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天牛科基因条形码构建及分子快速鉴定技术研究

致谢第1-4页
摘要第4-6页
Abstract第6-12页
第一章 文献综述第12-30页
 1. 昆虫标本脱氧核糖核酸(DNA)保存与提取方法研究进展第12-16页
   ·标本 DNA 的特性第12-13页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)的降解第12页
     ·化学修饰作用第12页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)与蛋白质分子交联第12-13页
     ·多聚酶链式反应(PCR)抑制子第13页
   ·标本 DNA 的提取第13-15页
     ·样品前处理第13-14页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)的提取第14-15页
   ·标本 DNA 的扩增第15页
     ·扩增策略和条件第15页
     ·多聚酶链式反应(PCR)扩增存在的问题第15页
   ·标本 DNA 测序与甄别第15-16页
   ·脱氧核糖核酸(DNA)研究展望第16页
 2. 昆虫线粒体基因第16-18页
   ·昆虫线粒体 DNA 的组成及在系统发育分析中的优势第16页
   ·线粒体 DNA 在昆虫系统发育分析中的应用第16-17页
   ·线粒体 DNA 在昆虫近缘种分类和鉴定中的应用第17-18页
 3. 细胞色素 c 氧化酶(COI)基因第18-20页
   ·细胞色素 c 氧化酶(COI)基因概述第18页
   ·细胞色素 c 氧化酶(COI)基因在昆虫系统学研究中的应用第18-20页
     ·种及种下阶元的分类鉴定第18-19页
     ·种群的遗传变异和进化研究第19页
     ·种上阶元的系统发育分析第19-20页
 4. 昆虫分子系统学第20-22页
   ·分子系统学定义及特点第20-21页
   ·分子系统学研究方法第21页
   ·系统树构建方法第21-22页
     ·距离法第21-22页
     ·简约法第22页
     ·极似然法第22页
 5. 基因条形码研究第22-28页
   ·基因条形码的定义第23页
   ·脱氧核糖核酸(DNA)条形码优点第23-24页
   ·脱氧核糖核酸(DNA)条形码的选择标准第24页
   ·脱氧核糖核酸(DNA)条形码的工作流程第24页
   ·条形码分析方法第24-26页
   ·脱氧核糖核酸(DNA)条形码在动物分类中的应用第26-27页
   ·脱氧核糖核酸(DNA)条形码在检疫检验领域的应用前景第27-28页
 6. 本研究的目的和意义第28-30页
第二章 天牛标本的保存方式与 DNA 提取方法比较研究第30-46页
 1. 天牛幼虫保存方法与 DNA 提取方法比较第31-37页
   ·材料与方法第31-32页
     ·实验材料第31页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)提取第31-32页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)纯度及质量浓度检测方法第32页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)凝胶电泳的检测第32页
     ·目标 DNA 扩增及 COI 序列测定第32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)浓度与纯度第32-33页
     ·天牛 DNA 的电泳检测第33-36页
   ·结论与讨论第36-37页
 2. 天牛成虫保存方法比较第37-41页
   ·材料与方法第37-38页
     ·实验材料第37页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)提取第37-38页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)纯度及质量浓度检测方法第38页
     ·多聚酶链式反应(PCR)扩增第38页
     ·目标 DNA 扩增及 COI 序列测定第38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)质量与浓度第38-39页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)凝胶电泳检测第39-40页
     ·样品 DNA 模板的 RAPD 分析第40-41页
   ·结论与讨论第41页
 3. 昆虫样品 DNA 微量提取技术研究第41-46页
   ·材料与方法第42-43页
     ·实验材料第42页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)提取与 PCR 扩增第42-43页
     ·目标 DNA 扩增第43页
   ·结果与分析第43-44页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)凝胶电泳检测第43-44页
   ·结论与讨论第44-46页
第三章 天牛科昆虫 mtDNACOI 基因分析第46-66页
 1. 细胞色素 c 氧化酶(COI)全基因序列的分析研究第46-59页
   ·材料和方法第46-48页
     ·实验材料第46-47页
     ·基因组 DNA 的提取第47页
     ·多聚酶链式反应(PCR)扩增 COI 基因片段第47页
     ·目的片段的克隆和测序第47页
     ·网上序列下载第47页
     ·序列组成分析第47页
     ·脱氧核糖核酸(DNA)序列数据的处理及分子系统树的构建第47-48页
   ·结果与分析第48-57页
     ·样品扩增及电泳第48-49页
     ·细胞色素 c 氧化酶(COI)基因的组成第49-52页
     ·系统树构建及分子进化特征分析第52-57页
     ·结论与讨论第57-59页
 2. 细胞色素 c 氧化酶(COI)基因片段研究第59-66页
   ·实验方法第59-60页
     ·序列的剪裁第59页
     ·两段序列的基因分析第59页
     ·系统树构建第59-60页
   ·结果与分析第60-64页
     ·基因片段信息比较第60页
     ·系统树构建及比较分析第60-64页
   ·结论与讨论第64-66页
第四章 天牛科基因条形码的构建第66-84页
 1. 材料与方法第66-73页
   ·研究样品第66-69页
   ·脱氧核糖核酸(DNA)的提取第69页
   ·多聚酶链式反应(PCR)扩增与纯化第69-70页
     ·多聚酶链式反应(PCR)扩增第69页
     ·多聚酶链式反应(PCR)产物的回收及序列测定第69-70页
   ·基因银行 GenBanK 上同片段序列下载第70-72页
   ·序列编辑及排序第72-73页
 2. 分结果与分析第73-82页
   ·基因组总 DNA 的提取、PCR 扩增及测序第73页
   ·样品扩增及电泳第73-74页
   ·测序结果与分析第74-81页
   ·特殊基因第81-82页
 3. 结论与讨论第82-84页
第五章 分子快速鉴定技术研究第84-94页
 1. 材料与方法第84-88页
   ·实验材料第84-86页
   ·脱氧核糖核酸(DNA)的提取第86页
   ·多聚酶链式反应(PCR)引物设计第86-87页
     ·引物设计原则第86-87页
     ·引物设计第87页
   ·特异性引物设计第87-88页
   ·多聚酶链式反应(PCR)扩增反应体系及反应条件的筛选第88页
 2. 结果与分析第88-92页
 3. 结论与讨论第92-94页
第六章 全文总结第94-96页
 1. 主要结果第94-95页
   ·天牛标本的保存方式与 DNA 提取方法第94页
   ·天牛科线粒体 DNACOI 基因研究第94页
   ·天牛科基因条形码构建第94页
   ·特殊基因分析第94-95页
   ·快速分子鉴定技术建立第95页
 2. 主要创新点第95-96页
参考文献第96-104页
摘要第104-106页
Abstract第106-107页

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