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生物可降解siRNA-PLGA/CSO共轭物胶束对SKOV3细胞STAT3基因沉默作用的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
缩略词第12-13页
第一章 绪论第13-20页
   ·研究背景第13-17页
   ·立题依据第17-20页
第二章 基于二硫键的siRNA基因载体的构建与性质研究第20-37页
   ·仪器与材料第21-22页
     ·主要仪器第21页
     ·主要材料第21-22页
   ·方法和操作第22-25页
     ·合成步骤第22-24页
       ·PLGA-NHS酯的合成第22-23页
       ·PLGA-PDPH的合成第23页
       ·siRNA-PLGA共轭物的合成第23-24页
     ·siRNA-PLGA胶束临界胶束浓度(CMC)的测定第24页
     ·siRNA-PLGA胶束与壳寡糖复合物胶束的制备第24-25页
     ·粒径和Zeta电位的测定第25页
     ·共轭物胶束的形态表征第25页
     ·RNase稳定性试验第25页
   ·结果和讨论第25-36页
     ·PLGA-PDPH合成产物表征第25-27页
     ·PLGA-PDPH嫁接率的测定第27-28页
     ·siRNA-PLGA嫁接率的测定第28-29页
     ·siRNA-PLGA胶束临界胶束浓度(CMC)的测定第29-31页
     ·粒径和Zeta电位的测定第31-34页
     ·共轭物胶束的形态表征第34-35页
     ·RNase稳定性试验第35-36页
   ·本章小结第36-37页
第三章 SKOV3细胞对共轭物胶束的摄取及体外评价第37-62页
   ·仪器与材料第38-40页
     ·主要仪器第38页
     ·主要材料第38-40页
     ·细胞株第40页
   ·溶液的配制第40-41页
   ·方法和操作第41-51页
     ·SKOV3细胞的传代培养第41-42页
       ·细胞复苏第41页
       ·细胞传代第41页
       ·细胞冻存第41-42页
       ·细胞计数第42页
     ·SKOV3细胞的转染第42-43页
       ·lipofectamine~(TM)介导的siRNA对SKOV3细胞的转染第42页
       ·siRNA-PLGA/CSO胶束对SKOV3细胞的转染第42-43页
       ·siRNA/CSO结合物对SKOV3细胞的转染第43页
     ·细胞摄取实验第43-44页
     ·荧光实时定量PCR检测STAT3 m RNA的表达第44-47页
       ·实验原理第44页
       ·SKOV3中总RNA的提取第44-45页
       ·反转录合成c DNA第45-46页
       ·Real-Time法检测STAT3基因m RNA表达第46页
       ·数据采集及统计处理第46-47页
     ·Western Blot检测STAT3蛋白表达第47-49页
       ·SKOV3细胞中总蛋白提取第47页
       ·BCA法测定蛋白浓度第47-48页
       ·Western Blot法检测STAT3蛋白的表达第48-49页
     ·细胞增殖实验第49-50页
       ·检测原理第49页
       ·CCK-8 具体操作步骤第49-50页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡第50-51页
       ·细胞凋亡检测原理第50页
       ·细胞凋亡具体操作步骤第50-51页
   ·结果与讨论第51-60页
     ·细胞摄取实验第51-54页
     ·荧光定量PCR检测STAT3 m RNA的表达第54-57页
       ·扩增产物特异性检测第54页
       ·基因扩增效率检测第54-55页
       ·STAT3基因有效序列筛选第55-56页
       ·胶束对STAT3 m RNA表达的影响第56-57页
     ·Western Blot检测STAT3蛋白表达第57页
     ·细胞增殖实验第57-59页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡第59-60页
   ·本章小结第60-62页
全文总结第62-64页
参考文献第64-70页
综述第70-86页
 参考文献第81-86页
致谢第86-87页
攻读学位期间发表的学术论文第87页

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