苦味评价细胞钙成像模型构建
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第14-30页 |
| 1. 苦味及评价技术简介 | 第14-15页 |
| 2. 苦味产生机理 | 第15-17页 |
| 2.1. 苦味传导要素 | 第16页 |
| 2.2. 苦味细胞内传导通路 | 第16-17页 |
| 3. 苦味评价技术的研究进展 | 第17-21页 |
| 3.1. 体内评价方法 | 第17-18页 |
| 3.2. 体外评价方法 | 第18-21页 |
| 4. 细胞内钙成像技术 | 第21-25页 |
| 4.1. 细胞内钙离子调控机制 | 第21页 |
| 4.2. 化学荧光指示剂的发展 | 第21-23页 |
| 4.3. 钙测定光学系统研究进展 | 第23-25页 |
| 5. 本论文的主要内容和创新性 | 第25-26页 |
| 5.1. 本论文的主要内容 | 第25页 |
| 5.2. 本论文创新点 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-30页 |
| 第二章 质粒构建 | 第30-40页 |
| 1. 前言 | 第30页 |
| 2. 实验仪器与材料 | 第30-31页 |
| 2.1. 仪器 | 第30页 |
| 2.2. 试剂与材料 | 第30-31页 |
| 3. 实验方法 | 第31-36页 |
| 3.1. T2R46-BR质粒构建 | 第31-34页 |
| 3.2. 克隆质粒的扩增 | 第34-36页 |
| 3.3. 质粒纯化 | 第36页 |
| 3.4. Gα质粒的PCR鉴定及电泳 | 第36页 |
| 4. 结果与讨论 | 第36-38页 |
| 4.1. BR的PCR电泳 | 第36-37页 |
| 4.2. 酶切电泳图 | 第37页 |
| 4.3. 回收定量电泳图 | 第37-38页 |
| 4.4. Gα质粒PCR电泳图 | 第38页 |
| 5. 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-40页 |
| 第三章 苦味评价细胞钙成像模型构建 | 第40-50页 |
| 1. 前言 | 第40页 |
| 2. 实验仪器和材料 | 第40-41页 |
| 2.1. 仪器 | 第40页 |
| 2.2. 材料与试剂 | 第40-41页 |
| 2.3. 细胞株 | 第41页 |
| 3. 实验方法 | 第41-43页 |
| 3.1. 苦味质粒瞬时转染 | 第41页 |
| 3.2. Gα稳定转染表达系筛选 | 第41-42页 |
| 3.3. 钙成像检测 | 第42-43页 |
| 4. 结果与讨论 | 第43-48页 |
| 4.1. 质粒转染效果 | 第43-44页 |
| 4.2. Gα稳定筛选结果 | 第44页 |
| 4.3. 激光共聚焦显微镜检测结果 | 第44-45页 |
| 4.4. 全波长扫描式多功能酶标仪检测结果 | 第45-46页 |
| 4.5. FLIPR检测结果 | 第46-48页 |
| 5. 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第四章 “气管味蕾”平台细胞水平的验证 | 第50-57页 |
| 1. 前言 | 第50页 |
| 2. 实验仪器和材料 | 第50-51页 |
| 2.1. 仪器 | 第50页 |
| 2.2. 试剂与材料 | 第50-51页 |
| 3. 实验方法 | 第51-53页 |
| 3.1. 猪和豚鼠的气管平滑肌细胞提取 | 第51-52页 |
| 3.2. 免疫组化鉴定 | 第52页 |
| 3.3. 气管平滑肌细胞钙成像 | 第52-53页 |
| 4. 结果与讨论 | 第53-55页 |
| 4.1. 免疫组化鉴定结果 | 第53页 |
| 4.2. 气管平滑肌细胞钙成像检测 | 第53-55页 |
| 5. 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-57页 |
| 全文小结 | 第57-58页 |
| 存在的问题与展望 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录：已发表和待发表论文 | 第60-61页 |
