| 目录 | 第1-13页 |
| 摘要 | 第13-16页 |
| 主要符号表 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-37页 |
| 1 棉花细胞质雄性不育研究进展 | 第17-25页 |
| ·棉花细胞质雄性不育的遗传学研究 | 第18-19页 |
| ·棉花细胞质雄性不育的细胞学研究 | 第19-20页 |
| ·棉花细胞质雄性不育的生理生化研究 | 第20-21页 |
| ·棉花细胞质雄性不育的分子生物学研究 | 第21-24页 |
| ·棉花细胞质雄性不育的胞质效应研究 | 第24-25页 |
| 2 转录组学在植物雄性不育中研究进展 | 第25-30页 |
| ·cDNA-AFLP技术的研究进展 | 第26-27页 |
| ·RNA提取优化 | 第26页 |
| ·内切酶组合选择 | 第26页 |
| ·反应体系优化 | 第26-27页 |
| ·检测体系优化 | 第27页 |
| ·cDNA-AFLP技术在植物雄性不育研究中的应用 | 第27-30页 |
| ·基因功能标记分析 | 第27-28页 |
| ·基因表达特性研究 | 第28-29页 |
| ·特异表达基因的分离研究 | 第29-30页 |
| 3 蛋白质组学在植物雄性不育中研究进展 | 第30-34页 |
| ·蛋白质组学技术的研究进展 | 第30-32页 |
| ·蛋白样品提取 | 第30-31页 |
| ·双向电泳 | 第31页 |
| ·质谱(mass spectrometry,MS)技术 | 第31-32页 |
| ·蛋白质组学技术在植物雄性不育研究中的应用 | 第32-34页 |
| ·光温敏雄性不育蛋白质组研究 | 第32页 |
| ·核雄性不育蛋白质组研究 | 第32-33页 |
| ·细胞质雄性不育蛋白质组研究 | 第33-34页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第34-36页 |
| 5 技术路线图 | 第36-37页 |
| 第二章 棉花细胞质雄性不育系亚棉A的形态学、胞质鉴定及细胞学研究 | 第37-51页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·供试主要试剂和所用仪器 | 第38页 |
| ·供试试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·花器形态观察 | 第38-39页 |
| ·线粒体DNA(mtDNA)的提取和RAPD分析 | 第39-41页 |
| ·细胞学观察 | 第41页 |
| 2 结果 | 第41-48页 |
| ·棉花细胞质雄性不育系与其保持系花器官的形态特征 | 第41-42页 |
| ·不育系mtDNA的RAPD分析 | 第42-43页 |
| ·棉花花粉发育时期的划分 | 第43页 |
| ·棉花亚棉A与亚棉B小孢子发育的显微结构观察 | 第43-45页 |
| ·棉花亚棉A与亚棉B小孢子发育的亚显微结构观察 | 第45-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| ·棉花亚棉A细胞质雄性不育系小孢子败育时期及特点 | 第48-49页 |
| ·绒毡层延迟发育与雄性不育的关系 | 第49-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 第三章 棉花细胞质雄性不育系亚棉A的生理生化研究 | 第51-63页 |
| 1 材料与方法 | 第52-56页 |
| ·研究材料 | 第52页 |
| ·供试主要试剂和所用仪器 | 第52页 |
| ·过氧化物酶活性测定试剂 | 第52页 |
| ·超氧化物歧化酶活性测定试剂 | 第52页 |
| ·细胞色素C氧化酶活性测定试剂 | 第52页 |
| ·琥珀酸脱氢酶活性测定试剂 | 第52页 |
| ·供试主要仪器 | 第52页 |
| ·研究方法 | 第52-56页 |
| ·过氧化物酶活性测定 | 第52-53页 |
| ·超氧化物歧化酶活性测定 | 第53-54页 |
| ·细胞色素C氧化酶活性测定 | 第54-55页 |
| ·琥珀酸脱氢酶活性测定 | 第55页 |
| ·光合速率及其它光合指标的测定 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-60页 |
| ·棉花亚棉A与亚棉B小孢子不同发育时期部分生化指标的变化 | 第56-57页 |
| ·棉花亚棉A与亚棉B不同生育时期光合指标的变化 | 第57-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| ·棉花雄性不育材料花蕾中生化指标变化与不育的关系 | 第60-61页 |
| ·棉花雄性不育材料光合参数变化与育性的关系 | 第61-62页 |
| 4 小结 | 第62-63页 |
| 第四章 棉花细胞质雄性不育系亚棉A不育相关基因片段的克隆 | 第63-116页 |
| 1 材料与方法 | 第63-83页 |
| ·供试材料 | 第63-64页 |
| ·花蕾的采集 | 第64页 |
| ·供试试剂及仪器 | 第64-65页 |
| ·供试试剂 | 第64-65页 |
| ·供试仪器 | 第65页 |
| ·供试方法 | 第65-83页 |
| ·总RNA的提取与纯化方法 | 第65-68页 |
| ·RNA的纯化、浓缩与检测 | 第68-69页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第69-70页 |
| ·cDNA的合成 | 第70-73页 |
| ·cDNA-AFLP分析 | 第73-77页 |
| ·cDNA-AFLP的测序胶电泳分析 | 第77-78页 |
| ·差异片段的回收与重扩增 | 第78-79页 |
| ·差异片段的分子克隆、鉴定与测序 | 第79-81页 |
| ·差异表达片段序列的生物信息学分析 | 第81-82页 |
| ·差异表达片段的半定量RT-PCR和荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第82-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-107页 |
| ·棉花总RNA提取 | 第83-87页 |
| ·小量提取棉花总RNA的方法对比 | 第83-86页 |
| ·大量提取棉花总RNA的方法对比 | 第86-87页 |
| ·棉花总RNA提取 | 第87-88页 |
| ·mRNA分离及cDNA合成 | 第88-89页 |
| ·双链cDNA的内参检测 | 第89页 |
| ·酶切连接和预扩增结果检测 | 第89-90页 |
| ·选择性扩增结果检测 | 第90-93页 |
| ·差异片段的回收、二次扩增 | 第93-94页 |
| ·差异片段的克隆 | 第94-95页 |
| ·差异表达片段的同源性分析 | 第95-102页 |
| ·差异表达片段的GO分析 | 第102-104页 |
| ·差异表达片段的KEGG代谢通路分析 | 第104页 |
| ·差异表达片段的半定量RT-PCR和荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第104-107页 |
| 3 讨论 | 第107-115页 |
| ·cDNA-AFLP技术的可靠性及其影响因素 | 第107-109页 |
| ·实验材料选择与样品采集 | 第107-108页 |
| ·RNA的提取 | 第108-109页 |
| ·差异条带回收 | 第109页 |
| ·cDNA-AFLP技术在雄性不育研究中的应用 | 第109-110页 |
| ·棉花细胞质雄性不育机制的探讨 | 第110-115页 |
| ·差异条带来源 | 第110-111页 |
| ·差异条带表达模式 | 第111页 |
| ·差异条带同源基因 | 第111-115页 |
| 4 小结 | 第115-116页 |
| 第五章 棉花细胞质雄性不育系亚棉A不育相关基因全长的克隆和生物信息学分析 | 第116-140页 |
| 1 材料与方法 | 第117-124页 |
| ·供试材料 | 第117页 |
| ·供试试剂及仪器 | 第117页 |
| ·方法 | 第117-124页 |
| ·DNA的提取 | 第117-118页 |
| ·cDNA-AFLP差异条带T74有无内含子验证 | 第118页 |
| ·过氧化物酶基因GhPrx65克隆 | 第118-120页 |
| ·RNA的提取 | 第120-121页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第121页 |
| ·cDNA的内参检测 | 第121页 |
| ·3’RACE | 第121-122页 |
| ·过氧化物酶基因GhPrx65 cDNA序列获得 | 第122-123页 |
| ·过氧化物酶基因GhPrx65的生物信息学分析 | 第123-124页 |
| ·过氧化物酶基因GhPrx65的表达分析 | 第124页 |
| 2 结果与分析 | 第124-136页 |
| ·T74条带基因组分析 | 第124-125页 |
| ·GhPrx65全长cDNA和基因组序列的获得与功能分析 | 第125-126页 |
| ·GhPrx65编码蛋白一级结构和理化性质预测 | 第126-127页 |
| ·GhPrx65编码蛋白二级结构预测 | 第127-128页 |
| ·GhPrx65编码蛋白亚细胞定位和信号肽预测 | 第128-129页 |
| ·GhPrx65编码蛋白磷酸化位点预测 | 第129-130页 |
| ·GhPrx65编码蛋白保守结构域和跨膜结构域分析 | 第130-131页 |
| ·GhPrx65编码蛋白疏水性/亲水性分析 | 第131-132页 |
| ·GhPrx65编码蛋白与棉种的28个Class Ⅲ过氧化酶的多重比较 | 第132页 |
| ·GhPrx65编码蛋白进化树分析 | 第132-135页 |
| ·GhPrx65表达分析 | 第135-136页 |
| 3 讨论 | 第136-139页 |
| ·GhPrx65编码蛋白结构与过氧化物酶之间的关系 | 第136-137页 |
| ·ClassⅢ过氧化物酶与育性关系 | 第137-139页 |
| 4 小结 | 第139-140页 |
| 第六章 棉花细胞质雄性不育系亚棉A的差异蛋白质组学研究 | 第140-161页 |
| 1 材料与方法 | 第140-147页 |
| ·供试材料 | 第140-141页 |
| ·供试试剂 | 第141页 |
| ·供试溶液 | 第141-142页 |
| ·供试仪器 | 第142页 |
| ·供试方法 | 第142-147页 |
| ·总蛋白质的提取 | 第142页 |
| ·总蛋白浓度的测定 | 第142页 |
| ·第一向等电聚胶电泳 | 第142-143页 |
| ·第二向SDS-PAGE凝胶电泳 | 第143-144页 |
| ·蛋白胶的制备 | 第144页 |
| ·图像采集和差异分析 | 第144-145页 |
| ·差异蛋白斑点的胶内酶切 | 第145页 |
| ·差异蛋白质的质谱分析和鉴定 | 第145-146页 |
| ·差异蛋白质的功能分析 | 第146页 |
| ·差异蛋白质功能富集分析 | 第146页 |
| ·差异蛋白质互作网络分析 | 第146页 |
| ·差异蛋白质荧光定量PCR验证 | 第146-147页 |
| 2 结果与分析 | 第147-158页 |
| ·不育系和保持系败育关键期的花蕾蛋白质组差异图谱分析 | 第147-152页 |
| ·差异表达蛋白质的质谱鉴定及数据分析 | 第152页 |
| ·差异表达蛋白质的功能分析 | 第152-155页 |
| ·差异表达蛋白质的富集分析 | 第155-156页 |
| ·差异表达蛋白质相互作用关系网络分析 | 第156页 |
| ·差异表达蛋白质在mRNA水平的验证 | 第156-158页 |
| 3 讨论 | 第158-160页 |
| ·ATP合酶与细胞质雄性不育的关系 | 第158-159页 |
| ·ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase与细胞质雄性不育的关系 | 第159页 |
| ·low molecular weight heat shock protein与细胞质雄性不育的关系 | 第159-160页 |
| 4 小结 | 第160-161页 |
| 第七章 棉花细胞质雄性不育系的转育及恢复系的选育 | 第161-179页 |
| 1 材料与方法 | 第162-166页 |
| ·供试材料 | 第162-163页 |
| ·供试试剂及仪器 | 第163页 |
| ·供试方法 | 第163-166页 |
| ·亚棉A不育系的转育与同型保持系的选育 | 第163-164页 |
| ·亚棉A不育系的恢复系选育 | 第164-166页 |
| ·恢复系的遗传研究 | 第166页 |
| 2 结果与分析 | 第166-176页 |
| ·亚棉A不育系与保持系的选育 | 第166-170页 |
| ·不育系亚棉A的恢复系选育及杂种性状表现 | 第170-174页 |
| ·(A×R)F_2世代的育性分离 | 第174-175页 |
| ·(A×R)F_1×B或A×(A×R)F_1测交群体的育性分离 | 第175-176页 |
| 3 讨论 | 第176-178页 |
| ·棉花雄性不育材料农艺性状 | 第176-177页 |
| ·关于棉花细胞质雄性不育系育性恢复的遗传模式 | 第177-178页 |
| 4 小结 | 第178-179页 |
| 第八章 主要结论、创新点及进一步研究 | 第179-184页 |
| 1 全文结论 | 第179-181页 |
| 2 创新点 | 第181-182页 |
| 3 进一步研究 | 第182-184页 |
| 参考文献 | 第184-199页 |
| Abstract | 第199-205页 |
| 致谢 | 第205-207页 |
| 作者简介 | 第207页 |
