摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
中英文缩略词对照表 | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-18页 |
1.1 裂殖壶菌简介 | 第9-11页 |
1.1.1 裂殖壶菌的相关研究 | 第9-10页 |
1.1.2 裂殖壶菌的脂质代谢 | 第10-11页 |
1.2 脂滴简介 | 第11-16页 |
1.2.1 脂质的结构及生理功能 | 第11-13页 |
1.2.2 脂滴的代谢 | 第13-16页 |
1.3 基因组学研究进展 | 第16页 |
1.3.1 基因组学的概念 | 第16页 |
1.3.2 基因组学的应用 | 第16页 |
1.4 本课题的立题依据与研究内容 | 第16-18页 |
第二章 裂殖壶菌Schizochytrium sp. S31全基因组测序 | 第18-28页 |
2.1 引言 | 第18页 |
2.2 实验材料与设备 | 第18-19页 |
2.2.1 菌株 | 第18页 |
2.2.2 主要试剂和仪器 | 第18页 |
2.2.3 培养基 | 第18-19页 |
2.3 实验方法 | 第19-20页 |
2.3.1 菌种活化及纯化 | 第19页 |
2.3.2 菌种鉴定 | 第19-20页 |
2.3.3 基因组的提取 | 第20页 |
2.4 结果与讨论 | 第20-27页 |
2.4.1 基因组测序与组装 | 第20-21页 |
2.4.2 蛋白编码基因功能注释 | 第21-23页 |
2.4.3 基因预测与比对 | 第23-25页 |
2.4.4 编码蛋白结构预测 | 第25-27页 |
2.5 本章小结 | 第27-28页 |
第三章 裂殖壶菌脂肪酸合成关键酶基因的转录变化 | 第28-36页 |
3.1 引言 | 第28页 |
3.2 实验材料与设备 | 第28页 |
3.2.1 菌株 | 第28页 |
3.2.2 主要试剂和仪器 | 第28页 |
3.2.3 培养基 | 第28页 |
3.3 实验方法 | 第28-31页 |
3.3.1 摇瓶发酵方法 | 第28-29页 |
3.3.2 分析方法 | 第29-31页 |
3.4 结果与讨论 | 第31-35页 |
3.4.1 调节温度后摇瓶内的菌体生长、脂质积累及脂肪酸组成 | 第31-33页 |
3.4.2 调节温度后FAS及PKS基因的转录水平变化 | 第33-35页 |
3.5 本章小结 | 第35-36页 |
第四章 裂殖壶菌发酵后期关键脂肪酶基因的转录变化 | 第36-52页 |
4.1 引言 | 第36页 |
4.2 实验材料与设备 | 第36页 |
4.2.1 主要试剂和仪器 | 第36页 |
4.2.2 培养基 | 第36页 |
4.3 实验方法 | 第36-37页 |
4.3.1 发酵罐发酵方法 | 第36页 |
4.3.2 分析方法 | 第36-37页 |
4.4 结果与讨论 | 第37-51页 |
4.4.1 Schizochytrium sp. S31在不同碳源条件下的发酵情况 | 第37-40页 |
4.4.2 甘油发酵条件下磷脂变化情况及磷脂酶转录水平 | 第40-44页 |
4.4.3 甘油发酵条件下甘油三酯脂肪酸的变化及甘油酯酶的转录 | 第44-46页 |
4.4.4 葡萄糖发酵条件下磷脂的变化及磷脂酶的转录 | 第46-50页 |
4.4.5 葡萄糖发酵条件下甘油三酯的变化及甘油三酯脂肪酶转录水平 | 第50-51页 |
4.5 本章小结 | 第51-52页 |
第五章 磷脂酶基因的异源表达 | 第52-57页 |
5.1 引言 | 第52页 |
5.2 实验材料与设备 | 第52页 |
5.2.1 菌株与质粒 | 第52页 |
5.2.2 培养基 | 第52页 |
5.3 实验方法 | 第52-54页 |
5.3.1 目的基因的扩增 | 第52-53页 |
5.3.2 重组质粒的构建及验证 | 第53页 |
5.3.3 毕赤酵母电转感受态制备 | 第53-54页 |
5.3.4 重组毕赤酵母诱导表达 | 第54页 |
5.4 结果与讨论 | 第54-56页 |
5.4.1 重组表达质粒的鉴定 | 第54-55页 |
5.4.2 磷脂酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第55-56页 |
5.4.3 磷脂酶的诱导表达及酶活性检测 | 第56页 |
5.5 本章小结 | 第56-57页 |
主要结论与展望 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文及成果 | 第65页 |