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重构树干毕赤酵母合成菌株利用木糖生产富马酸

摘要第4-5页
abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-27页
    1.1 引言第10页
    1.2 富马酸概述第10-14页
        1.2.1 富马酸理化性质及主要用途第10-12页
        1.2.2 富马酸生产方法第12-14页
    1.3 合成生物学第14-19页
        1.3.1 合成生物学定义第14页
        1.3.2 合成生物学研究内容第14-19页
    1.4 合成生物学应用于富马酸生产研究进展第19-22页
        1.4.1 富马酸合成途径第19-20页
        1.4.2 富马酸合成菌株第20-22页
    1.5 木质纤维素生物质的利用第22-24页
        1.5.1 木质纤维素第22页
        1.5.2 木糖发酵菌株第22-23页
        1.5.3 树干毕赤酵母研究进展第23-24页
    1.6 本课题的研究意义和研究内容第24-27页
        1.6.1 研究意义第24-25页
        1.6.2 研究内容第25-27页
第二章 树干毕赤酵母初始合成菌株利用木糖生产富马酸第27-57页
    2.1 引言第27-28页
    2.2 实验材料第28-36页
        2.2.1 菌种、质粒及引物第28-31页
        2.2.2 主要试剂第31-34页
        2.2.3 主要仪器第34-35页
        2.2.4 培养基第35-36页
        2.2.5 主要溶液第36页
    2.3 实验方法第36-44页
        2.3.1 大肠杆菌感受态细胞制备及转化第36-37页
        2.3.2 大肠杆菌质粒DNA提取方法第37-38页
        2.3.3 树干毕赤酵母感受态细胞制备及转化第38页
        2.3.4 酵母基因组提取方法第38-39页
        2.3.5 重组质粒构建方法第39-41页
        2.3.6 总RNA提取第41-42页
        2.3.7 树干毕赤酵母培养方法第42页
        2.3.8 发酵参数测定第42-43页
        2.3.9 引物设计及基因合成第43-44页
    2.4 结果与讨论第44-55页
        2.4.1 尿嘧啶和亮氨酸营养缺陷型第44-49页
        2.4.2 树干毕赤酵母富马酸合成菌株构建方法第49-53页
        2.4.3 S.stipitis富马酸初始合成菌株木糖发酵动力学分析第53-55页
        2.4.4 S.stipitis初始合成菌株富马酸生产理性分析第55页
    2.5 小结第55-57页
第三章 理性优化下S. stipitis合成菌株木糖高效发酵富马酸第57-73页
    3.1 引言第57-58页
    3.2 实验材料第58-61页
        3.2.1 菌种、质粒及引物第58-61页
        3.2.2 试剂和仪器第61页
    3.3 实验方法第61-64页
        3.3.1 RT-PCR第61-63页
        3.3.2 酶活测定第63-64页
    3.4 结果与讨论第64-71页
        3.4.1 密码子优化提高富马酸还原途径活性第64-66页
        3.4.2 敲除自身富马酸酶减少富马酸消耗第66-69页
        3.4.3 异源表达高效富马酸转运蛋白增强转运能力第69-71页
    3.5 理性优化下木糖代谢富马酸合成菌株强化第71-72页
    3.6 小结第72-73页
第四章 结论与展望第73-75页
    4.1 主要结论第73页
    4.2 创新点第73-74页
    4.3 展望第74-75页
参考文献第75-82页
发表论文和参加科研情况说明第82-83页
附录第83-90页
致谢第90-91页

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