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日本沼虾酚氧化酶原激活因子基因克隆及其表达分析

英文缩略词第4-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-21页
    1.1 日本沼虾的种质特性研究进展第11-12页
    1.2 日本沼虾免疫系统研究进展第12-15页
        1.2.1 酚氧化酶原激活系统研究进展第13页
        1.2.2 凝集素研究进展第13-14页
        1.2.3 溶菌酶研究进展第14页
        1.2.4 血蓝蛋白研究进展第14-15页
        1.2.5 抗菌肽研究进展第15页
    1.3 酚氧化酶原系统研究进展第15-17页
        1.3.1 酚氧化酶原和酚氧化酶第15-16页
        1.3.2 酚氧化酶原激活因子第16-17页
    1.4 分子细胞生物学技术及其应用第17-20页
        1.4.1 快速克隆cDNA末端技术(Rapid Amplification of cDNA Ends, RACE)第17-18页
        1.4.2 巢式PCR(NEST-PCR)和降落PCR(TOUCH DOWN PCR)第18-19页
        1.4.3 实时荧光定量PCR(REAL TIME QUANTIATIVE PCR)第19-20页
    1.5 本研究的目的与意义第20-21页
2 材料与方法第21-30页
    2.1 试验材料第21-23页
        2.1.1 试验动物第21页
        2.1.2 嗜水气单胞菌第21页
        2.1.3 主要仪器设备第21-22页
        2.1.4 主要试剂第22页
        2.1.5 常用溶液配制第22-23页
    2.2 试验方法第23-30页
        2.2.1 引物合成第23页
        2.2.2 总RNA的提取与质量检测第23-24页
        2.2.3 反转录合成cDNA第24页
        2.2.4 RACE扩增目的基因全长cDNA序列第24-26页
        2.2.5 日本沼虾PPAF基因序列扩增第26页
        2.2.6 PCR产物片段回收第26-27页
        2.2.7 PCR产物与载体的连接第27页
        2.2.8 大肠杆菌的转化第27-28页
        2.2.9 重组克隆的鉴定第28页
        2.2.10 生物信息学分析第28页
        2.2.11 人工感染日本沼虾试验第28页
        2.2.12 荧光定量PCR第28-30页
3 结果与分析第30-39页
    3.1 总RNA的提取第30页
    3.2 PPAF基因的分离鉴定与生物信息学分析第30-31页
        3.2.1 日本沼虾PPAF基因cDNA的扩增、分离与鉴定第30-31页
        3.2.2 日本沼虾PPAF基因的快速扩增、分离与鉴定第31页
    3.3 日本沼虾PPAF基因的获得与序列分析第31-33页
    3.4 PPAF基因氨基酸序列的功能分析第33-35页
    3.5 日本沼虾PPAF基因的mRNA表达分析第35-39页
4 讨论第39-42页
    4.1 日本沼虾PPAF基因的分子克隆与序列分析第39-40页
    4.2 日本沼虾PPAF基因的定量表达第40-42页
5 结论第42-43页
参考文献第43-52页
致谢第52页

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