| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 主要符号对照表 | 第8-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-29页 |
| 1.1 细胞自噬的概念及分类 | 第9-12页 |
| 1.2 细胞自噬的过程及分子机制 | 第12-23页 |
| 1.2.1 自噬的起始 | 第12-13页 |
| 1.2.2 自噬体的形成 | 第13-22页 |
| 1.2.3 自噬体与酵母液泡的融合 | 第22页 |
| 1.2.4 自噬体的降解及营养物质的循环再利用 | 第22-23页 |
| 1.3 细胞自噬的信号调控 | 第23-26页 |
| 1.3.1 蛋白激酶对自噬的调控 | 第23-24页 |
| 1.3.2 转录因子对自噬的调控 | 第24-26页 |
| 1.4 细胞自噬与人类疾病 | 第26-27页 |
| 1.5 Kin28-Ccl1-Tfb3复合体概述 | 第27-28页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第29-62页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-51页 |
| 2.1.1 酵母菌株与质粒 | 第29-43页 |
| 2.1.2 QPCR引物 | 第43-44页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第44-45页 |
| 2.1.4 培养基 | 第45-46页 |
| 2.1.5 试剂与抗体 | 第46-47页 |
| 2.1.6 试剂的配制 | 第47-51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-62页 |
| 2.2.1 分子生物学相关实验 | 第51-56页 |
| 2.2.2 酵母细胞相关的实验 | 第56-60页 |
| 2.2.3 BCA蛋白浓度测定 | 第60页 |
| 2.2.4 免疫印迹 | 第60-62页 |
| 第3章 Ccl1蛋白参与氮源饥饿诱导的自噬 | 第62-68页 |
| 3.1 引言 | 第62页 |
| 3.2 实验结果 | 第62-67页 |
| 3.2.1 Ccl1参与氮源饥饿诱导的细胞自噬 | 第62-64页 |
| 3.2.2 ccl1-ts4在许可温度下不影响自噬的活性 | 第64-65页 |
| 3.2.3 ccl1-ts4在非许可温度下引起的自噬缺陷可通过外源表达Ccl1蛋白得以恢复 | 第65-67页 |
| 3.3 小结 | 第67-68页 |
| 第4章 Ccl1通过Kin28激酶活性调控自噬的发生 | 第68-73页 |
| 4.1 引言 | 第68页 |
| 4.2 实验结果 | 第68-72页 |
| 4.2.1 Ccl1作用于Kin28的上游调控自噬 | 第68-71页 |
| 4.2.2 不能被Kin28磷酸化的PolⅡCTD突变体抑制自噬的发生 | 第71-72页 |
| 4.3 小结 | 第72-73页 |
| 第5章 伴随着饥饿时间延长Ccl1会被蛋白酶体途径降解并导致自噬活性降低 | 第73-80页 |
| 5.1 引言 | 第73页 |
| 5.2 实验结果 | 第73-79页 |
| 5.2.1 延长饥饿会导致Ccl1的降解并降低自噬活性 | 第73-76页 |
| 5.2.2 Ccl1的降解是通过蛋白酶体途径发生的 | 第76-79页 |
| 5.3 小结 | 第79-80页 |
| 第6章 Ccl1调控Atg1复合体在PAS的装配 | 第80-89页 |
| 6.1 引言 | 第80页 |
| 6.2 实验结果 | 第80-88页 |
| 6.2.1 auxin degron系统降解Ccl1同样可以抑制自噬活性 | 第80-82页 |
| 6.2.2 Cvt途径部分受Ccl1的调控 | 第82-83页 |
| 6.2.3 Ccl1不影响TOR的活性 | 第83-84页 |
| 6.2.4 Atg1复合体在PAS的组装需要Ccl1的参与 | 第84-88页 |
| 6.3 小结 | 第88-89页 |
| 第7章 Ccl1对维持Atg29和Atg31的表达量至关重要 | 第89-98页 |
| 7.1 引言 | 第89页 |
| 7.2 实验结果 | 第89-96页 |
| 7.2.1 Ccl1-Kin28复合体影响了Atg29和Atg31的表达 | 第89-94页 |
| 7.2.2 Ccl1-Kin28复合体通过转录后调控Atg29和Atg31 | 第94页 |
| 7.2.3 Atg29和Atg31蛋白相较于其它Atg1复合体中的蛋白稳定性较差 | 第94-96页 |
| 7.3 小结 | 第96-98页 |
| 第8章 讨论与展望 | 第98-103页 |
| 参考文献 | 第103-116页 |
| 致谢 | 第116-118页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第118页 |
