摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 病毒感染及细胞抗病毒机制研究进展 | 第13-41页 |
·病毒感染的机制 | 第13-17页 |
·病毒和细胞死亡程序 | 第13-14页 |
·干扰素和细胞死亡程序 | 第14页 |
·细胞死亡的病毒抑制 | 第14-17页 |
·FMDV的感染机制 | 第17-33页 |
·FMDV病毒蛋白 | 第18-19页 |
·与FMDV感染相关的先天免疫细胞 | 第19-21页 |
·FMDV对先天免疫体统的影响 | 第21-24页 |
·FMDV的相关受体 | 第24-33页 |
·与抗病毒反应相关的信号通路 | 第33-41页 |
·病毒介导的PI3K-AKT信号对细胞功能的影响 | 第33-35页 |
·PI3K-Akt信号通路与抗病毒反应 | 第35-38页 |
·RIG-I样受体的抗病毒反应 | 第38-41页 |
第二章 马源和牛源整合素受体的差异研究 | 第41-60页 |
·材料与方法 | 第41-42页 |
·材料 | 第41页 |
·试剂 | 第41-42页 |
·主要仪器与耗材 | 第42页 |
·方法 | 第42-44页 |
·马、牛上皮细胞中αv、β亚基的表达 | 第42-43页 |
·整合素αv、β亚基的基因及蛋白同源性对比 | 第43页 |
·马和牛αv、β3、β6基因真核表达载体的构建 | 第43页 |
·细胞转染 | 第43-44页 |
·结果 | 第44-56页 |
·αv和β亚基在上皮细胞中的表达 | 第44-50页 |
·FMDV不能在马上皮细胞中中完成复制过程 | 第50页 |
·FMDV在TYECs中的凋亡 | 第50-51页 |
·马、牛整合素亚基αv、β3和β6应用效率对比 | 第51-53页 |
·αvβ载体在SW480细胞中的瞬时表达 | 第53-54页 |
·载体在COS-1细胞中的瞬时表达 | 第54-56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第三章 基因表达谱检测差异表达基因 | 第60-71页 |
·材料与方法 | 第60-61页 |
·材料 | 第60页 |
·试剂 | 第60-61页 |
·主要仪器与耗材 | 第61页 |
·方法 | 第61-62页 |
·马、牛上皮细胞培养 | 第61页 |
·表达谱芯片制作及数据分析 | 第61页 |
·差异基因的表达验证 | 第61-62页 |
·结果 | 第62-68页 |
·BTYECs和ETYECs中的基因表达趋势不同 | 第62页 |
·BTYECs和ETYECs中的差异基因比对结果 | 第62-66页 |
·PI3K-Akt通路及Toll样受体通路与马对抗FMDV的感染相关 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
·小结 | 第70-71页 |
第四章 Toll样受体信号通路与PI3K-Akt信号通路验证 | 第71-91页 |
·材料与方法 | 第71-72页 |
·材料 | 第71页 |
·试剂 | 第71-72页 |
·主要仪器与耗材 | 第72页 |
·方法 | 第72-74页 |
·过表达载体构建 | 第72-73页 |
·牛甲状腺上皮细胞TLR3,MyD88,IRF-3,IRF-7基因的干扰 | 第73页 |
·Akt-X处理牛甲状腺上皮细胞 | 第73页 |
·si-MyD88及Akt-X联合处理牛状腺上皮细胞 | 第73页 |
·RNA提取及cDNA合成 | 第73页 |
·牛甲状腺上皮细胞中相关基因的表达 | 第73页 |
·免疫印迹(western blotting)法检测蛋白的表达 | 第73页 |
·FMDV的复制情况检测 | 第73-74页 |
·细胞凋亡检测 | 第74页 |
·结果 | 第74-85页 |
·pIRES2-EGFP-e-TLR3,pIRES2-EGFP-b-MyD88,pIRES2-EGFP-b-IRF7载体的功能验证结果 | 第74-75页 |
·Si-e-TLR3,si-b-MyD88,si-b-IRF7的干扰功能验证结果 | 第75-76页 |
·Si-e-TLR3,si-b-MyD88, si-b-IRF7最佳转染剂量的确定 | 第76页 |
·TLR3,MyD88以及IRF7对PI3K-Akt和Toll样受体信号通路的影响 | 第76-82页 |
·Akt的抑制影响PI3K-Akt通路与Toll样受体通路下游基因的表达 | 第82-83页 |
·PI3K-Akt受体通路和TOLL-like receptor pathway协同参与马TYECs抗病毒过程 | 第83-84页 |
·ASM,si-Myd88,Akt-x对凋亡的影响 | 第84-85页 |
·讨论 | 第85-90页 |
·小结 | 第90-91页 |
结论 | 第91-93页 |
创新之处和进一步研究的课题 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-115页 |
缩略词 | 第115-118页 |
致谢 | 第118-119页 |
作者简介 | 第119页 |