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利用VIGS技术在番茄中验证与萜类等代谢调控相关的柑橘同源基因

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略词表第10-11页
1 前言第11-23页
   ·课题的提出第11-12页
   ·前人研究进展第12-22页
     ·植物类胡萝卜素的生物活性及代谢途径第12-13页
     ·植物类黄酮的合成与代谢第13-15页
     ·植物挥发性物质的代谢第15-16页
     ·植物相关转录因子的作用机理第16-17页
     ·植物次生代谢相关转录因子第17-19页
     ·调控番茄果实品质的相关转录因子第19-20页
     ·病毒诱导的基因沉默及其应用进展第20-22页
   ·本课题内容、技术路线和科学意义第22-23页
2 材料和方法第23-32页
   ·实验材料(试剂与仪器)第23-24页
   ·TRV干涉载体构建第24-27页
     ·转录因子筛选及引物设计第24-25页
     ·PCR扩增目的基因第25-26页
     ·PCR产物回收并与pMD18-T载连接:第26页
     ·大肠杆菌热激转化及阳性质粒提取第26-27页
     ·双酶切与T4连接第27页
   ·农杆菌侵染第27-28页
   ·RNA提取、反转录及qRT-PCR第28-29页
     ·番茄叶片及果实RNA提取及反转录合成cDNA第28页
     ·病毒检测及各侵染植株对应目的基因qRT-PCR第28-29页
   ·代谢组学分析第29-31页
     ·类胡萝卜素提取及HPLC分析第29-30页
     ·类黄酮提取及LC-MS分析第30页
     ·挥发性物质提取及GC-MS分析第30-31页
   ·数据分析方法第31-32页
3 结果与分析第32-50页
   ·TRV干涉载体构建第32-36页
     ·转录因子选择与扩增第32-33页
     ·载体构建第33-36页
   ·病毒侵染第36-39页
     ·TRV侵染番茄子叶和果实第36页
     ·侵染后目的基因qRT-PCR及病毒检测第36-39页
   ·代谢组学分析第39-50页
     ·叶片和果实中类胡萝卜素含量比较第39-43页
     ·叶片和果实中类黄酮含量比较第43-45页
     ·果实中挥发性物质含量比较第45-50页
4 讨论第50-55页
   ·萜类及类黄酮等代谢网络探讨第50-53页
   ·与所研究转录因子互作的相关基因第53页
   ·利用LC-MS检测果实类黄酮等物质变化中未知物探讨第53-54页
   ·基于本研究的后续工作第54-55页
参考文献第55-64页
致谢第64页

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