摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
目录 | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-30页 |
·苹果树腐烂病研究概况 | 第13-17页 |
·苹果树腐烂病的发生与危害 | 第13-14页 |
·病害循环 | 第14页 |
·苹果树腐烂病的症状及病原学研究 | 第14-15页 |
·病菌的致病性分化 | 第15页 |
·病菌的潜伏侵染及致病机理研究 | 第15-16页 |
·苹果种质资源对腐烂病的抗病性 | 第16-17页 |
·苹果树腐烂病的防治现状 | 第17页 |
·植物病原真菌的致病机理研究 | 第17-20页 |
·胞壁水解酶 | 第18-19页 |
·真菌毒素 | 第19页 |
·效应蛋白 | 第19-20页 |
·基于二代测序技术的转录组学研究 | 第20-24页 |
·转录组的定义 | 第21页 |
·转录组学研究方法 | 第21-24页 |
·基因功能验证 | 第24-29页 |
·基因标签随机插入法 | 第25页 |
·RNA诱导的基因沉默(RNAi) | 第25-27页 |
·基因破坏或基因敲除 | 第27-29页 |
·本研究的目的与意义 | 第29-30页 |
第二章 苹果树腐烂病菌的侵染过程 | 第30-41页 |
·材料方法 | 第30-32页 |
·植物材料 | 第30页 |
·病菌接种体的制备 | 第30-31页 |
·扫描电镜样品的制备 | 第31页 |
·透射电镜样品的制备 | 第31-32页 |
·结果分析 | 第32-39页 |
·苹果树腐烂病菌分生孢子的萌发和侵染 | 第32-34页 |
·病菌菌丝体在寄主组织内定殖和扩展 | 第34-36页 |
·苹果树腐烂病菌侵染过程的细胞学观察 | 第36-39页 |
·结论与讨论 | 第39-41页 |
第三章 寄主细胞壁主要成分的细胞化学标记 | 第41-49页 |
·材料和方法 | 第41-44页 |
·供试材料 | 第41页 |
·细胞壁主要成分的细胞化学标记 | 第41-44页 |
·细胞化学标记对照设置 | 第44页 |
·金标记的数据统计 | 第44页 |
·结果分析 | 第44-48页 |
·寄主细胞壁主要成分的细胞化学标记 | 第44-46页 |
·果胶的免疫细胞化学标记 | 第46-48页 |
·结论与讨论 | 第48-49页 |
第四章 苹果树腐烂病菌侵染过程的转录组分析 | 第49-69页 |
·材料和方法 | 第50-54页 |
·供试菌株及其培养 | 第50页 |
·供试苹果枝条及接种 | 第50页 |
·样品总RNA提取、测序文库构建 | 第50-51页 |
·Cluster生成及测序 | 第51页 |
·原始数据处理、序列拼接以及差异表达分析 | 第51-52页 |
·序列注释及效应蛋白预测 | 第52页 |
·基因表达的qRT-PCR验证 | 第52-54页 |
·结果与分析 | 第54-65页 |
·转录组测序质量控制 | 第54-55页 |
·V.mali转录组序列分析及拼接 | 第55-56页 |
·基因注释和效应蛋白预测 | 第56-57页 |
·差异表达基因及qPCR验证 | 第57-59页 |
·基因本体论(Gene Ontology)和京都基因与基因组百科全书(K.EGG)功能注释 | 第59-61页 |
·差异表达基因的GO和KEGG功能富集分析 | 第61-64页 |
·致病相关基因的预测与功能分类 | 第64-65页 |
·结论与讨论 | 第65-69页 |
第五章 苹果树腐烂病菌果胶酶基因的功能分析 | 第69-84页 |
·材料方法 | 第69-78页 |
·供试菌株和质粒 | 第69页 |
·常用试剂和培养基 | 第69-70页 |
·实验方法 | 第70-78页 |
·结果与分析 | 第78-81页 |
·果胶酶基因(Vmpg-2和Vmpg-3)敲除盒的构建 | 第78-79页 |
·PEG介导的原生质体转化 | 第79页 |
·转化子的PCR和Southern杂交检测 | 第79-80页 |
·转化子的Southern验证及阳性突变体的致病力测定 | 第80-81页 |
·结论与讨论 | 第81-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
个人简介 | 第96页 |