| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 英文缩写说明 | 第11-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-27页 |
| ·丙型肝炎病毒简介 | 第15-18页 |
| ·丙型肝炎流行病学 | 第15-16页 |
| ·丙型肝炎病毒结构及生活史 | 第16-18页 |
| ·丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶 | 第18-22页 |
| ·丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶结构及功能 | 第18-20页 |
| ·丙肝病毒NS3/4A蛋白酶抑制剂 | 第20-22页 |
| ·NS3/4A蛋白酶抑制剂筛选模型 | 第22-25页 |
| ·荧光共振能量转移法 | 第22-23页 |
| ·活体荧光成像法 | 第23页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第23-24页 |
| ·底物选择 | 第24-25页 |
| ·立题依据 | 第25-27页 |
| ·目的和意义 | 第25页 |
| ·实验技术路线 | 第25-27页 |
| 第2章 构建NS3/4A-EGFP/5AB筛选模型 | 第27-41页 |
| ·实验材料和仪器 | 第27-29页 |
| ·菌种、载体及引物 | 第27-28页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第28页 |
| ·培养基和试剂 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·提取质粒DNA | 第29页 |
| ·普通PCR反应体系和条件 | 第29-30页 |
| ·Overlap PCR反应体系和条件 | 第30页 |
| ·胶回收DNA片段 | 第30-31页 |
| ·载体双酶切 | 第31页 |
| ·DNA片段与载体连接反应体系及条件 | 第31页 |
| ·制备感受态细胞 | 第31-32页 |
| ·转化感受态细胞 | 第32页 |
| ·菌液PCR | 第32页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第33-34页 |
| ·实验结果 | 第34-39页 |
| ·克隆EGFP/5AB基因 | 第34-35页 |
| ·pET28a-EGFP/5AB表达载体构建 | 第35-36页 |
| ·诱导表达EGFP/5AB蛋白 | 第36-37页 |
| ·纯化EGFP/5AB | 第37-38页 |
| ·筛选模型线性测试 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-41页 |
| 第3章 植物组织活性化合物分离 | 第41-73页 |
| ·材料和仪器 | 第41-42页 |
| ·植物组织 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·仪器 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·植物组织成分萃取 | 第42页 |
| ·TLC板展层分析 | 第42-43页 |
| ·HPLC分析 | 第43页 |
| ·正相中低压液相分离纯化 | 第43-44页 |
| ·反相中低压液相分离纯化 | 第44页 |
| ·制备型HPLC分离纯化 | 第44-45页 |
| ·Sephadex LH-20凝胶纯化 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-70页 |
| ·候选植物初筛 | 第45-46页 |
| ·香榧树枝叶活性成分分离 | 第46-70页 |
| ·本章小结 | 第70-73页 |
| 第4章 化合物的生物活性初步评价 | 第73-79页 |
| ·材料和仪器 | 第73-74页 |
| ·筛选模型 | 第73页 |
| ·试剂 | 第73-74页 |
| ·仪器 | 第74页 |
| ·实验方法 | 第74-75页 |
| ·NS3/4A模型 | 第74页 |
| ·NS3/4A-EGFP/5AB模型 | 第74-75页 |
| ·活性样品IC_(50)测定 | 第75页 |
| ·实验结果 | 第75-77页 |
| ·NS3/4A蛋白酶抑制活性化合物筛选 | 第75-77页 |
| ·活性化合物评价 | 第77页 |
| ·本章小结 | 第77-79页 |
| 全文总结 | 第79-81页 |
| 对进一步研究工作的设想和建议 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 攻读学位期间发表的论文、专利申请 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 附录 | 第91-106页 |