目录 | 第1-8页 |
缩略词表 | 第8-10页 |
摘要 | 第10-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-27页 |
1 前言 | 第13-14页 |
2 猪瘟及猪瘟病毒概述 | 第14-17页 |
·猪瘟概述 | 第14页 |
·猪瘟病毒概述 | 第14-16页 |
·猪瘟病毒的基因分型 | 第16-17页 |
·猪瘟病毒的理化性质 | 第17页 |
3 CSFV 致病机理 | 第17-19页 |
4 猪瘟病毒在体外细胞中的增殖 | 第19-20页 |
·CSFV 的体外增殖 | 第19-20页 |
·CSFV 在 PK-15 细胞上的增殖 | 第20页 |
5 猪瘟检测方法 | 第20-27页 |
·琼脂扩散试验(AGP) | 第20-21页 |
·病毒分离鉴定 | 第21页 |
·荧光抗体试验(FAT) | 第21页 |
·免疫酶染色实验(免疫组化) | 第21页 |
·免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA) | 第21-22页 |
·间接血凝试验( IHA) | 第22页 |
·兔体中和试验 | 第22页 |
·酶联免疫吸附试验( ELISA) | 第22-23页 |
·免疫胶体金技术( IGSS) | 第23页 |
·分子生物学方法诊断技术 | 第23-27页 |
第二章 猪瘟病毒的鉴定 | 第27-39页 |
1 材料 | 第27-29页 |
·猪瘟病毒及细胞株 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·主要试剂配置 | 第28页 |
·主要仪器设备 | 第28-29页 |
2 方法 | 第29-31页 |
·引物的设计与合成 | 第29-30页 |
·猪瘟病毒的培养 | 第30页 |
·猪瘟病毒 RNA 的提取 | 第30页 |
·反转录 | 第30页 |
·目的基因的扩增 | 第30-31页 |
·测序及序列比对分析 | 第31页 |
3 结果与分析 | 第31-36页 |
·基因片段 PCR 扩增结果 | 第31-33页 |
·扩增基因片段的序列分析结果 | 第33-36页 |
4 讨论 | 第36-37页 |
5 小结 | 第37-39页 |
第三章 猪瘟病毒高感染性 PK-15 细胞株的筛选 | 第39-53页 |
1 材料 | 第39-40页 |
·CSFV 与细胞株 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·主要仪器设备 | 第39-40页 |
·主要试剂配置 | 第40页 |
2 方法 | 第40-43页 |
·IPMA 检测方法的建立 | 第40-41页 |
·饲养细胞的制备 | 第41页 |
·PK-15 细胞的克隆 | 第41-42页 |
·CSFV TCID50测定 | 第42页 |
·PK15 细胞克隆株的稳定性生长情况 | 第42页 |
·IPMA 法检测病毒增殖情况 | 第42页 |
·荧光定量 PCR 法检测病毒增殖情况 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-51页 |
·IPMA 检测方法的建立 | 第43-44页 |
·PK-15 单克隆细胞的筛选结果 | 第44页 |
·单克隆细胞 TCID50检测结果 | 第44-47页 |
·PK-15 单克隆细胞株稳定性生长情况 | 第47-48页 |
·IPMA 法检测病毒增殖结果 | 第48-50页 |
·荧光定量 PCR 法检测病毒增殖结果 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51页 |
5 小结 | 第51-53页 |
全文结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第63-65页 |
致谢 | 第65页 |