| 中文摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一部分：SD大鼠乳鼠耳蜗器官体外培养技术 | 第17-32页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 材料与方法 | 第18-23页 |
| (一) 实验动物 | 第18页 |
| (二) 试剂与实验仪器 | 第18-19页 |
| (三) 常用溶液的配置 | 第19-20页 |
| (四) 内耳解剖分离方法 | 第20-21页 |
| (五) 贴壁培养 | 第21页 |
| (六) 标本的固定 | 第21页 |
| (七) 毛细胞染色 | 第21-22页 |
| (九) 毛细胞、螺旋神经元和听神经纤维共染的观察及计数 | 第22-23页 |
| (十) 统计学方法 | 第23页 |
| 结果 | 第23-28页 |
| (一) SD乳鼠内耳器官的分离 | 第23-24页 |
| (二) 前庭器官毛细胞鬼笔环肽(phalloidine,TRITC标记)染色 | 第24-25页 |
| (三) 基底膜毛细胞鬼笔环肽(phalloidine)染色 | 第25页 |
| (四) 基底膜毛细胞计数 | 第25-26页 |
| (五) 基底膜毛细胞和螺旋神经元及听神经神经纤维共染 | 第26-27页 |
| (六) 螺旋神经元及听神经纤维计数 | 第27-28页 |
| 讨论 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-32页 |
| 第二部分：尼古丁对体外培养下SD乳鼠耳蜗基底膜的毒性作用 | 第32-55页 |
| 前言 | 第32-33页 |
| 材料与方法 | 第33-40页 |
| (一) 实验动物 | 第33页 |
| (二) 主要试剂实验仪器 | 第33-35页 |
| (三) 常用溶液配置方法 | 第35页 |
| (四) 耳蜗基底膜分离和体外培养基底膜药物浓度处理 | 第35页 |
| (五)免疫荧光染色方法(避光下进行） | 第35-36页 |
| (六) 基底膜毛细胞、螺旋神经元和听神经纤维的观察及计数 | 第36页 |
| (七) 毛细胞扫描电镜(scanning electron microscope,SEM) | 第36-38页 |
| (八) 基底膜毛细胞透射电镜(transmission electron microscope,TEM) | 第38-39页 |
| (九) 统计学方法 | 第39-40页 |
| 结果 | 第40-46页 |
| (一) 不同浓度(0-100ng/ml)尼古丁对耳锅组织的损伤作用 | 第40-43页 |
| (二) 尼古丁所导致的毛细胞超微结构的改变 | 第43-46页 |
| 讨论 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 第三部分：格尔德霉素衍生物17-DMAG对新生大鼠耳蜗尼古丁毒性保护作用 | 第55-79页 |
| 前言 | 第55-56页 |
| 材料与方法 | 第56-66页 |
| (一) 实验动物 | 第56页 |
| (二) 主要试剂及仪器 | 第56-58页 |
| (三) 常用试剂配制 | 第58-59页 |
| (四) 标本的固定和毛细胞染色 | 第59-60页 |
| (五) 免疫荧光染色方法(避光下进行) | 第60-61页 |
| (六) ELISA法检测HSP70在蛋白质水平的表达 | 第61-63页 |
| (七) 实时定量(Real-time RT-PCR)分析 | 第63-66页 |
| (八) 统计学方法 | 第66页 |
| 结果 | 第66-72页 |
| (一) 药物处理浓度的筛选 | 第66-67页 |
| (二) 17-DMAG诱导基底膜HSP70的表达 | 第67-68页 |
| (三) HSP70在体外培养的耳蜗器官的表达部位 | 第68-69页 |
| (四) 17-DMAG保护尼古丁对毛细胞的损伤 | 第69-70页 |
| (五) 毛细胞存活量计数 | 第70-72页 |
| 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 第四部分：钙依赖性钾通道BK在C57BL/6J小鼠耳蜗的年龄相关性表达及老年性聋的关系 | 第79-107页 |
| 前言 | 第79-81页 |
| 材料和方法 | 第81-93页 |
| (一) 实验动物 | 第81页 |
| (二) 主要试剂及仪器 | 第81-83页 |
| (三) 耳蜗标本的制备 | 第83-84页 |
| (四) 免疫荧光组织化学染色 | 第84-85页 |
| (五) 实时定量(Real-time RT-PCR) | 第85-88页 |
| (六) 蛋白免疫印迹杂交方法(western blotting) | 第88-92页 |
| (七) 统计学方法 | 第92-93页 |
| 结果 | 第93-96页 |
| (一) BK在C57BL/6J小鼠耳蜗内表达状况 | 第93页 |
| (二) BK在mRNA水平在不同年龄段C57BL/6J小鼠耳蜗中的表达状况 | 第93-94页 |
| (三) BK蛋白在不同年龄段C57BL/6J小鼠耳蜗中的表达 | 第94-96页 |
| 讨论 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-107页 |
| 博士阶段研究成果 | 第107-108页 |
| 英文缩写词及中英文对照 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
