缩略词表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第一章 TAT-tCNTF 透膜机制的研究 | 第17-37页 |
一、 实验材料 | 第17-19页 |
1、 实验细胞 | 第17页 |
2、 主要仪器 | 第17-18页 |
3、 主要试剂和主要溶液 | 第18-19页 |
二、 实验方法 | 第19-24页 |
1、 细胞培养 | 第19-20页 |
2、 体外 BBB 细胞模型的建立 | 第20页 |
3、 跨内膜电阻值(TEER)的测定 | 第20页 |
4、 HRP 通透性检测 | 第20-21页 |
5、 罗丹明-鬼笔环肽直接荧光染色 F-actin | 第21页 |
6、 Real-time PCR 检测 zo-1、claudin-5 和 occludin 的 mRNA 表达量 | 第21页 |
7、 TAT-tCNTF 在体外 BBB 模型中的通透性 | 第21-22页 |
8、 内吞抑制剂对 TAT-tCNTF 透膜性的影响 | 第22页 |
9、 细胞松弛素 D 对 TAT-tCNTF 作用于细胞 F-actin 的影响 | 第22-23页 |
10、 CD 对 TAT-tCNTF 引起细胞内钙离子稳定的影响 | 第23页 |
11、CD 对细胞 F-actin 的作用 | 第23-24页 |
12、统计学处理 | 第24页 |
三、 实验结果 | 第24-34页 |
1、 BBB 细胞模型的建立 | 第24-25页 |
2、 BBB 细胞模型的 TEER 值随着时间的变化 | 第25-26页 |
3、 不同 BBB 细胞模型的 HRP 通透量不同 | 第26-27页 |
4、 罗丹明-鬼笔环肽染色 F-actin 的分布不同 | 第27-28页 |
5、 四种 BBB 细胞模型中 TJs 的 mRNA 表达水平不同 | 第28-30页 |
6、 TAT-tCNTF 通过体外 BBB 细胞模型的量随着时间增多 | 第30-31页 |
7、 内吞抑制剂抑制 CF488A-TAT-tCNTF 的透膜 | 第31-32页 |
8、 TAT-tCNTF 在 CD 环境下对细胞 F-actin 的维持作用减弱 | 第32-33页 |
9、 CD 引起细胞内钙离子的浓度升高 | 第33-34页 |
10、 CD 对细胞 F-actin 表达无明显影响 | 第34页 |
四、 讨论 | 第34-37页 |
第二章 TAT-tCNTF 对 Aβ损伤作用的影响 | 第37-47页 |
一、 实验材料 | 第37-39页 |
1、 实验细胞 | 第37页 |
2、 实验动物 | 第37页 |
3、 主要仪器 | 第37页 |
4、 主要试剂 | 第37-39页 |
二、 实验方法 | 第39-42页 |
1、 海马神经元的培养 | 第39页 |
2、 NSE 免疫细胞化学鉴定海马神经元 | 第39-40页 |
3、 TAT-tCNTF 对 Aβ损伤海马神经元的细胞活动度的影响 | 第40页 |
4、 TAT-tCNTF 对 Aβ海马神经元的早期凋亡的影响 | 第40页 |
5、 TAT-tCNTF 对 Aβ损伤小鼠的海马区的影响 | 第40-42页 |
6、 统计学处理 | 第42页 |
三、 实验结果 | 第42-45页 |
1、 成功分离并培养了原代海马神经元 | 第42页 |
2、 海马神经元的鉴定 | 第42-43页 |
3、 TAT-tCNTF 促进 Aβ损伤的海马神经元生长 | 第43页 |
4、 TAT-tCNTF 抑制 Aβ引起的海马神经元的早期凋亡 | 第43-44页 |
5、 TAT-tCNTF 减少 Aβ损伤小鼠海马区的淀粉样沉积 | 第44-45页 |
四、 讨论 | 第45-47页 |
第三章 TAT-tCNTF 对 Aβ损伤小鼠的学习记忆影响 | 第47-65页 |
一、 实验材料 | 第47-48页 |
1、 实验动物 | 第47页 |
2、 主要仪器 | 第47页 |
3、 主要试剂 | 第47-48页 |
二、 实验方法 | 第48-51页 |
1、 小鼠腹腔注射 BrdU | 第48页 |
2、 Morris 水迷宫检测小鼠的学习记忆能力 | 第48-49页 |
3、 被动逃避实验(穿梭箱实验)检测小鼠的学习记忆能力 | 第49页 |
4、 Ki67 免疫组化鉴定小鼠海马区细胞增殖情况 | 第49页 |
5、 NeuN 免疫组化鉴定小鼠海马区神经元存活能力 | 第49页 |
6、 GFAP+BrdU 双标观察小鼠海马区胶质细胞 | 第49-50页 |
7、 Western blot 半定量观察小鼠海马区蛋白表达量 | 第50-51页 |
8、 统计学处理 | 第51页 |
三、 实验结果 | 第51-63页 |
1、 动物实验示意图 | 第51页 |
2、 Aβ引起小鼠海马区的细胞增殖减少 | 第51-52页 |
3、 TAT-tCNTF 改善 Aβ损伤小鼠的学习记忆能力 | 第52-54页 |
4、 TAT-tCNTF 促进 Aβ损伤小鼠海马区的神经元存活 | 第54-56页 |
5、 TAT-tCNTF 能够减少 Aβ诱导的胶质细胞增生 | 第56-57页 |
6、 TAT-tCNTF 减少 Aβ小鼠海马区神经原纤维缠结 | 第57-59页 |
7、 TAT-tCNTF 通过激活 CNTF 通路从而缓解 Aβ小鼠的损伤 | 第59-63页 |
四、 讨论 | 第63-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-70页 |
附录 | 第70-72页 |
综述 | 第72-78页 |
参考文献 | 第75-78页 |
个人简历 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |