| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1. 前言 | 第9-19页 |
| ·杧果概述 | 第9页 |
| ·果实着色研究机理的研究现状 | 第9-15页 |
| ·色素及相关酶与果实着色的关系 | 第9-13页 |
| ·影响果实着色的因子 | 第13-14页 |
| ·果实着色的分子生物学机制 | 第14-15页 |
| ·二氢黄酮醇4-还原酶(DFR)研究进展 | 第15-16页 |
| ·DFR基因的结构和作用机制 | 第15页 |
| ·DFR基因的分离 | 第15页 |
| ·DFR基因的底物特异性 | 第15-16页 |
| ·DFR基因的时空表达特性 | 第16页 |
| ·类黄酮-3-O-葡萄基转移酶(UFGT或3G乃的研究进展 | 第16-17页 |
| ·UFGT基因的结构和作用机制 | 第16-17页 |
| ·UFGT基因的分离 | 第17页 |
| ·UFGT基因的时空表达特异性 | 第17页 |
| ·本研究目的意义及设计思路 | 第17-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第17-18页 |
| ·技术路线 | 第18-19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-32页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·材料及处理 | 第19页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第19-20页 |
| ·菌种及克隆载体 | 第20页 |
| ·酶、生化试剂 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-26页 |
| ·RNA的提取、纯化及质量检测 | 第20-22页 |
| ·杧果叶片基因组DNA的提取 | 第22-24页 |
| ·Rt-PCR产物的扩增 | 第24-25页 |
| ·PCR产物的回收、纯化、连接、转化和测序 | 第25-26页 |
| ·RACE实验方法 | 第26-30页 |
| ·总RNA提取及质量检测 | 第26页 |
| ·引物设计 | 第26-27页 |
| ·3’RACE和5’RACE第一链cDNA的合成 | 第27-29页 |
| ·RACE-PCR反应体系及程序 | 第29-30页 |
| ·全长cDNA扩增及检测 | 第30页 |
| ·杧果生理指标的测定 | 第30-31页 |
| ·叶绿体色素的测定 | 第30-31页 |
| ·花色素苷的测定 | 第31页 |
| ·生物信息学分析工具 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-51页 |
| ·杧果果皮总RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·杧果叶片基因组的DNA提取 | 第33页 |
| ·克隆DFR有关的实验结果 | 第33-35页 |
| ·DFR基因目的片段的获得 | 第33-34页 |
| ·DFR基因3'RACE和5'RACE的克隆 | 第34页 |
| ·DFR基因cDNA与基因组DNA的获得 | 第34-35页 |
| ·克隆UFGT基因 | 第35-37页 |
| ·UFGT基因目的片段的获得 | 第35-36页 |
| ·UFGT基因cDNA与基因组DNA的获得 | 第36-37页 |
| ·杧果生理指标的测定结果 | 第37-38页 |
| ·DFR基因生物学信息分析 | 第38-41页 |
| ·杧果果皮DFR基因的基本信息预测 | 第38-39页 |
| ·DFR氨基酸序列同源比对 | 第39-40页 |
| ·DFR基因系统进化树分析 | 第40-41页 |
| ·UFGT基因的生物信息学分析 | 第41-45页 |
| ·UFGT基因的基本信息预测 | 第41-42页 |
| ·UFGT氨基酸序列同源比对 | 第42-44页 |
| ·UFGT基因系统进化树分析 | 第44-45页 |
| ·蛋白功能预测 | 第45-48页 |
| ·贵妃杧果DFR和UFGT基因的实时定量表达分析 | 第48-49页 |
| ·荧光定量PCR中各基因间扩增效率的分析 | 第48页 |
| ·UFGT基因在5种杧果叶片中的相对表达量 | 第48-49页 |
| ·DFR基因在杧果果皮中的表达 | 第49页 |
| ·贵妃杧果UFGT植物表达载体构建 | 第49-51页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第49-50页 |
| ·结果鉴定 | 第50-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-54页 |
| ·杧果DFR和UFGT基因全长的获取 | 第51页 |
| ·DFR基因的表达分析 | 第51-52页 |
| ·UFGT基因的表达分析 | 第52-54页 |
| 5. 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 缩略词表(Abbreviations) | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |