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可穿膜重组TAT-tCNTF的透膜机制及对Aβ损伤小鼠的作用机制研究

缩略词表第1-9页
中文摘要第9-12页
英文摘要第12-15页
前言第15-17页
第一章 TAT-tCNTF 透膜机制的研究第17-37页
 一、 实验材料第17-19页
  1、 实验细胞第17页
  2、 主要仪器第17-18页
  3、 主要试剂和主要溶液第18-19页
 二、 实验方法第19-24页
  1、 细胞培养第19-20页
  2、 体外 BBB 细胞模型的建立第20页
  3、 跨内膜电阻值(TEER)的测定第20页
  4、 HRP 通透性检测第20-21页
  5、 罗丹明-鬼笔环肽直接荧光染色 F-actin第21页
  6、 Real-time PCR 检测 zo-1、claudin-5 和 occludin 的 mRNA 表达量第21页
  7、 TAT-tCNTF 在体外 BBB 模型中的通透性第21-22页
  8、 内吞抑制剂对 TAT-tCNTF 透膜性的影响第22页
  9、 细胞松弛素 D 对 TAT-tCNTF 作用于细胞 F-actin 的影响第22-23页
  10、 CD 对 TAT-tCNTF 引起细胞内钙离子稳定的影响第23页
  11、CD 对细胞 F-actin 的作用第23-24页
  12、统计学处理第24页
 三、 实验结果第24-34页
  1、 BBB 细胞模型的建立第24-25页
  2、 BBB 细胞模型的 TEER 值随着时间的变化第25-26页
  3、 不同 BBB 细胞模型的 HRP 通透量不同第26-27页
  4、 罗丹明-鬼笔环肽染色 F-actin 的分布不同第27-28页
  5、 四种 BBB 细胞模型中 TJs 的 mRNA 表达水平不同第28-30页
  6、 TAT-tCNTF 通过体外 BBB 细胞模型的量随着时间增多第30-31页
  7、 内吞抑制剂抑制 CF488A-TAT-tCNTF 的透膜第31-32页
  8、 TAT-tCNTF 在 CD 环境下对细胞 F-actin 的维持作用减弱第32-33页
  9、 CD 引起细胞内钙离子的浓度升高第33-34页
  10、 CD 对细胞 F-actin 表达无明显影响第34页
 四、 讨论第34-37页
第二章 TAT-tCNTF 对 Aβ损伤作用的影响第37-47页
 一、 实验材料第37-39页
  1、 实验细胞第37页
  2、 实验动物第37页
  3、 主要仪器第37页
  4、 主要试剂第37-39页
 二、 实验方法第39-42页
  1、 海马神经元的培养第39页
  2、 NSE 免疫细胞化学鉴定海马神经元第39-40页
  3、 TAT-tCNTF 对 Aβ损伤海马神经元的细胞活动度的影响第40页
  4、 TAT-tCNTF 对 Aβ海马神经元的早期凋亡的影响第40页
  5、 TAT-tCNTF 对 Aβ损伤小鼠的海马区的影响第40-42页
  6、 统计学处理第42页
 三、 实验结果第42-45页
  1、 成功分离并培养了原代海马神经元第42页
  2、 海马神经元的鉴定第42-43页
  3、 TAT-tCNTF 促进 Aβ损伤的海马神经元生长第43页
  4、 TAT-tCNTF 抑制 Aβ引起的海马神经元的早期凋亡第43-44页
  5、 TAT-tCNTF 减少 Aβ损伤小鼠海马区的淀粉样沉积第44-45页
 四、 讨论第45-47页
第三章 TAT-tCNTF 对 Aβ损伤小鼠的学习记忆影响第47-65页
 一、 实验材料第47-48页
  1、 实验动物第47页
  2、 主要仪器第47页
  3、 主要试剂第47-48页
 二、 实验方法第48-51页
  1、 小鼠腹腔注射 BrdU第48页
  2、 Morris 水迷宫检测小鼠的学习记忆能力第48-49页
  3、 被动逃避实验(穿梭箱实验)检测小鼠的学习记忆能力第49页
  4、 Ki67 免疫组化鉴定小鼠海马区细胞增殖情况第49页
  5、 NeuN 免疫组化鉴定小鼠海马区神经元存活能力第49页
  6、 GFAP+BrdU 双标观察小鼠海马区胶质细胞第49-50页
  7、 Western blot 半定量观察小鼠海马区蛋白表达量第50-51页
  8、 统计学处理第51页
 三、 实验结果第51-63页
  1、 动物实验示意图第51页
  2、 Aβ引起小鼠海马区的细胞增殖减少第51-52页
  3、 TAT-tCNTF 改善 Aβ损伤小鼠的学习记忆能力第52-54页
  4、 TAT-tCNTF 促进 Aβ损伤小鼠海马区的神经元存活第54-56页
  5、 TAT-tCNTF 能够减少 Aβ诱导的胶质细胞增生第56-57页
  6、 TAT-tCNTF 减少 Aβ小鼠海马区神经原纤维缠结第57-59页
  7、 TAT-tCNTF 通过激活 CNTF 通路从而缓解 Aβ小鼠的损伤第59-63页
 四、 讨论第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-70页
附录第70-72页
综述第72-78页
 参考文献第75-78页
个人简历第78-79页
致谢第79页

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