中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
前言 | 第9-13页 |
材料和方法 | 第13-34页 |
1. 实验材料与试剂 | 第13-16页 |
·细胞系 | 第13页 |
·仪器设备 | 第13-14页 |
·试剂来源 | 第14-16页 |
2. 研究方法 | 第16-34页 |
·细胞培养 | 第16页 |
·β‐NGF及其他药物配制 | 第16-17页 |
·荧光张力探针的构建方法、原理及评价方法 | 第17页 |
·质粒扩增与提取、纯化 | 第17-20页 |
·总RNA的提取 | 第20-22页 |
·Real‐time RT‐PCR | 第22-24页 |
·蛋白质的抽提及浓度测定 | 第24-26页 |
·免疫印迹(Western blot) | 第26-31页 |
·细胞免疫荧光实验 | 第31-32页 |
·质粒过表达 | 第32-33页 |
·RNAi构建与转染 | 第33页 |
·细胞共转染 | 第33-34页 |
·数据处理 | 第34页 |
结果 | 第34-41页 |
1.一种基于FRET的肌动蛋白荧光张力检测探针可被用于实时检测胞内张力 | 第34-35页 |
2. NGF和瘢痕抑制因子通过改变细胞结构张力调节轴突生长及再生 | 第35-36页 |
3. Talin通过胞内结构张力促进NGF诱导的PC12细胞轴突生长过程 | 第36-37页 |
4.在NGF刺激的PC12细胞,E‐cadherin通过减弱胞内张力抑制轴突生长 | 第37-38页 |
5. Talin可逆转瘢痕抑制因子诱导的细胞结构张力下调 | 第38页 |
6. E‐cadherin参与胶质瘢痕抑制因子诱导的结构张力减少 | 第38-39页 |
7. NGF诱导的PC12细胞生长过程中,Talin调节E‐cadherin的转录水平 | 第39页 |
8.细胞内结构张力调节轴突生长再生的分子机制示意图 | 第39-41页 |
实验数据及英文注释 | 第41-60页 |
讨论 | 第60-64页 |
小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录(一)综述 | 第71-87页 |
参考文献 | 第82-87页 |
附录(二) 缩略词表 | 第87-89页 |
附录(三) 发表文章 | 第89-90页 |
附录(四) 致谢 | 第90页 |