| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·脂肪酶的概述 | 第13-17页 |
| ·脂肪酶的定义 | 第13页 |
| ·脂肪酶的分类 | 第13-14页 |
| ·脂肪酶的性质特点 | 第14-15页 |
| ·脂肪酶的结构特征 | 第15页 |
| ·脂肪酶的来源 | 第15-16页 |
| ·海洋脂肪酶的来源 | 第16-17页 |
| ·脂肪酶的异源表达 | 第17-19页 |
| ·原核表达系统 | 第18-19页 |
| ·真核表达系统 | 第19页 |
| ·脂肪酶的应用 | 第19-21页 |
| ·脂肪酶在食品加工方面的应用 | 第19页 |
| ·脂肪酶在手性药物合成方面的应用 | 第19-20页 |
| ·脂肪酶在环境治理方面的应用 | 第20页 |
| ·脂肪酶在合成生物柴油方面的应用 | 第20-21页 |
| ·脂肪酶的固定化方法 | 第21-22页 |
| ·吸附法 | 第21页 |
| ·包埋法 | 第21页 |
| ·共价结合法 | 第21页 |
| ·交联法 | 第21-22页 |
| ·本课题研究的意义和主要内容 | 第22-23页 |
| 第二章 重组Bohai sea-9145脂肪酶工程菌发酵表达条件优化 | 第23-38页 |
| ·材料与仪器 | 第23-24页 |
| ·菌株来源 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-27页 |
| ·脂肪酶测活方法 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌重组基因工程菌的摇瓶培养方法 | 第25页 |
| ·大肠杆菌基因工程菌发酵产酶的单因素试验 | 第25-26页 |
| ·响应面法优化发酵条件 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-37页 |
| ·pNP标准曲线绘制 | 第27页 |
| ·脂肪酶酶活力计算公式 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌基因工程菌发酵产酶的单因素试验结果 | 第28-33页 |
| ·响应面法优化产酶条件 | 第33-37页 |
| ·结论 | 第37-38页 |
| 第三章 重组Bohai sea-9145脂肪酶工程菌超声破碎条件优化及酶的复性 | 第38-48页 |
| ·试验仪器与材料 | 第38-39页 |
| ·试验仪器 | 第38页 |
| ·试验材料 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| ·蛋白分析方法 | 第39页 |
| ·溶液的配制 | 第39-40页 |
| ·重组菌体的制备及细胞破碎过程 | 第40页 |
| ·细胞破碎各因素的优化 | 第40-41页 |
| ·包含体的洗涤及溶解 | 第41页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第41页 |
| ·试验结果 | 第41-46页 |
| ·蛋白标准曲线的绘制 | 第41-42页 |
| ·细胞破碎单因素条件优化结果 | 第42-44页 |
| ·包含体洗涤溶解结果 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白复性结果 | 第45-46页 |
| ·结论 | 第46-48页 |
| 第四章 Bohai sea-9145重组脂肪酶固定化方法研究 | 第48-61页 |
| ·主要仪器与材料 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48-49页 |
| ·试验方法 | 第49页 |
| ·固化载体-交联酶聚集体的制备 | 第49页 |
| ·壳聚糖交联-吸附法 | 第49页 |
| ·固定化酶活及酶活力回收率的计算 | 第49页 |
| ·试验结果 | 第49-60页 |
| ·固载化-交联酶聚集体制备的单因素条件 | 第49-55页 |
| ·壳聚糖交联-吸附法的单因素条件 | 第55-59页 |
| ·两种固定化方法的比较 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| 第五章 固定化脂肪酶的稳定性 | 第61-68页 |
| ·主要仪器与材料 | 第61页 |
| ·试验仪器 | 第61页 |
| ·试验试剂 | 第61页 |
| ·试验方法 | 第61-62页 |
| ·溶液配制 | 第61页 |
| ·固定化酶及游离酶的最适作用pH | 第61页 |
| ·固定化酶及游离酶的pH稳定性 | 第61-62页 |
| ·固定化酶及游离酶的最适作用温度 | 第62页 |
| ·固定化酶及游离酶的温度稳定性 | 第62页 |
| ·金属离子对固定化酶及游离酶稳定性的作用 | 第62页 |
| ·固定化酶及游离酶的储藏稳定性 | 第62页 |
| ·固定化酶的重复使用性 | 第62页 |
| ·试验结果 | 第62-67页 |
| ·固定化酶及游离酶的最适作用pH | 第62-63页 |
| ·固定化酶及游离酶的pH稳定性 | 第63页 |
| ·固定化酶及游离酶的最适作用温度 | 第63-64页 |
| ·固定化酶及游离酶的温度稳定性 | 第64-65页 |
| ·金属离子对固定化酶及游离酶稳定性的作用 | 第65页 |
| ·固定化酶及游离酶的贮藏稳定性 | 第65-66页 |
| ·固定化酶的重复使用性 | 第66-67页 |
| ·结论 | 第67-68页 |
| 第六章 结论与展望 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68-69页 |
| ·展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
