中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-28页 |
·哺乳动物乳腺结构与功能 | 第14-16页 |
·激素与乳腺的发育 | 第16-25页 |
·生长激素的结构和功能及对乳腺发育的调控 | 第16-17页 |
·生长激素受体的结构和功能及对乳腺发育的调控 | 第17-19页 |
·胰岛素样生长因子-I的结构和功能及对乳腺发育的调控 | 第19-20页 |
·胰岛素样生长因子-I受体的结构和功能及对乳腺发育的调控 | 第20-21页 |
·胰岛素的功能及其对乳腺发育的调控 | 第21-22页 |
·胰岛素受体的结构和功能及对乳腺发育的调控 | 第22-23页 |
·催乳素结构和功能及对乳腺发育的调控 | 第23-24页 |
·催乳素受体结构和功能及对乳腺发育的调控 | 第24-25页 |
·济宁青山羊的品种特性 | 第25-26页 |
·本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
2 材料与方法 | 第28-42页 |
·试验材料 | 第28-31页 |
·试验动物 | 第28页 |
·试验地点 | 第28页 |
·主要试剂和试验用品 | 第28-31页 |
·试验主要试剂及来源 | 第28-29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
·主要生物学数据库和相关生物学软件 | 第29-30页 |
·相关的主要试剂及配制方法 | 第30-31页 |
·相关的试验仪器设备 | 第31页 |
·免疫组化法检测乳腺中GHR、IGF-IR、INSR和PRLR免疫阳性细胞的分布 | 第31-33页 |
·切片标本制备 | 第31-32页 |
·HE法染色 | 第32页 |
·SABC免疫组织化学具体步骤: | 第32-33页 |
·对照试验 | 第33页 |
·结果统计 | 第33页 |
·qRT-PCR检测乳腺GHR mRNA、IGF-IR mRNA和INSR mRNA相对表达量 | 第33-37页 |
·总RNA的提取 | 第33-35页 |
·提取的RNA质量的鉴定 | 第35页 |
·引物设计及qRT-PCR扩增 | 第35-37页 |
·引物设计与合成 | 第35-36页 |
·PCR反应体系和条件 | 第36页 |
·qRT-PCR产物的分析 | 第36-37页 |
·实时荧光定量PCR条件的优化 | 第37页 |
·qRT-PCR法检测乳腺中GHR mRNA、IGF-IR mRNA和INSR mRNA的表达252.4.3.6 荧光定量数据的分析及处理 | 第37页 |
·Western Blot法鉴定乳腺组织中GHR、IGF-IR和INSR蛋白片段的大小 | 第37-42页 |
·试验前准备 | 第37-38页 |
·蛋白质样品提取步骤 | 第38页 |
·蛋白样品变性 | 第38页 |
·电泳 | 第38-39页 |
·半干式转膜 | 第39-40页 |
·注意事项 | 第40-42页 |
3 结果及分析 | 第42-47页 |
·生后发育过程中乳腺组织形态学变化 | 第42页 |
·生后发育过程中GHR、IGF-IR、INSR和PRLR乳腺中的分布规律 | 第42-44页 |
·GHR阳性细胞在生后发育时期乳腺组织内的分布特点 | 第42页 |
·IGF-IR阳性细胞在生后发育时期乳腺组织内的分布特点 | 第42-43页 |
·INSR阳性细胞在生后发育时期乳腺组织内的分布特点 | 第43页 |
·PRLR阳性细胞在生后发育时期乳腺组织内的分布特点 | 第43-44页 |
·RT-PCR试验结果 | 第44-46页 |
·总RNA及PCR产物的电泳检测结果 | 第44页 |
·熔解曲线分析结果 | 第44-45页 |
·生后发育时期乳腺内GHR mRNA、IGF-IR mRNA和INSR mRNA的表达 | 第45-46页 |
·GAPDH、GHR、IGF-IR和INSR的Western Blot检测结果 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
·GHR对乳腺生后发育的影响 | 第47页 |
·IGF-IR对乳腺生后发育的影响 | 第47-48页 |
·INSR对乳腺生后发育的影响 | 第48-49页 |
·PRLR对乳腺生后发育的影响 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
6 参考文献 | 第51-65页 |
7 附图 | 第65-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表论文 | 第73页 |