮苷类及其苷元的双向转运试验 | 第29页 |
3.6 转运介质pH值对主要黄酮苷类及其苷元转运的影响 | 第29页 |
3.7 TFLC中主要黄酮苷类及其苷元转运的能量依赖性试验 | 第29页 |
3.8 Real-time qPCR检测Caco-2、MDCK细胞中MDR1,MRP2,SGLT1和GLUT2 mRNA的表达 | 第29-32页 |
3.9 Western Blot法检测Caco-2、MDCK细胞中P-gp,MRP2,SGLT1和GLUT2蛋白表达 | 第32-37页 |
3.10 TFLC中主要黄酮苷类及其苷元介导的转运动力学试验 | 第37页 |
3.11 TFLC中主要黄酮苷类及其苷元在MDCK细胞模型上双向转运的相互作用 | 第37-38页 |
3.12 实验数据处理及参数计算 | 第38页 |
3.13 统计学分析 | 第38页 |
4. 实验结果 | 第38-58页 |
4.1 细胞单层模型的建立和验证 | 第38-41页 |
4.2 培养液中待测物的测定方法的评价 | 第41-44页 |
4.3 MTT法测定细胞毒性 | 第44-45页 |
4.4 TFLC中主要黄酮苷类及其苷元在Caco-2、MDCK细胞中的双向转运 | 第45-50页 |
4.5 转运介质pH值对主要黄酮苷类及其苷元转运的影响 | 第50-51页 |
4.6 温度以及ATP酶抑制剂对主要黄酮苷类及其苷元转运的影响 | 第51-52页 |
4.7 Caco-2 和MDCK细胞中MDR1,MRP2,SGLT1和GLUT2 mRNA和蛋白表达 | 第52-55页 |
4.8 不同抑制剂对主要黄酮苷类及其苷元的影响 | 第55-58页 |
4.9 TFLC中主要黄酮苷类及其苷元双向转运的相互作用 | 第58页 |
5. 讨论 | 第58-63页 |
第二部分 老鹰茶总黄酮中主要黄酮苷类与其苷元对Caco-2细胞和人肝癌耐药BEL-7402/5-FU细胞中ABC转运蛋白的调控作用 | 第63-77页 |
1. 前言 | 第63-65页 |
2. 实验材料 | 第65页 |
2.1 药品与试剂 | 第65页 |
2.2 仪器和设备 | 第65页 |
3. 实验方法 | 第65-68页 |
3.1 细胞培养 | 第65页 |
3.2 转运蛋白底物在Caco-2 细胞单层中的转运试验 | 第65-66页 |
3.3 Real-time qPCR检测BEL-7402和BEL/5-FU细胞中ABC转运蛋白基因的表达 | 第66页 |
3.4 荧光显微镜观察黄酮苷元槲皮素对BEL/5-FU细胞内Rh123和ADR蓄积的影响 | 第66-67页 |
3.5 流式细胞仪检测黄酮苷元槲皮素对BEL/5-FU细胞内Rh123和ADR蓄积的影响 | 第67页 |
3.6 MTT法检测黄酮苷元槲皮素对BEL/5-FU细胞耐药性的影响 | 第67-68页 |
3.7 统计学分析 | 第68页 |
4. 实验结果 | 第68-75页 |
4.1 TFLC中主要黄酮苷类及其苷元对Caco-2 细胞中ABC转运蛋白活性的影响 | 第68-69页 |
4.2 槲皮素对BEL-7402、BEL/5-FU细胞中ABC转运蛋白MDR1、MRP2 mRNA表达水平的影响 | 第69-71页 |
4.3 槲皮素对BEL/5-FU细胞内Rh123和ADR蓄积的影响 | 第71-74页 |
4.4 槲皮素对BEL/5-FU细胞耐药性的影响 | 第74-75页 |
5. 讨论 | 第75-77页 |
第三部分 黄酮苷元槲皮素通过抑制FZD7/β-catenin通路下调人肝癌耐药细胞BEL-7402/5-FU中ABC转运蛋白的表达逆转多药耐药 | 第77-102页 |
1. 前言 | 第77-78页 |
2. 实验材料 | 第78-79页 |
2.1. 药品与试剂 | 第78页 |
2.2 仪器和设备 | 第78-79页 |
3. 实验方法 | 第79-83页 |
3.1 BEL-7402和BEL/5-FU细胞的培养 | 第79页 |
3.2 细胞转染 | 第79页 |
3.3 Real-time qPCR检测BEL-7402和BEL/5-FU细胞中FZD7、β-catenin、MDR1和MRP2 mRNA的表达 | 第79-81页 |
3.4 Western Blot法检测BEL-7402和BEL/5-FU细胞中FZD7、β-catenin、P-gp和MRP2蛋白的表达 | 第81-82页 |
3.5 MTT法测定FZD7对BEL/5-FU细胞耐药性的影响 | 第82页 |
3.6 MTT法测定细胞毒性 | 第82-83页 |
3.7 荧光显微镜观察FZD7对BEL/5-FU细胞内Rh123和ADR蓄积的影响 | 第83页 |
3.8 流式细胞仪检测FZD7对BEL/5-FU细胞内Rh123和ADR蓄积的影响 | 第83页 |
4. 实验结果 | 第83-100页 |
4.1 BEL-7402和BEL/5-FU细胞中FZD7、MDR1/P-gp和MRP2的异常表达 | 第83-85页 |
4.2 FZD7/β-catenin对BEL/5-FU细胞中ABC转运蛋白表达的影响 | 第85-91页 |
4.3 FZD7对BEL/5-FU细胞耐药性的影响 | 第91-94页 |
4.4 槲皮素对BEL/5-FU细胞的生长抑制作用以及无毒剂量的筛选 | 第94-95页 |
4.5 槲皮素对BEL/5-FU细胞中ABC转运蛋白表达的影响 | 第95-96页 |
4.6 槲皮素通过抑制FZD7/β-catenin信号通路从而抑制ABC转运蛋白的表达 | 第96-100页 |
5. 讨论 | 第100-102页 |
结论 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-115页 |
附录 | 第115-118页 |
致谢 | 第118-119页 |
综述 | 第119-151页 |
References | 第137-151页 |