摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-20页 |
·研究背景 | 第13-17页 |
·立题依据 | 第17-20页 |
第二章 基于二硫键的siRNA基因载体的构建与性质研究 | 第20-37页 |
·仪器与材料 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·主要材料 | 第21-22页 |
·方法和操作 | 第22-25页 |
·合成步骤 | 第22-24页 |
·PLGA-NHS酯的合成 | 第22-23页 |
·PLGA-PDPH的合成 | 第23页 |
·siRNA-PLGA共轭物的合成 | 第23-24页 |
·siRNA-PLGA胶束临界胶束浓度(CMC)的测定 | 第24页 |
·siRNA-PLGA胶束与壳寡糖复合物胶束的制备 | 第24-25页 |
·粒径和Zeta电位的测定 | 第25页 |
·共轭物胶束的形态表征 | 第25页 |
·RNase稳定性试验 | 第25页 |
·结果和讨论 | 第25-36页 |
·PLGA-PDPH合成产物表征 | 第25-27页 |
·PLGA-PDPH嫁接率的测定 | 第27-28页 |
·siRNA-PLGA嫁接率的测定 | 第28-29页 |
·siRNA-PLGA胶束临界胶束浓度(CMC)的测定 | 第29-31页 |
·粒径和Zeta电位的测定 | 第31-34页 |
·共轭物胶束的形态表征 | 第34-35页 |
·RNase稳定性试验 | 第35-36页 |
·本章小结 | 第36-37页 |
第三章 SKOV3细胞对共轭物胶束的摄取及体外评价 | 第37-62页 |
·仪器与材料 | 第38-40页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·主要材料 | 第38-40页 |
·细胞株 | 第40页 |
·溶液的配制 | 第40-41页 |
·方法和操作 | 第41-51页 |
·SKOV3细胞的传代培养 | 第41-42页 |
·细胞复苏 | 第41页 |
·细胞传代 | 第41页 |
·细胞冻存 | 第41-42页 |
·细胞计数 | 第42页 |
·SKOV3细胞的转染 | 第42-43页 |
·lipofectamine~(TM)介导的siRNA对SKOV3细胞的转染 | 第42页 |
·siRNA-PLGA/CSO胶束对SKOV3细胞的转染 | 第42-43页 |
·siRNA/CSO结合物对SKOV3细胞的转染 | 第43页 |
·细胞摄取实验 | 第43-44页 |
·荧光实时定量PCR检测STAT3 m RNA的表达 | 第44-47页 |
·实验原理 | 第44页 |
·SKOV3中总RNA的提取 | 第44-45页 |
·反转录合成c DNA | 第45-46页 |
·Real-Time法检测STAT3基因m RNA表达 | 第46页 |
·数据采集及统计处理 | 第46-47页 |
·Western Blot检测STAT3蛋白表达 | 第47-49页 |
·SKOV3细胞中总蛋白提取 | 第47页 |
·BCA法测定蛋白浓度 | 第47-48页 |
·Western Blot法检测STAT3蛋白的表达 | 第48-49页 |
·细胞增殖实验 | 第49-50页 |
·检测原理 | 第49页 |
·CCK-8 具体操作步骤 | 第49-50页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第50-51页 |
·细胞凋亡检测原理 | 第50页 |
·细胞凋亡具体操作步骤 | 第50-51页 |
·结果与讨论 | 第51-60页 |
·细胞摄取实验 | 第51-54页 |
·荧光定量PCR检测STAT3 m RNA的表达 | 第54-57页 |
·扩增产物特异性检测 | 第54页 |
·基因扩增效率检测 | 第54-55页 |
·STAT3基因有效序列筛选 | 第55-56页 |
·胶束对STAT3 m RNA表达的影响 | 第56-57页 |
·Western Blot检测STAT3蛋白表达 | 第57页 |
·细胞增殖实验 | 第57-59页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第59-60页 |
·本章小结 | 第60-62页 |
全文总结 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
综述 | 第70-86页 |
参考文献 | 第81-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第87页 |