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济宁青山羊生后乳腺中GHR、IGF-IR、INSR和PRLR的分布和表达的发育性变化

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-28页
   ·哺乳动物乳腺结构与功能第14-16页
   ·激素与乳腺的发育第16-25页
     ·生长激素的结构和功能及对乳腺发育的调控第16-17页
     ·生长激素受体的结构和功能及对乳腺发育的调控第17-19页
     ·胰岛素样生长因子-I的结构和功能及对乳腺发育的调控第19-20页
     ·胰岛素样生长因子-I受体的结构和功能及对乳腺发育的调控第20-21页
     ·胰岛素的功能及其对乳腺发育的调控第21-22页
     ·胰岛素受体的结构和功能及对乳腺发育的调控第22-23页
     ·催乳素结构和功能及对乳腺发育的调控第23-24页
     ·催乳素受体结构和功能及对乳腺发育的调控第24-25页
   ·济宁青山羊的品种特性第25-26页
   ·本研究的目的和意义第26-28页
2 材料与方法第28-42页
   ·试验材料第28-31页
     ·试验动物第28页
     ·试验地点第28页
     ·主要试剂和试验用品第28-31页
       ·试验主要试剂及来源第28-29页
       ·主要仪器第29页
       ·主要生物学数据库和相关生物学软件第29-30页
       ·相关的主要试剂及配制方法第30-31页
       ·相关的试验仪器设备第31页
   ·免疫组化法检测乳腺中GHR、IGF-IR、INSR和PRLR免疫阳性细胞的分布第31-33页
     ·切片标本制备第31-32页
     ·HE法染色第32页
     ·SABC免疫组织化学具体步骤:第32-33页
     ·对照试验第33页
     ·结果统计第33页
   ·qRT-PCR检测乳腺GHR mRNA、IGF-IR mRNA和INSR mRNA相对表达量第33-37页
     ·总RNA的提取第33-35页
     ·提取的RNA质量的鉴定第35页
     ·引物设计及qRT-PCR扩增第35-37页
       ·引物设计与合成第35-36页
       ·PCR反应体系和条件第36页
       ·qRT-PCR产物的分析第36-37页
       ·实时荧光定量PCR条件的优化第37页
       ·qRT-PCR法检测乳腺中GHR mRNA、IGF-IR mRNA和INSR mRNA的表达252.4.3.6 荧光定量数据的分析及处理第37页
   ·Western Blot法鉴定乳腺组织中GHR、IGF-IR和INSR蛋白片段的大小第37-42页
     ·试验前准备第37-38页
     ·蛋白质样品提取步骤第38页
     ·蛋白样品变性第38页
     ·电泳第38-39页
     ·半干式转膜第39-40页
     ·注意事项第40-42页
3 结果及分析第42-47页
   ·生后发育过程中乳腺组织形态学变化第42页
   ·生后发育过程中GHR、IGF-IR、INSR和PRLR乳腺中的分布规律第42-44页
     ·GHR阳性细胞在生后发育时期乳腺组织内的分布特点第42页
     ·IGF-IR阳性细胞在生后发育时期乳腺组织内的分布特点第42-43页
     ·INSR阳性细胞在生后发育时期乳腺组织内的分布特点第43页
     ·PRLR阳性细胞在生后发育时期乳腺组织内的分布特点第43-44页
   ·RT-PCR试验结果第44-46页
     ·总RNA及PCR产物的电泳检测结果第44页
     ·熔解曲线分析结果第44-45页
     ·生后发育时期乳腺内GHR mRNA、IGF-IR mRNA和INSR mRNA的表达第45-46页
   ·GAPDH、GHR、IGF-IR和INSR的Western Blot检测结果第46-47页
4 讨论第47-50页
   ·GHR对乳腺生后发育的影响第47页
   ·IGF-IR对乳腺生后发育的影响第47-48页
   ·INSR对乳腺生后发育的影响第48-49页
   ·PRLR对乳腺生后发育的影响第49-50页
5 结论第50-51页
6 参考文献第51-65页
7 附图第65-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表论文第73页

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